Name: Criação de abdominais aderências em Ratos (Vídeo) | JoVE Journal
Uploaded: 2016-08-27T15:00:00.000+00:00
Duration: 6 min 44 s
Description: Aprenda a criar aderências abdominais em camundongos usando lixa e amido para estudar mecanismos celulares e vias de sinalização. Este método reprodutível permite investigar a formação de aderências com baixa mortalidade.

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MDL foi apoiada pela American College of Surgeons (ACS) Scholarship Residente Research. MSH foi apoiado pelo Instituto da Califórnia de Medicina Regenerativa (CIRM) bolsa de formação Fellow Clínica TG2-01159. MSH, HPL, e MTL foram apoiadas pela Sociedade Americana de Cirurgiões Maxilo (ASMS) / Maxilo Cirurgiões Foundation (MSF) Research Award Grant. HPL foi apoiado pelo NIH conceder R01 GM087609 e um presente de Ingrid Lai e Bill Shu em honra de Anthony Shu. HPL e MTL foram apoiadas pelo Laboratório Hagey for Pediatric Regenerative Medicine e da Fundação Oak. MTL foi apoiado pelo Fundo / Olivier Gunn.

O protocolo a seguir foi aprovado pelo Comitê Animal Care Institucional e Use da Universidade de Stanford (IACUC) e está em conformidade com todas as normas éticas institucionais sobre o uso de animais de pesquisa. 1. Criação de abdominais aderências <ol><li> Inicie o rato na dieta de ração de antibiótico, uma semana antes do procedimento. </li><li> Autoclave os instrumentos cirúrgicos e pré-aquecer a solução de irrigação salina. </li><li> Anestesiar o mouse usando 2% de isoflurano inalado. </li><li> Usando uma máquina de cortar cabelo, seguido por uma aplicação rápida (5-10 segundos) de agente depilatório, remover o cabelo de a maioria da superfície do abdómen. Cuidadosamente remover o agente depilatório esfregando suavemente com uma gaze molhada e, opcionalmente, por molhando cuidadosamente a metade inferior do rato em água quente. Seque bem a animal. </li><li> Coloque o focinho do animal para o cone do nariz anestésico. Durante toda a cirurgia, acompanhar atentamente a rtaxa espiratory do animal e titula-se a taxa de fluxo do anestésico, conforme necessário. </li><li> Usar um dispositivo de aquecimento, tal como uma almofada de aquecimento ou uma lâmpada de aquecimento, para evitar a hipotermia. </li><li> Antes de preparar o abdómen, garantir o mouse com tiras de fita colocadas acima e abaixo do abdômen para impedir o mouse de deslocamento durante a cirurgia. Desinfectar o abdômen com betadine, então siga com etanol 70%. Incluem a maior área possível na preparação, incluindo o cabelo nas bordas da área rapada. Coloque uma cortina estéril sobre o mouse. (Figura 1) </li><li> Injectar por via subcutânea 0,1 mg / kg de buprenorfina, ou 3 ug para um ratinho de 30 g. </li><li> Fazer a incisão na pele. <ol><li> Começando na linha média abdominal inferior, segure a pele com uma pinça e fazer um corte vertical rasa na pele usando uma tesoura afiada. </li><li> Realizar o corte superiormente ao xifóide com a tesoura. Tome cuidado para entrar apenas a pele. </li></ol></li><li> À medida que a musculatura abdominal é now visível cobrindo as vísceras, segure a linha média da musculatura com uma pinça e cuidadosamente fazer um pequeno corte nele usando uma tesoura afiada. Certifique-se de não cortar acidentalmente em um órgão abdominal. </li><li> Depois de entrar no espaço peritoneal com um pequeno corte e vendo a camada muscular afastar os órgãos abdominais, estender o corte superior e inferiormente, inserindo a tesoura na abertura e cuidadosamente corte em ambas as direções. Estender a incisão do xifóide superiormente acima da bexiga inferiormente. (Figura 2) </li><li> Agora que os intestinos são expostos, localizar o ceco e suavemente exteriorização. Evitar agarrar o ceco com pinças dentadas ou afiadas. Em vez disso use uma pinça atraumática, como um Adson forceps serrilhadas. </li><li> Raspe o ceco com uma lixa. <ol><li> Suavemente raspe toda a superfície de ambos os lados do ceco com lixa de grão 100 para 30 - 60 segundos até que a superfície torna-se brilhante e appea menos petéquiasR na superfície. Se o cirurgião é destro, que ajuda a orientar o ceco com a ponta virada para a direita e armar o ceco sobre o dedo indicador esquerdo do cirurgião. (Figura 3) </li><li> Realizar a lixar suavemente, uma vez que é fácil de fazer com que acidentalmente uma perfuração da parede cecal fina. Uma pequena quantidade de arenosidade deve ser sentida como a lixa é movido ao longo da superfície do ceco. Se a lixa é sentida repetidamente travamento no ceco, isso irá provavelmente provocar um rasgo na parede cecal. Observe com cuidado para garantir que as partículas de lixa não desalojar e permanecer no abdómen, pois isso pode causar reação de corpo estranho excessiva. </li><li> Se um rasgo na parede cecal ocorre, encerrar o procedimento e eutanásia do animal. </li><li> Se um vaso sanguíneo cecal é cortado pela lixa e causa sangramento, mantenha a pressão por até dois minutos com gaze. No entanto, se o sangramento persistir após esse tempo, coloque uma figura de oito 7-0 monofilamento de sutura em torno doponto de sangramento. Isto irá parar o sangramento de forma fiável em quase todos os casos. Tome cuidado para não incorporar uma grande quantidade de parede cecal para a sutura, já que esta corre o risco de provocar necrose da parte envolvida da parede. </li></ol></li><li> Ferir a parede lateral abdominal direita. <ol><li> Use uma tira de lixa para lixar a superfície peritoneal do músculo da parede lateral abdominal