Name: Przedkliniczny, kontrolowany model oddziaływania kory mózgowej w przypadku krwotoku pourazowego, stłuczenia i zapalenia nerwów (Wideo) | JoVE Journal
Uploaded: 2020-06-10T14:30:00.000+00:00
Duration: 6 min 50 s
Description: Poznaj model kontrolowanego urazu kory mózgowej u myszy do badania krwotoku pourazowego i neurozapalenia. Ta metoda pozwala kontrolować nasilenie uszkodzenia mózgu poprzez manipulację parametrami uderzenia.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Dziękujemy Danye Jiang za redakcję manuskryptu i wnikliwy wkład. Dziękujemy Jhih Syuan Lin za pomoc w przygotowaniu manuskryptu. Prace te były wspierane przez Ministerstwo Nauki i Technologii Tajwanu (MOST 107-2320-B-002-063-MY2) na rzecz CFC.

Wszystkie procedury opisane w tym protokole zostały przeprowadzone za zgodą Instytucjonalnego Komitetu ds. Opieki i Użytkowania Zwierząt w Szpitalu Ogólnym Cheng Hsin oraz National Taiwan University College of Medicine. W tym protokole wykorzystano ośmio- do dziesięciotygodniowych samców myszy typu dzikiego C57BL/6.
1. Indukcja znieczulenia
<ol>
	<li>Znieczulić mysz ~4% izofluranem zmieszanym z powietrzem w pomieszczeniu w ilości ~0,2 l/min w komorze indukcyjnej podłączonej do parownika izofluranu.</li>
	<li>Upewnij się, że wzorzec oddechowy jest gładki. Sprawdź głębokość znieczulenia, potwierdzając brak odruchu szczypania palców u zwierzęcia.</li>
</ol>
2. Przygotowanie przedoperacyjne
<ol>
	<li>Ogol głowę myszy za pomocą elektrycznych maszynek do strzyżenia w kierunku od ogonowego do rostralnego. Nie przycinaj wąsów myszy. 
	UWAGA: Utrata wąsów może mieć wpływ na dokładność kolejnych wyników testów behawioralnych.</li>
	<li>Umieść mysz w ramce stereotaktycznej. Ostrożnie włóż nauszniki do kanałów słuchowych. Upewnij się, że głowica myszy jest stabilizowana równomiernie przez oba nauszniki.</li>
	<li>Wprowadzić stożek nosowy i utrzymywać znieczulenie na poziomie 1% - 2% izofluranu przez cały czas trwania zabiegu.</li>
	<li>Nałóż maść okulistyczną na oba oczy, aby zapobiec wysuszeniu podczas zabiegu. Trzymaj zwierzę na poduszce grzewczej, aby utrzymać temperaturę ciała 37 °C.</li>
	<li>Zdezynfekuj ogoloną głowę betadyną, a następnie 70% alkoholem za pomocą sterylnych wacików. Powtórz trzy razy.</li>
</ol>
3. Chirurgia CCI
<ol>
	<li>Przed nacięciem należy podać podskórnie 100 μl bupiwakainy (0,25%) za pomocą igły insulinowej o stężeniu 31 g. Delikatnie wmasuj miejsce wstrzyknięcia, aby uzyskać lepsze wchłanianie. 
	UWAGA: Ten znieczulenie miejscowe zapewnia ulgę w bólu bezpośrednio w miejscu zabiegu.</li>
	<li>Wykonaj podłużne nacięcie (~1,5 cm) wzdłuż linii środkowej na skórze głowy za pomocą skalpela lub nożyczek. Użyj hemostatu, aby przytrzymać skórę na prawą stronę i pozostaw odsłoniętą czaszkę do wyschnięcia na 1 minutę. Użyj sterylnego bawełnianego wacika, aby usunąć resztki krwi i tkanek z czaszki.</li>
	<li>Sprawdź, czy głowica myszy jest wypoziomowana w płaszczyźnie poziomej.
	<ol>
		<li>Zidentyfikuj anatomiczne punkty orientacyjne Bregma i Lambda i zaznacz oba miejsca sterylnym markerem chirurgicznym/ołówkiem.</li>
		<li>Upewnij się, że głowa zwierzęcia jest wypoziomowana w kierunku rostralno-ogonowym. W tym celu należy zmierzyć współrzędne Z zarówno leku Bregma, jak i Lambda za pomocą igły insuliny o sile 31 G przymocowanej do ramy stereotaktycznej. 
		UWAGA: W razie potrzeby wyreguluj nausznik w pionie.</li>
		<li>Wykonaj ustawienie głowy zwierzęcia w poziomie, postępując zgodnie z tą samą procedurą, sprawdzając współrzędne Z na linii środkowej wraz z dwoma odpowiadającymi jej miejscami po lewej i prawej stronie linii środkowej i w razie potrzeby wyreguluj nauszniki. 
		UWAGA: Równe i stabilne ułożenie głowy zwierzęcia ma kluczowe znaczenie dla odtwarzalności i wiarygodności modelu CCI.</li>
	</ol>
	</li>
	<li>Użyj tej samej igły do insuliny 31 G, aby zidentyfikować miejsce kraniektomii. Ustawić początek układu współrzędnych XY na Bregma i przesunąć igłę w bok o 3 mm w prawo. Zaznacz to miejsce jako miejsce kraniektomii i narysuj okrąg o średnicy 4 mm na czaszce za pomocą sterylnego markera chirurgicznego/ołówka.</li>
	<li>Użyj szybkoobrotowego mikrowiertła z trepanacją (średnica 4 mm), aby wyciąć wzdłuż okręgu obrysowanego ołówkiem, aby utworzyć otwarty otwór o średnicy 4 mm. Użyj ustawienia prędkości 20 000 obr./min. Unikaj stosowania nadmiernego ciśnienia. 
	UWAGA: Wykonaj ten krok szybko (zwykle w ciągu 30 s do 1 minuty), aby zapobiec uszkodzeniom termicznym mózgu. Wywieranie nadmiernego nacisku podczas wiercenia może prowadzić do przypadkowej penetracji, która może ściskać i uszkodzić powierzchnię mózgu.</li>
	<li>Ostrożnie usuń płat kostny za pomocą pęsety i tymczasowo przechowuj go w lodowatym roztworze soli fizjologicznej. Delikatnie spłucz otwór zwykłą solą fizjologiczną, a następnie wyciśnij nacisk na powierzchnię mózgu końcówką bawełnianego wacika, aby zatrzymać krwawienie.</li>
	<li>Ustawić zaokrągloną końcówkę udaru o średnicy 2.5 mm na urządzeniu CCI pod kątem 22.5°. Wyzeruj końcówkę udarową do powierzchni opony twardej. Ustaw parametry uderzenia na skrzynce sterowniczej na prędkość 4 m/s i głębokość odkształcenia 2 mm. Schowaj metalową końcówkę. 
	UWAGA: Zerowanie końcówki, gdy jest ona statycznie i lekko dociśnięta do powierzchni opony twardej w pozycji pełnego skoku, poprawia dokładność punktu zerowego i odtwarzalność poziomu urazu.</li>
	<li>Wypuścić tłok, aby wytworzyć zakleszczenie w mózgu. Umieść sterylny bawełniany wacik na zranionym obszarze, aby zatrzymać krwawienie.</li>
	<li>Umieść płat kostny z powrotem w mózgu myszy i zabezpiecz cementem dentystycznym. Zamknij skórę głowy za pomocą kleju tkankowego (np. 3M Vetbond).</li>
</ol>
4. Rekonwalescencja pooperacyjna
<ol>
	<li>Umieść mysz w czystej klatce regeneracyjnej z pościelą pod lampą grzewczą aż do pełnego wyzdrowienia.</li>
	<li>Zapewnij zwilżony pokarm i podawaj podskórnie ketoprofen (5 mg/kg) przez dwa kolejne dni po zabiegu.</li>
	<li>Powyższe procedury należy wykonać, z wyjątkiem kroków 3.7 i 3.8 w odniesieniu do pozorowanych zwierząt kontrolnych.</li>
</ol>
5. Eutanazja myszy
<ol>
	<li>Eutanazja myszy w dniu badania przez przedawkowanie izofluranu, a następnie dekapitacja. 
	UWAGA: W celu eutanazji zwierząt doświadczalnych przed pobraniem próbki można zastosować kilka strategii.</li>
	<li>Zbierz próbki mózgu do analizy histologicznej.</li>
</ol>

