Drosophila-larven hebben speciale sensorische neuronen – nociceptoren – waarvan de reactie op potentieel schadelijke thermische stimuli aversief – of zogenaamd “nocifensief” – gedrag bij het dier veroorzaakt. Deze video beschrijft een methode om thermische nociceptie te beoordelen door larvaal gedrag op te nemen als reactie op lokale toepassing van een warmtesonde op de cuticula. Deze methode wordt daarom de lokale hittesondetest genoemd.
Protocol
Dit protocol is een uittreksel uit Chattopadhyay et al., Local and Global Methods of Assessing Thermal Nociception in Drosophila Larvae, J. Vis. Exp. (2012). 1. Lokale hittesondetest We leveren een schadelijke thermische stimulus aan een individueel larvaal lichaamssegment met behulp van een op maat gemaakte thermische sonde vervaardigd door Pro-Dev Engineering (zie tabel met materialen). Hoewel deze sonde optimale ontwerpkenmerken heeft (e…
Representative Results
Figuur 1: Experimentele opstelling voor lokale warmtesondetest. De warmtesonde wordt aangestuurd door een thermische regeleenheid die wordt gebruikt om de temperatuur van de sonde in te stellen en te handhaven. De sonde wordt loodrecht op de anteroposterior-as gehouden en gebruikt om de larve onder een hoek van 45° ten opzichte van het horizontale vlak te stimuleren. Sondecontact wordt specifiek gemaakt bij abdominale se…
Materials
Thermal Probe
Pro-Dev Engineering
Custom-built on demand
Contact information can be provided on request
Leica DFC290 12v/400mA Color camera
Leica Microsystems
12730080
Any equivalent camera will do.
Leica MZ6 microscope
Leica Microsystems
Part number for MZ6 zoom body (optics carrier) is 10445614
Schott Ace Modulamp Unit
Schott AG
A20500
Schott Dual Gooseneck 23 inch Fiber Optic Light Guide
Local Heat Probe Assay: A Method to Assess Nociception of High Temperatures in Drosophila Larvae. J. Vis. Exp. (Pending Publication), e20146, doi: (2023).