direita. Seja mais agressivo com o lixamento aqui do que no ceco e continuar até que toda a superfície da parede lateral abdominal direita parece agredido. Evitar lixar tão difícil que a pele é visível através de aberturas na camada muscular. (Figura 4) </li><li> Usando um motorista de agulha Castro-Viejo, coloque entre dois e quatro figura de oito 4-0 pontos de seda para a camada muscular da parede lateral abdominal direita. Deixar as caudas de cerca de 5 mm de comprimento. Tome cuidado para não pegar acidentalmente parede do intestino para a sutura. (Figura 5) </li></ol></li><li> Usando uma seringa de 10 ml cheia wom aquecido salina, irrigar o intestino várias vezes. Dirigir a corrente de soro fisiológico na cavidade abdominal para irrigar o interior bem. Se a superfície inferior do mouse torna-se encharcado, mova o mouse sobre ou substituir a superfície, a fim de evitar a hipotermia. </li><li> Use uma gaze estéril colocado sobre a incisão para absorver o excesso de irrigação. </li><li> Aqui uma pitada de amido e aspergi-lo sobre a superfície da parede lateral abdominal direita e para ambos os lados do ceco. (Figura 6) </li><li> Certifique-se de que não há sangramento ativo. Se não é, utilizar uma esponja de gaze para aplicar pressão directamente sobre o ponto de sangramento até parar. Se o sangramento não parar imediatamente, coloque uma sutura hemostática como descrito acima. </li><li> Usando a extremidade cega da pinça e um dedo, suavemente empurrar o intestino de volta para a cavidade abdominal. Posicionar o ceco ao lado das suturas na parede lateral abdominal direita, a fim de maximizar a formação de aderências. </li><li> Cperder a incisão abdominal. <ol><li> Usando 6-0 sutura entrelaçada absorvível, colocar um ponto corrido para a camada muscular na parte superior da incisão. </li><li> Executar a sutura para baixo em direcção ao fundo da incisão, reunindo a camada muscular. Viajar de cerca de 3 mm e tomar picadas de 3 mm a cada novo ponto. Tome cuidado para não tomar acidentalmente um pedaço de intestino ao colocar suturas. </li><li> Na parte inferior da incisão, deixou um laço de sutura a partir da mordida anterior e utilizar este instrumento para atar o fio de sutura. Corte a sutura deixando 5 mm caudas. </li><li> Repita os três passos anteriores com 6-0 nylon monofilamento de sutura para fechar a pele. </li></ol></li><li> Administrar um 20 ml / kg de solução salina de bolus subcutâneo (cerca de 0,5 ml para um rato de 30 g). </li><li> Usando uma gaze seca, secar completamente todo o animal, como a pele dorsal tende a ficar molhada durante a irrigação. </li><li> Vagamente embrulhar um adesivo curativo em torno do abdômen para cobrir a incisão. Tome cuidado para não restringir a umAs pernas de nimal ou mecânica de respiração com o curativo. </li><li> acompanhar atentamente o animal como ele se recupera da anestesia. Administrar buprenorfina cada 12 horas durante 2-3 dias após o procedimento para controle da dor. </li></ol> 2. A colheita adesão tecidual <ol><li> Espere um mínimo de sete dias após a cirurgia inicial. Mais uma vez, autoclave instrumentos cirúrgicos e anestesiar o rato com isoflurano. </li><li> Esterilizar o abdômen com betadine seguido por 70% de etanol. Raspar e depilar cabelo adicional a partir do lado direito do abdómen de modo a que a amostra de adesão contendo pele não irá ser coberto no cabelo, o que torna mais difícil a histologia. </li><li> Use uma incisão paramediana esquerda, desde intestino é muitas vezes preso à incisão inicial. Começando na extremidade inferior do abdómen, cerca de 5 mm para a esquerda do fundo da incisão original, compreender a pele com pinças dentadas pequenas e corte na pele, com uma tesoura afiada. Estender este corte superior,ly à caixa torácica. (Figura 7) </li><li> Com uma tesoura, para cortar a camada muscular e depois de entrar na cavidade peritoneal, alargar o corte no topo e no fundo da incisão. Haverá tecido adesivo causando o ceco e no intestino delgado para aderir à parede lateral direita do abdómen e, eventualmente, também para a incisão inicial. (Figura 8) </li><li> Usando as tesouras e a partir da borda da incisão, acima do nível do ceco, iniciar o corte na parede abdominal em círculo em torno da área onde o intestino é aderente. </li><li> Alternando acima e abaixo do nível do ceco, reduzir gradualmente a toda a volta a adesão e completar o círculo, dando origem a uma &quot;ilha&quot; da pele e aderente parede abdominal para o intestino. (Figura 9) </li><li> Novamente usando a tesoura, cortado no intestino e separar a parte aderente a partir do restante do intestino, obtendo-se uma sanduíche de tecido que consiste em pele e parede abdominalde um lado, do intestino, do outro lado, e o tecido adesivo que liga os dois no meio. (Figura 10) </li><li> Opcionalmente, utilizar tesouras de pontas para separar nitidamente da pele a partir do músculo da parede abdominal. Para a histologia considerar deixar a pele em anexo, mas para a digestão e isolamento de células a pele pode ser removido. Se o tecido vai ser utilizado para a histologia, certifique-se para remover o material de sutura, tanto quanto possível, sem perturbar excessivamente a interface adesiva. Para a digestão e o isolamento de células é aceitável para deixar as suturas no lugar, desde que o tecido digerido é filtrado. </li><li> Após excisão de tecido de adesão, eutanásia do mouse usando um método humano aprovado pelo seu comitê de uso de animais institucional. </li></ol>