<ol><li>Maas, A. I. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Traumatic+brain+injury%3A+integrated+approaches+to+improve+prevention%2C+clinical+care%2C+and+research%5BTitle%5D)+AND+%22The+Lancet+Neurology%22%5BJournal%5D)">Traumatic brain injury: integrated approaches to improve prevention, clinical care, and research.</a> The Lancet Neurology. 16 (12), 987-1048 (2017).</li>
<li>Taylor, C. A., Bell, J. M., Breiding, M. J., Xu, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Traumatic+Brain+Injury-Related+Emergency+Department+Visits%2C+Hospitalizations%2C+and+Deaths+-+United+States%2C+2007+and+2013%5BTitle%5D)+AND+%22Morbidity+and+Mortality+Weekly+Report+Surveillance+Summaries%22%5BJournal%5D)">Traumatic Brain Injury-Related Emergency Department Visits, Hospitalizations, and Deaths - United States, 2007 and 2013.</a> Morbidity and Mortality Weekly Report Surveillance Summaries. 66 (9), 1-16 (2007).</li>
<li>Pearn, M. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pathophysiology+Associated+with+Traumatic+Brain+Injury%3A+Current+Treatments+and+Potential+Novel+Therapeutics%5BTitle%5D)+AND+%22Cellular+and+Molecular+Neurobiology%22%5BJournal%5D)">Pathophysiology Associated with Traumatic Brain Injury: Current Treatments and Potential Novel Therapeutics.</a> Cellular and Molecular Neurobiology. 37 (4), 571-585 (2017).</li>
<li>Nyanzu, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Improving+on+Laboratory+Traumatic+Brain+Injury+Models+to+Achieve+Better+Results%5BTitle%5D)+AND+%22International+Journal+of+Medical+Sciences%22%5BJournal%5D)">Improving on Laboratory Traumatic Brain Injury Models to Achieve Better Results.</a> International Journal of Medical Sciences. 14 (5), 494-505 (2017).</li>
<li>Zhao, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Iron-induced+neuronal+damage+in+a+rat+model+of+post-traumatic+stress+disorder%5BTitle%5D)+AND+%22Neuroscience%22%5BJournal%5D)">Iron-induced neuronal damage in a rat model of post-traumatic stress disorder.</a> Neuroscience. 330, 90-99 (2016).</li>
<li>Cepeda, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Contrecoup+Traumatic+Intracerebral+Hemorrhage%3A+A+Geometric+Study+of+the+Impact+Site+and+Association+with+Hemorrhagic+Progression%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Neurotrauma%22%5BJournal%5D)">Contrecoup Traumatic Intracerebral Hemorrhage: A Geometric Study of the Impact Site and Association with Hemorrhagic Progression.</a> Journal of Neurotrauma. 33 (11), 1034-1046 (2016).</li>
<li>Robicsek, S. A., Bhattacharya, A., Rabai, F., Shukla, K., Dore, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Blood-Related+Toxicity+after+Traumatic+Brain+Injury%3A+Potential+Targets+for+Neuroprotection%5BTitle%5D)+AND+%22Molecular+Neurobiology%22%5BJournal%5D)">Blood-Related Toxicity after Traumatic Brain Injury: Potential Targets for Neuroprotection.</a> Molecular Neurobiology. 57 (1), 159-178 (2020).</li>
<li>Morganti-Kossmann, M. C., Semple, B. D., Hellewell, S. C., Bye, N., Ziebell, J. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+complexity+of+neuroinflammation+consequent+to+traumatic+brain+injury%3A+from+research+evidence+to+potential+treatments%5BTitle%5D)+AND+%22Acta+Neuropathologica%22%5BJournal%5D)">The complexity of neuroinflammation consequent to traumatic brain injury: from research evidence to potential treatments.</a> Acta Neuropathologica. 137 (5), 731-755 (2019).</li>
<li>Ramlackhansingh, A. F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Inflammation+after+trauma%3A+microglial+activation+and+traumatic+brain+injury%5BTitle%5D)+AND+%22Annals+of+Neurology%22%5BJournal%5D)">Inflammation after trauma: microglial activation and traumatic brain injury.</a> Annals of Neurology. 70 (3), 374-383 (2011).</li>
<li>Wang, G. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Microglia%2Fmacrophage+polarization+dynamics+in+white+matter+after+traumatic+brain+injury%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Cerebral+Blood+Flow+%26+Metabolism%22%5BJournal%5D)">Microglia/macrophage polarization dynamics in white matter after traumatic brain injury.</a> Journal of Cerebral Blood Flow & Metabolism. 33 (12), 1864-1874 (2013).</li>
<li>Karve, I. P., Taylor, J. M., Crack, P. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+contribution+of+astrocytes+and+microglia+to+traumatic+brain+injury%5BTitle%5D)+AND+%22British+Journal+of+Pharmacology%22%5BJournal%5D)">The contribution of astrocytes and microglia to traumatic brain injury.</a> British Journal of Pharmacology. 173 (4), 692-702 (2016).</li>
<li>Huber-Lang, M., Lambris, J. D., Ward, P. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Innate+immune+responses+to+trauma%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Immunology%22%5BJournal%5D)">Innate immune responses to trauma.</a> Nature Immunology. 19 (4), 327-341 (2018).</li>
<li>Russo, M. V., McGavern, D. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Inflammatory+neuroprotection+following+traumatic+brain+injury%5BTitle%5D)+AND+%22Science%22%5BJournal%5D)">Inflammatory neuroprotection following traumatic brain injury.</a> Science. 353 (6301), 783-785 (2016).</li>
<li>Xiong, Y., Mahmood, A., Chopp, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Animal+models+of+traumatic+brain+injury%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Reviews+Neuroscience%22%5BJournal%5D)">Animal models of traumatic brain injury.</a> Nature Reviews Neuroscience. 14 (2), 128-142 (2013).</li>
<li>Johnson, V. E., Meaney, D. F., Cullen, D. K., Smith, D. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Animal+models+of+traumatic+brain+injury%5BTitle%5D)+AND+%22Handbook+of+Clinical+Neurology%22%5BJournal%5D)">Animal models of traumatic brain injury.</a> Handbook of Clinical Neurology. 127, 115-128 (2015).</li>
<li>Albert-Weissenberger, C., Siren, A. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Experimental+traumatic+brain+injury%5BTitle%5D)+AND+%22Experimental+%26+Translational+Stroke+Medicine%22%5BJournal%5D)">Experimental traumatic brain injury.</a> Experimental & Translational Stroke Medicine. 2 (1), 16(2010).</li>
<li>Ma, X., Aravind, A., Pfister, B. J., Chandra, N., Haorah, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Animal+Models+of+Traumatic+Brain+Injury+and+Assessment+of+Injury+Severity%5BTitle%5D)+AND+%22Molecular+Neurobiology%22%5BJournal%5D)">Animal Models of Traumatic Brain Injury and Assessment of Injury Severity.</a> Molecular Neurobiology. 56 (8), 5332-5345 (2019).</li>
<li>Osier, N. D., Korpon, J. R., Dixon, C. E. Brain Neurotrauma: Molecular, Neuropsychological, and Rehabilitation Aspects. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aOsier%2C+ND+%22Frontiers+in+Neuroengineering%22">Frontiers in Neuroengineering</a>. Kobeissy, F. H. , (2015).</li>
<li>Osier, N. D., Dixon, C. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+Controlled+Cortical+Impact+Model%3A+Applications%2C+Considerations+for+Researchers%2C+and+Future+Directions%5BTitle%5D)+AND+%22Frontiers+in+Neurology%22%5BJournal%5D)">The Controlled Cortical Impact Model: Applications, Considerations for Researchers, and Future Directions.</a> Frontiers in Neurology. 7, 134(2016).</li>
<li>Kramer, S. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+Contribution+to+the+Theory+of+Cerebral+Concussion%5BTitle%5D)+AND+%22Annals+of+Surgery%22%5BJournal%5D)">A Contribution to the Theory of Cerebral Concussion.</a> Annals of Surgery. 23 (2), 163-173 (1896).</li>
<li>King, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Brain+temperature+profiles+during+epidural+cooling+with+the+ChillerPad+in+a+monkey+model+of+traumatic+brain+injury%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Neurotrauma%22%5BJournal%5D)">Brain temperature profiles during epidural cooling with the ChillerPad in a monkey model of traumatic brain injury.</a> Journal of Neurotrauma. 27 (10), 1895-1903 (2010).</li>
<li>Costine, B. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Neuron-specific+enolase%2C+but+not+S100B+or+myelin+basic+protein%2C+increases+in+peripheral+blood+corresponding+to+lesion+volume+after+cortical+impact+in+piglets%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Neurotrauma%22%5BJournal%5D)">Neuron-specific enolase, but not S100B or myelin basic protein, increases in peripheral blood corresponding to lesion volume after cortical impact in piglets.</a> Journal of Neurotrauma. 29 (17), 2689-2695 (2012).</li>
<li>Anderson, R. W., Brown, C. J., Blumbergs, P. C., McLean, A. J., Jones, N. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Impact+mechanics+and+axonal+injury+in+a+sheep+model%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Neurotrauma%22%5BJournal%5D)">Impact mechanics and axonal injury in a sheep model.</a> Journal of Neurotrauma. 20 (10), 961-974 (2003).</li>
<li>Chen, S., Pickard, J. D., Harris, N. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Time+course+of+cellular+pathology+after+controlled+cortical+impact+injury%5BTitle%5D)+AND+%22Experimental+Neurology%22%5BJournal%5D)">Time course of cellular pathology after controlled cortical impact injury.</a> Experimental Neurology. 182 (1), 87-102 (2003).</li>
<li>Lee, H. F., Lin, J. S., Chang, C. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Acute+Kahweol+Treatment+Attenuates+Traumatic+Brain+Injury+Neuroinflammation+and+Functional+Deficits%5BTitle%5D)+AND+%22Nutrients%22%5BJournal%5D)">Acute Kahweol Treatment Attenuates Traumatic Brain Injury Neuroinflammation and Functional Deficits.</a> Nutrients. 11 (10), 2301(2019).</li>
<li>Dixon, C. E., Clifton, G. L., Lighthall, J. W., Yaghmai, A. A., Hayes, R. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+controlled+cortical+impact+model+of+traumatic+brain+injury+in+the+rat%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Neuroscience+Methods%22%5BJournal%5D)">A controlled cortical impact model of traumatic brain injury in the rat.</a> Journal of Neuroscience Methods. 39 (3), 253-262 (1991).</li>