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<li>Whang, S. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((In+search+of+the+best+peritoneal+adhesion+model%3A+comparison+of+different+techniques+in+a+rat+model%5BTitle%5D)+AND+%22J+Surg+Res%22%5BJournal%5D)">In search of the best peritoneal adhesion model: comparison of different techniques in a rat model.</a> J Surg Res. 167 (2), 245-250 (2011).</li>
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<li>Rajab, T. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((An+improved+model+for+the+induction+of+experimental+adhesions%5BTitle%5D)+AND+%22J+Invest+Surg%22%5BJournal%5D)">An improved model for the induction of experimental adhesions.</a> J Invest Surg. 23 (1), 35-39 (2010).</li>
</ol>

Os autores declaram que não têm interesses financeiros concorrentes.

Os passos críticos neste processo são: abrasão completamente o ceco sem causar perfuração, colocando-se suturas na parede lateral abdominal, e aplicar a quantidade certa de amido. Apenas se aplicam lixa ao ceco, ou a uma pequena porção específica do intestino. Amplo uso de lixa em grandes quantidades de intestino delgado tende a causar íleo significativa. Tome cuidado para raspar o ceco com força suficiente para que a superfície torna-se áspera, mas não tanto que as lágrimas de parede. Encontrar esse equilíbrio pode lev...