<li>Hung, T. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Deletion+or+inhibition+of+soluble+epoxide+hydrolase+protects+against+brain+damage+and+reduces+microglia-mediated+neuroinflammation+in+traumatic+brain+injury%5BTitle%5D)+AND+%22Oncotarget%22%5BJournal%5D)">Deletion or inhibition of soluble epoxide hydrolase protects against brain damage and reduces microglia-mediated neuroinflammation in traumatic brain injury.</a> Oncotarget. 8 (61), 103236-103260 (2017).</li>
<li>Wu, C. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Post-injury+treatment+with+7%2C8-dihydroxyflavone%2C+a+TrkB+receptor+agonist%2C+protects+against+experimental+traumatic+brain+injury+via+PI3K%2FAkt+signaling%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">Post-injury treatment with 7,8-dihydroxyflavone, a TrkB receptor agonist, protects against experimental traumatic brain injury via PI3K/Akt signaling.</a> PLoS One. 9 (11), 113397(2014).</li>
<li>Chen, S. F., Su, W. S., Wu, C. H., Lan, T. H., Yang, F. Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Transcranial+Ultrasound+Stimulation+Improves+Long-Term+Functional+Outcomes+and+Protects+Against+Brain+Damage+in+Traumatic+Brain+Injury%5BTitle%5D)+AND+%22Molecular+Neurobiology%22%5BJournal%5D)">Transcranial Ultrasound Stimulation Improves Long-Term Functional Outcomes and Protects Against Brain Damage in Traumatic Brain Injury.</a> Molecular Neurobiology. 55 (8), 7079-7089 (2018).</li>
<li>Su, W. S., Wu, C. H., Chen, S. F., Yang, F. Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Low-intensity+pulsed+ultrasound+improves+behavioral+and+histological+outcomes+after+experimental+traumatic+brain+injury%5BTitle%5D)+AND+%22Scientific+Reports%22%5BJournal%5D)">Low-intensity pulsed ultrasound improves behavioral and histological outcomes after experimental traumatic brain injury.</a> Scientific Reports. 7 (1), 15524(2017).</li>
<li>Chen, S. F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Salidroside+improves+behavioral+and+histological+outcomes+and+reduces+apoptosis+via+PI3K%2FAkt+signaling+after+experimental+traumatic+brain+injury%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">Salidroside improves behavioral and histological outcomes and reduces apoptosis via PI3K/Akt signaling after experimental traumatic brain injury.</a> PLoS One. 7 (9), 45763(2012).</li>
<li>Chen, C. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Berberine+protects+against+neuronal+damage+via+suppression+of+glia-mediated+inflammation+in+traumatic+brain+injury%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">Berberine protects against neuronal damage via suppression of glia-mediated inflammation in traumatic brain injury.</a> PLoS One. 9 (12), 115694(2014).</li>
<li>Furmanski, O., Nieves, M. D., Doughty, M. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Controlled+Cortical+Impact+Model+of+Mouse+Brain+Injury+with+Therapeutic+Transplantation+of+Human+Induced+Pluripotent+Stem+Cell-Derived+Neural+Cells%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Visualized+experiments%22%5BJournal%5D)">Controlled Cortical Impact Model of Mouse Brain Injury with Therapeutic Transplantation of Human Induced Pluripotent Stem Cell-Derived Neural Cells.</a> Journal of Visualized experiments. (149), e59561(2019).</li>
<li>Romine, J., Gao, X., Chen, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Controlled+cortical+impact+model+for+traumatic+brain+injury%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Visualized+experiments%22%5BJournal%5D)">Controlled cortical impact model for traumatic brain injury.</a> Journal of Visualized experiments. (90), e51781(2014).</li>
<li>Saatman, K. E., Feeko, K. J., Pape, R. L., Raghupathi, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Differential+behavioral+and+histopathological+responses+to+graded+cortical+impact+injury+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Neurotrauma%22%5BJournal%5D)">Differential behavioral and histopathological responses to graded cortical impact injury in mice.</a> Journal of Neurotrauma. 23 (8), 1241-1253 (2006).</li>
<li>Robertson, C. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cerebral+glucose+metabolism+in+an+immature+rat+model+of+pediatric+traumatic+brain+injury%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Neurotrauma%22%5BJournal%5D)">Cerebral glucose metabolism in an immature rat model of pediatric traumatic brain injury.</a> Journal of Neurotrauma. 30 (24), 2066-2072 (2013).</li>
<li>Adelson, P. D., Fellows-Mayle, W., Kochanek, P. M., Dixon, C. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Morris+water+maze+function+and+histologic+characterization+of+two+age-at-injury+experimental+models+of+controlled+cortical+impact+in+the+immature+rat%5BTitle%5D)+AND+%22Child%27s+Nervous+System%22%5BJournal%5D)">Morris water maze function and histologic characterization of two age-at-injury experimental models of controlled cortical impact in the immature rat.</a> Child's Nervous System. 29 (1), 43-53 (2013).</li>
</ol>

Autorzy nie mają nic do ujawnienia.

Protokół CCI powoduje wysoce powtarzalne mechaniczne uszkodzenia mózgu do badań nad stłuczeniami mózgu. Poniższe kroki mają kluczowe znaczenie dla generowania konsekwentnego uszkodzenia mózgu u zwierząt przy użyciu tego protokołu CCI.
Po pierwsze, głowica myszy powinna być stabilnie zamontowana na ramie stereotaktycznej, a anatomiczne punkty orientacyjne Bregma i Lambda zawsze w tej samej płaszczyźnie poziomej. Niestabilne lub nierówne ułożenie głowy często skutkuje różnym poziomem obrażeń u z...

Uraz mózgu to forma urazowego uszkodzenia mózgu, która plasuje się wysoko wśród najbardziej śmiertelnych problemów zdrowotnych we współczesnym społeczeństwie1. Jest to spowodowane przede wszystkim przypadkowymi zdarzeniami, takimi jak wypadek drogowy, w wyniku którego siły zewnętrzne wywierają energię mechaniczną na głowę. Urazowe uszkodzenie mózgu dotyka około 3,5 miliona ludzi i stanowi 30% wszystkich zgonów związanych z ostrymi urazami w USA każdego roku2. Pacjenci, którzy przeżyli stłuczenie mózgu, często cierpią z powodu długoterminowych konsekwencji, w tym ogniskowego osłabienia motorycznego, dysfunkcji sensorycznych i chorób psychicznych1.
Główny uraz stłuczenia mózgu jest wywoływany przez czynniki mechaniczne, w tym siły rozciągające i rozrywające, co prowadzi do natychmiastowej deformacji struktury miąższowej i ogniskowej śmierci komórki OUN3. Stłuczenie krwotoku to ogólny termin określający krwotoki do mózgu spowodowane pęknięciem naczyń krwionośnych w miejscu urazu głowy4. W szczególności krwotok śródmiąższowy występuje natychmiast po stłuczeniu mózgu, co prowadzi do opóźnionego tworzenia się krwiaka. W krwiaku hemoglobina i wolne żelazo uwalniane z lizowanych czerwonych krwinek mogą dodatkowo wywoływać toksyczność związaną z krwią5,6, które powodują przepuklinę, obrzęk mózgu i wzrost ciśnienia śródczaszkowego5,6. Funkcje współpracy neuronów (aksonów), gleju, naczyń krwionośnych i tkanek podporowych są również zaburzone przez efekt masy krwiaka7. Dodatkowo, uporczywe i rozlane zapalenie nerwów z postępującą neurodegeneracją trwa miesiącami i powoduje wtórne uszkodzenia mózgu8.
Aktywacja mikrogleju jest jedną z wielu ważnych patologicznych cech stłuczenia mózgu9,10. Po wykryciu wzorców molekularnych związanych z uszkodzeniem (DAMP) i wycieku krwi w uszkodzonej tkance, aktywowany mikroglej wywołuje zapalenie nerwów, które pogłębia wtórne uszkodzenie mózgu11. Ponadto chemoatraktant uwalniany z mikrogleju wspomaga infiltrację obwodowych komórek odpornościowych do terytorium urazowego, co skutkuje wytwarzaniem reaktywnych form tlenu i cytokin prozapalnych. W ten sposób powstaje samonapędzające się środowisko prozapalne, które wywołuje postępujące uszkodzenie mózgu9,12. Tymczasem mikroglej z alternatywnie aktywowanym fenotypem może przyczyniać się do odbudowy homeostazy tkanek i naprawy mózgu poprzez usuwanie zanieczyszczeń z uszkodzonej tkanki13. Wykazano, że zapobieganie wtórnemu zapaleniu nerwów poprzez zmniejszenie szkodliwych odpowiedzi immunologicznych mikrogleju jest szczególnie przydatne w promowaniu regeneracji mózgu po kontuzji mózgu3,9,10,12.
Opracowano kilka modeli przedklinicznych do badania urazowego uszkodzenia mózgu, w tym model spadku ciężaru, bocznego uszkodzenia płynu i model fali uderzeniowej14,15. Jednak każdy z tych modeli ma swoje słabości, w tym wysoką śmiertelność podczas zabiegu, niską odtwarzalność wyników histologicznych i dużą zmienność zadanych obrażeń między laboratoriami16,17. Dla porównania, model kontrolowanego wpływu korowego (CCI) jest bardziej odpowiedni do badania ogniskowych stłuczonych mięśni mózgowych ze względu na jego precyzyjną kontrolę i wysoką odtwarzalność14,15,18,19.
Ponadto, poprzez manipulowanie parametrami deformacji biomechanicznej, takimi jak prędkość i głębokość uderzenia, można kontrolować dotkliwość wywołanych uszkodzeń, aby wytworzyć szeroki zakres wielkości obrażeń, co pozwala badaczom naśladować różne poziomy upośledzenia często obserwowane u pacjentów17. Model przedkliniczny CCI został po raz pierwszy opracowany w 1896 roku20. Od tego czasu CCI jest najszerszym modelem mającym zastosowanie do modyfikacji do użytku u naczelnych21, swine22, sheep23, rats24 i mice25. Wszystkie te cechy sprawiają, że CCI jest jednym z najbardziej odpowiednich eksperymentalnych modeli kontuzji mózgu26.
Nasze laboratorium korzysta z dostępnego na rynku pneumatycznego systemu uderzeniowego CCI i przetestowanych parametrów deformacji biomechanicznej, aby wywołać umiarkowanie poważne ogniskowe stłuczenie mózgu, które terytorializuje główne obszary czuciowe i motoryczne kory mózgowej bez uszkadzania hipokampa27,28. My i inni wykazaliśmy, że ta procedura CCI może być wykorzystana do badania klinicznych cech stłuczenia mózgu u ludzi, w tym utraty tkanki mózgowej, uszkodzenia neuronów, krwotoku śródmiąższowego, zapalenia nerwów i niedoboru sensomotorycznego24,25,27,28,29,30. W tym miejscu szczegółowo opisujemy standardowy protokół wykonywania CCI u myszy, który pozwala zadawać pytania dotyczące utraty mieliny wywołanej przez CCI, odkładania się żelaza, zapalenia OUN, toksyczności krwotocznej i reakcji mikrogleju / makrofagów w następstwie ogniskowego stłuczenia mózgu.