adesões abdominais são uma forma de tecido cicatricial que se formam no abdómen em resposta à inflamação, tipicamente, após a cirurgia ou a infecção intra-abdominal. As aderências são uma das principais causas de dor abdominal crônica e infertilidade, e são a causa mais comum de obstrução do intestino delgado 1. A presença de aderências torna a executar uma segunda operação abdominal mais difícil e aumenta a probabilidade de complicações 2. Apesar de anos de investigação, os mecanismos subjacentes à formação de aderências permanecem pouco compreendidos. Sabe-se que uma lesão inicial à superfície peritoneal provoca uma exsudação de fluido rica em fibrina, o qual forma um coágulo que se liga as superfícies do intestino e a parede abdominal juntamente 3. Mais tarde, os fibroblastos e outras células migram para o espaço adesiva e secretar tecido conjuntivo 4. Ao longo de meses ou anos a adesão amadurece através do desenvolvimento de vasos sanguíneos e nervos <sup&gt; 5. Vários produtos comerciais existentes que foram concebidos para reduzir a formação de adesões após cirurgia abdominal (por exemplo, Seprafilm). Todos estes produtos actuam como barreiras mecânicas e parar a formação de aderência, impedindo o contacto físico entre alças intestinais e a parede abdominal 6,7. Apesar das evidências de um estudo controlado que uma barreira de adesão cirúrgica reduz a formação de aderências 8, muitos cirurgiões anecdotally foram decepcionado com a eficácia dos produtos barreira mecânica. Actualmente não há terapias anti-adesão à base de drogas, o qual reflecte o facto de que os processos precisos envolvidos na formação de aderências são mal compreendidos. O desenvolvimento de uma terapia que visa especificamente agentes celulares e moleculares envolvidas na formação de aderências exigirá uma melhor compreensão dos eventos que estão envolvidas na formação da adesão. vários gruposs identificaram vias moleculares que podem ser importantes para a formação de aderências 9-11. Os modelos animais proporcionam um meio ambiente excelente para o estudo da formação de aderências. Muitos estudos foram publicados descrevendo a criação cirúrgica de adesão em vários animais, em particular o rato e ratinho 6,12-14. Dada a nossa experiência com o estudo fibrose no mouse e a ampla disponibilidade de ratinhos transgénicos e anticorpos baseado no mouse, escolhemos o rato como modelo para o estudo de aderências. Relata-se a técnica que desenvolvemos para criar reprodutível e confiável aderências abdominais no rato.

<table><tbody><tr><td>Absorventes Fisherbrand, 20" x 24"</td><td>Fisher Scientific</td><td>14-206-62</td><td></td></tr><tr><td>Poliforrado Estéril Campo, 18" x 24"</td><td>Busse Hospital Descartáveis</td><td>696</td><td>Corte um buraco retangular do tamanho apropriado</td></tr><tr><td>Isothesia isoflurane</td><td>Henry Schein&nbsp;</td><td></td><td></td>050033</tr><tr><td>Fisherbrand Almofada de gaze de algodão estéril, 4 "x 4"</td> <td>Fisher Scientific</td><td>22-415-469</td><td></td></tr><tr><td>Pomada oftálmica Puralube petrolato, tubo de 1/8 onças</td><td>Dechra Veterinary Products</td><td>NDC 17033-211-38</td><td></td></tr><tr><td>Creme depilatório Nair</td><td>Church & Fornecedor:Dwight Co.</td><td>22339-05</td><td></td></tr><tr><td>Buprenex buprenorfina&nbsp; 0,3 mg/ml</td><td>Reckitt Benckiser Pharmaceuticals Inc.</td><td>NDC 12496-0757-5</td><td></td></tr><tr><td>Seringa de insulina de 1 cc, 27&nbsp; G</td><td>Becton Dickinson</td><td>329412</td><td></td></tr><tr><td>Solução de Preparação de Iodopovidona</td><td>Medline</td><td>MDS093944H</td><td></td></tr><tr><td>Webcol cotonetes de preparação de álcool</td><td>Covidien</td><td>6818</td><td></td></tr><tr><td>Fita de rotulagem Labarotory de uso geral</td><td>VWR</td><td>89097-912</td><td></td></tr><tr><td>Luvas cirúrgicas BioGel PI</td><td>M&ouml; lnlycke Health Care</td><td>ALA42675Z</td><td></td></tr><tr><td>Micro Fórceps com dentes</td><td>Roboz</td><td>RS-5150</td><td></td></tr><tr><td>Tesouras finas- afiadas</td><td>Ferramentas de Belas Ciências</td><td>14060-09</td><td></td></tr><tr><td>Pinças serrilhadas retas</td><td>Ferramentas de Belas Ciências</td><td>11050-10</td><td></td></tr><tr><td>Chave de agulha Castro-Viejo</td><td>Ferramentas de Belas Ciências</td><td>12565-14</td><td></td></tr><tr><td>Lixa de 1/4 folha de grão 100</td><td>ACE Hardware</td><td>1010446</td><td>Corte em tiras</td></tr><tr><td>4-0 sutura de seda, 30", agulha SH</td><td>Sutura</td> monofilamento absorvível Ethicon <td>K831</td><td></td></tr><tr><td>7-0 PDS II, agulha 30", BV-1</td><td>Ethicon</td><td>Z135</td><td>Geralmente vem com braço duplo. Corte a sutura no meio do caminho para gerar duas suturas utilizáveis.</td></tr><tr><td>Amido</td><td>de arroz MP Biomedicals</td><td>102955</td><td></td></tr><tr><td>0,9% Cloreto de sódio Irrigação</td><td>Baxter</td><td>BHL2F7121</td><td>Quente para 37 > C antes de usar</td></tr><tr><td>seringa de 10 ml</td><td>Becton Dickinson</td><td>309604</td><td></td></tr><tr><td>6-0 Vicryl sutura trançada absorvível, agulha cônica RB-1 de 18",</td><td>Ethicon</td><td>J212H</td><td></td></tr><tr><td>6-0 Monofilamento de nylon de etileno, sutura de 18", agulha P-3,&nbsp;</td><td>Ethicon</td><td>1698G</td><td></td></tr><tr><td>Tegaderm Filme Transparente Estilo de Moldura de Curativo, 6 cm x 7 cm</td><td>3M</td><td>1624W</td><td>Corte ao meio no sentido do comprimento</td></tr></tbody></table>