<table><tbody><tr><td>Krótka wiertarka trepancyjna 4 mm</td><td>Salvin Dental Specialties, Inc.</td><td>TREPH-SHORT-4</td><td></td></tr><tr><td>przeciwciało anty-Iba1</td><td>Wako chemicals</td><td>#019-19741</td><td></td></tr><tr><td>przeciwciało anty-Ly76</td><td>abcam</td><td>ab91113</td><td></td></tr><tr><td>cement karboksylowy</td><td>3M</td><td>70201136010</td><td></td></tr><tr><td>impaktor kontuzji kory mózgowej</td><td>Niestandardowy projekt i Fabrykacja, Inc.</td><td>S / N 49-2004-C, eCCI Model 6.3</td><td>Urządzenie CCI (S / N 49-2004-C, eCCI Model 6.3)</td></tr> <tr><td>octan fioletu krezylowego</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>C5042</td><td></td></tr><tr><td>zestaw do barwienia DAB</td><td>Vector</td><td>SK-4105</td><td></td></tr><tr><td>kozie przeciwciało anty-królicze IgG, Alexa Fluor 488</td><td>Invitrogen</td><td>A11034</td><td></td></tr><tr><td>kozie przeciwciało anty-szczurze IgG, Alexa Fluor 594</td><td>Invitrogen</td><td>A11007</td><td></td></tr><tr><td>Pęseta Mayer's Hematoxylin</td><td>ScyTek</td><td>HMM500</td><td></td></tr><tr><td></td><td>narzędzia do nauki precyzyjnej</td><td>11252-20 NO. 5</td><td></td></tr><tr><td>izofluran</td><td>Panion & BF Biotech Inc.</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Bupiwakaina 0,25%</td> <td>Hospira</td><td></td><td></td></tr><tr><td>węglan litu</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>62470</td><td></td></tr><tr><td>steriotektyczne nożyczki</td><td>do strzyżenia</td><td></td><td></td>ramy</tr><tr><td></td><td>precyzyjne narzędzia naukowe</td><td>14068-12</td><td></td></tr><tr><td>rozpuszczalnik niebieski 38</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>S3382</td><td></td></tr></tbody></table>

przedkliniczny, kontrolowany model oddziaływania kory mózgowej w przypadku krwotoku pourazowego, stłuczenia i zapalenia nerwów

A Preclinical Controlled Cortical Impact Model for Traumatic Hemorrhage Contusion and Neuroinflammation

Uraz mózgu to poważny problem medyczny, który dotyka miliony ludzi na całym świecie każdego roku. Istnieje pilna potrzeba zrozumienia mechanizmu patofizjologicznego i opracowania skutecznej strategii terapeutycznej dla tego wyniszczającego zaburzenia neurologicznego. Krwotok śródmiąższowy i pourazowa reakcja zapalna wywołana początkowym uderzeniem fizycznym mogą nasilać aktywację mikrogleju/makrofagów i zapalenie nerwów, co w konsekwencji pogarsza patologię mózgu. Zapewniamy tutaj protokół kontrolowanego uderzenia korowego (CCI), który może odtworzyć eksperymentalne stłuczenie kory mózgowej u myszy za pomocą pneumatycznego systemu uderzeniowego do dostarczania siły mechanicznej o kontrolowanej wielkości i prędkości na powierzchnię opony twardej. Ten model przedkliniczny pozwala naukowcom na wywołanie umiarkowanie ciężkiego ogniskowego stłuczenia mózgu u myszy i zbadanie szerokiego zakresu pourazowych progresji patologicznych, w tym stłuczenia krwotoku, aktywacji mikrogleju/makrofagów, toksyczności żelaza, uszkodzenia aksonów, a także krótko- i długoterminowych deficytów neurobehawioralnych. Niniejszy protokół może być przydatny do badania długoterminowych skutków i potencjalnych interwencji w przypadku kontuzji mózgu.

Ilustracja procedury stereotaktycznego umieszczenia i kraniotomii.
Model CCI jest znany ze swojej stabilności i powtarzalności w wywoływaniu urazów o nasileniu od lekkiego do ciężkiego18. Prawidłowa technika stereotaktyczna oraz procedura kraniotomii są głównymi czynnikami determinującymi powstanie stabilnego i powtarzalnego urazu mózgu indukowanego metodą CCI (Rycina 1A,B). Idealna procedura kraniotomii po...

Krwotok śródmiąższowy i zapalenie nerwów, któremu towarzyszy stłuczenie mózgu, mogą spowodować poważne wtórne uszkodzenie mózgu. Protokół ten szczegółowo opisuje model kontrolowanego wpływu kory mózgowej (CCI) na myszy, umożliwiając naukowcom badanie kontuzji krwotoku i pourazowych odpowiedzi immunologicznych oraz badanie potencjalnych terapii.

Przedkliniczny, kontrolowany model oddziaływania kory mózgowej w przypadku krwotoku pourazowego, stłuczenia i zapalenia nerwów

Cerebral contusion is a severe medical problem affecting millions of people worldwide each year. There is an urgent need to understand the ...

Model ten można wykorzystać do badania patologii związanych ze stłuczeniem mózgu, w tym krwotoku śródczaszkowego, toksyczności żelaza, śmierci neuronów, uszkodzenia aksonów, deficytu neurologicznego i zapalenia neuronów. Główną zaletą tej techniki jest to, że stopień uszkodzenia mózgu można łatwo kontrolować, manipulując parametrami biochemicznymi, takimi jak prędkość i śmierć uderzenia w urządzenie CCI. Ogniskowe uszkodzenie kory mózgowej wywołane przez CCI jest wysoce powtarzalne.Właściwa technika stereotaktyczna i zabieg kraniotomii są głównymi czynnikami decydującymi o wytworzeniu stabilnego i powtarzalnego uszkodzenia mózgu wywołanego przez CCI. Ogólnie rzecz biorąc, badacz nowy w procedurze będzie miał trudności ze stabilizacją myszy na ramie sterioteksji i wykonaniem odpowiedniej kraniotomii. Procedurę zademonstruje pani Jhih Shuan Lin, technik laboratoryjny z mojego laboratorium.Zacznij od potwierdzenia braku odruchu szczypania palców u zwierzęcia, aby upewnić się, że jest ono odpowiednio znieczulone. Ogol głowę myszy za pomocą elektrycznych maszynek do strzyżenia w kierunku ogonowym do rostralnego. Ale nie przycinaj wąsów.Umieść mysz na ramie stereotaktycznej i ostrożnie włóż nauszniki do kanałów słuchowych, upewniając się, że główka myszy jest stabilizowana równomiernie przez oba paski douszne. Utrzymuj znieczulenie na poziomie od jednego do 2% izofluranu przez cały czas trwania zabiegu. Nałóż wazelinę na oba oczy, aby zapobiec wysuszeniu podczas zabiegu.Następnie za pomocą sterylnych wacików bawełnianych zdezynfekuj ogoloną głowę betadyną, a następnie 70% etanolem. Podawać 100 mikrolitrów 0,25% bupiwakainy podskórnie za pomocą igły insuliny o rozmiarze 31 i delikatnie masować miejsce wstrzyknięcia, aby uzyskać lepsze wchłanianie. Wykonaj podłużne nacięcie wzdłuż linii środkowej na skórze głowy za pomocą skalpela lub nożyczek.Następnie użyj hemostatu, aby ściągnąć skórę na prawą stronę. Pozostaw odsłoniętą czaszkę do wyschnięcia na jedną minutę. Następnie oczyść resztki krwi i tkanki na czaszce sterylnym wacikiem.Sprawdź, czy głowa zwierzęcia znajduje się poziomo w płaszczyźnie poziomej i zidentyfikuj anatomiczne punkty orientacyjne, Bregma i Lambda, zaznaczając oba miejsca ołówkiem. Upewnij się, że głowa zwierzęcia jest wypoziomowana w kierunku rostralno-ogonowym, mierząc współrzędne Z zarówno Bregma, jak i Lambda. Użyj tej samej procedury, aby ustawić głowę w poziomie.Użyj igły do insuliny o rozmiarze 31, aby zidentyfikować miejsce kraniektomii. Ustaw początek układu współrzędnych XY na Bregma i przesuń igłę w bok o trzy milimetry w prawo. Zaznacz to miejsce jako miejsce kraniektomii i narysuj ołówkiem okrąg o średnicy czterech milimetrów na czaszce.Wytnij wzdłuż okręgu obrysowanego ołówkiem za pomocą szybkoobrotowego mikrowiertła z trepanacją, aby utworzyć otwarty otwór o średnicy czterech milimetrów. Usuń płat kostny za pomocą pęsety i przechowuj go w lodowatym, normalnym roztworze soli fizjologicznej. Delikatnie przepłucz otwór solą fizjologiczną przed wywieraniem nacisku na powierzchnię mózgu, aby zatrzymać krwawienie.W urządzeniu CCI ustaw zaokrągloną końcówkę udaru o średnicy 2,5 milimetra pod kątem 22,5 stopnia. Wyzeruj końcówkę udarową do powierzchni opony twardej i ustaw parametry uderzenia na skrzynce sterowniczej na prędkość czterech metrów na sekundę i głębokość odkształcenia dwie milimetry. Cofnij metalową końcówkę.Wypuścić tłok, aby wytworzyć zakleszczenie w mózgu. Następnie umieść sterylny bawełniany wacik na zranionym obszarze, aby zatrzymać krwawienie. Wymień płat kostny i zabezpiecz go cementem dentystycznym.Zamknij skórę głowy klejem tkankowym. Umieść mysz pod lampą grzewczą w czystej klatce regeneracyjnej z pościelą do czasu pełnego wyzdrowienia. Właściwa technika stereotaktyczna i zabieg kraniektomii są głównymi czynnikami decydującymi o wytworzeniu stabilnego i powtarzalnego uszkodzenia mózgu wywołanego przez CCI.Idealny zabieg kraniektomii spowodowałby minimalne uszkodzenie histologiczne w pozorowanym operowanym mózgu. Zmiany w uszkodzeniu mózgu i utracie ciała modzelowatego obserwowano w dniach 1, 3, 7 i 28 po CCI. Ponadto jednostronny zanik mózgu po stronie stłuczenia zaobserwowano w 28 dniu po CCI.Zapalenie nerwów objawiło się przez aktywowany mikroglej i akumulację makrofagów Iba1-dodatnich wokół granicy obszaru stłuczenia. Krwotok śródmiąższowy był również wykrywalny przez barwienie Ly76-dodatnie od pierwszego do siódmego dnia po CCI. Mieszaninę czerwonych krwinek z pękniętą i nienaruszoną morfologią komórek zaobserwowano w siódmym dniu po CCI, co sugeruje, że erytrocyty były lizowane na tym etapie.Zjawisko to było zgodne z obserwacją, że osadzanie się żelaza było wykrywalne w obszarze stłuczenia od siódmego do 28 dnia po CCI. Aktywowany mikroglej i makrofagi obserwowano w prążkowiu daleko od miejsca stłuczenia od trzeciego do 28 dnia po CCI, co wskazuje na uszkodzenia ciała modzelowatego i prążkowia. Technika ta toruje badaczom drogę do dalszego badania interakcji neurozapalnej wywołanej krwotokiem do mózgu poprzez zrozumienie odpowiedzi komórek odpornościowych, takich jak mikroglej, po stłuczeniu krwotoku.

a-preclinical-controlled-cortical-impact-model-for-traumatic

Research

JoVE Journal

Medicine

Medycyna

Przedstawiono metodę bocznego uderzenia płynnego (LFP), uznany model urazowego uszkodzenia mózgu u myszy. LFP spełnia trzy główne kryteria dla modeli zwierzęcych: poprawność, niezawodność i istotność kliniczną. Opisano procedurę składającą się z chirurgicznej kraniotomii, zamocowania adaptera oraz następującego po nich wywołania urazu, co prowadzi do powstania uszkodzeń ogniskowych i rozlanych.

Boczna perkusja płynowa: model urazowego uszkodzenia mózgu u myszy

Urazowe uszkodzenia mózgu (TBI) pozostają poważnym problemem zdrowotnym. Wykorzystując model chirurgii kontrolowanego wpływu kory mózgowej, można przeprowadzić badania nad skutkami TBI i możliwymi metodami leczenia.

Kontrolowany model uderzenia kory mózgowej w przypadku urazowego uszkodzenia mózgu

Ten protokół demonstruje metodologie dla mysiego modelu urazowego mózgu z otwartą czaszką i przeszczepu hodowanych ludzkich pluripotencjalnych komórek macierzystych do miejsca urazu. W skrócie opisano również testy behawioralne i histologiczne wyników tych procedur.

Kontrolowany model wpływu kory mózgowej uszkodzenia mózgu myszy z terapeutycznym przeszczepem ludzkich pluripotencjalnych komórek nerwowych pochodzących z komórek macierzystych

Zmiana neuroprzekaźnika to mechanizm dysfunkcji neuronalnej, który występuje po wstrząśnieniu mózgu i przyczynia się do czasami katastrofalnych długoterminowych konsekwencji. Ten model szczurzy łączy w sobie mikrodializę, umożliwiającą kwantyfikację neuroprzekaźników in vivo, z techniką spadku masy ciała, wywierającą gwałtowne przyspieszanie i zwalnianie głowy i tułowia, co jest ważnym czynnikiem urazów czaszkowo-mózgowych u ludzi.

Nowatorski i translacyjny szczurzy model wstrząsu mózgu łączący siłę i rotację z mikrodializą mózgową in vivo

Tutaj opisujemy protokół indukcji mysiego urazowego uszkodzenia mózgu poprzez kontrolowane uderzenie w korę mózgową z otwartą głową.

Mysi model kontrolowanego wpływu na korę mózgową w celu indukcji urazowego uszkodzenia mózgu

Ten protokół przedstawia metody charakteryzowania neurozapalnej i hemodynamicznej odpowiedzi na łagodne urazowe uszkodzenie mózgu oraz integracji tych danych jako części wielowymiarowej analizy systemów przy użyciu częściowej regresji metodą najmniejszych kwadratów.

Analiza systemowa odpowiedzi neurozapalnej i hemodynamicznej na urazowe uszkodzenie mózgu

Protokół opisuje łagodne urazowe uszkodzenie mózgu w modelu mysim. W szczególności w pełni wyjaśniony jest protokół krok po kroku mający na celu wywołanie łagodnego urazu głowy w linii środkowej oraz charakterystyka modelu zwierzęcego.

Elektromagnetycznie sterowany model zamkniętej głowy łagodnego urazowego uszkodzenia mózgu u myszy

Tutaj pokazano, jak model urazu głowy w stanie czuwania może być wykorzystany do zbadania wpływu powtarzających się łagodnych urazów mózgu (r-mTBI) na plastyczność synaptyczną w hipokampie. Model replikuje ważne cechy r-mTBI u pacjentów i jest stosowany w połączeniu z elektrofizjologią in vitro.

Ocena zmian plastyczności synaptycznej przy użyciu modelu łagodnego urazowego uszkodzenia mózgu w stanie czuwania

Ten protokół przedstawia zmodyfikowany mysi model powtarzalnego łagodnego urazowego uszkodzenia mózgu (rmTBI) wywołanego metodą zamkniętego urazu głowy (CHI). Podejście to obejmuje cieńsze okienko czaszki i płynną stymulację w celu zmniejszenia stanu zapalnego często spowodowanego ekspozycją opon mózgowych, a także lepszą odtwarzalność i dokładność w modelowaniu rmTBI u gryzoni.

Zmodyfikowany mysi model powtarzającego się łagodnego urazowego uszkodzenia mózgu z przerzedzonym okienkiem czaszki i płynną stymulacją

Uproszczone modele urazowego uszkodzenia mózgu (TBI) ułatwiły rozwój podejść terapeutycznych. Protokół ten nakreśla tworzenie kory myszy z raną kłutą za pomocą igieł, umożliwiając analizę krwotoku i stanu zapalnego. Model myszy TBI z raną kłutą ma tę zaletę, że można go wykonać bez konieczności stosowania specjalistycznego sprzętu.

Mysi model rany kłutej do badania krwotoku i stanu zapalnego w urazowym uszkodzeniu mózgu

Poznaj model kontrolowanego urazu kory mózgowej u myszy do badania krwotoku pourazowego i neurozapalenia. Ta metoda pozwala kontrolować nasilenie uszkodzenia mózgu poprzez manipulację parametrami uderzenia.

Przedkliniczny, kontrolowany model oddziaływania kory mózgowej w przypadku krwotoku pourazowego, stłuczenia i zapalenia nerwów

Przeglądaj więcej filmów