criação de abdominais aderências em ratos

Creation of Abdominal Adhesions in Mice

As aderências abdominais consistem em tecido fibrótico que se forma no espaço peritoneal em resposta a um insulto inflamatório, geralmente cirurgia ou infecção intra-abdominal. Os mecanismos precisos subjacentes à formação de aderências são pouco compreendidos. Muitos compostos e barreiras físicas foram testados quanto à sua capacidade de prevenir aderências após a cirurgia com níveis variados de sucesso. O camundongo e o rato são modelos importantes para o estudo das aderências abdominais. Várias técnicas diferentes para a criação de aderências em camundongos e ratos existem na literatura. Descrevemos aqui um protocolo utilizando abrasão do ceco com lixa e suturas colocadas na parede lateral abdominal direita. O camundongo é anestesiado e o abdômen é preparado. Uma laparotomia da linha média é criada e o ceco é identificado. A lixa é usada para lixar suavemente a superfície do ceco. Em seguida, várias suturas em forma de oito são colocadas no peritônio da parede lateral abdominal direita. A cavidade abdominal é irrigada, uma pequena quantidade de amido é aplicada e a incisão é fechada. Descobrimos que essa técnica produz as aderências mais consistentes com a menor taxa de mortalidade.

<html> Aos sete dias após a cirurgia, o ceco e, possivelmente, cólon ascendente, fígado e alças de intestino delgado deve ser aderente à parede abdominal do lado direito. (Figura 8) tecido excisado pode ser embebida e seccionada e irá produzir excelentes preparações histológicas. (Figura 11, 12) Quando o processo é realizado adequadamente, 100% dos murganhos deveria ter aderências substanciais ...

As aderências abdominais que se formam após a cirurgia são uma das principais causas de dor, infertilidade e hospitalização e reoperação por obstrução do intestino delgado. Nosso procedimento cirúrgico para criar aderências abdominais em camundongos é uma ferramenta confiável para estudar os mecanismos subjacentes à formação de aderências.

Criação de abdominais aderências em Ratos

Abdominal adhesions consist of fibrotic tissue that forms in the peritoneal space in response to an inflammatory insult, typically surgery or ...

O objetivo geral deste procedimento é produzir de forma consistente aderências abdominais no camundongo, minimizando ao mesmo tempo a mortalidade. Este método pode ajudar a responder perguntas fundamentais no campo das aderências abdominais, como quais células, macromoléculas, vias de sinalização e citocinas estão envolvidas na formação de aderências. As principais vantagens desta técnica são que os camundongos desenvolvem aderências 100% das vezes e a taxa de mortalidade é muito baixa quando o procedimento é realizado corretamente.Em geral, indivíduos novos neste procedimento terão dificuldade em aplicar a quantidade apropriada de força ao usar o papel de lixa, bem como ao aplicar a quantidade correta de amido. A demonstração visual dessa técnica é fundamental, pois força excessiva perfurará o ceco, enquanto força insuficiente pode não resultar na formação de aderências. No dia da cirurgia, use tesouras elétricas para aparar os pelos abdominais do animal anestesiado.Em seguida, transfira o animal para um dispositivo de aquecimento e fixe as patas com fita adesiva. A seguir, desinfete o abdômen com betadine, seguido por etanol 70%, tomando cuidado para incluir os pelos nas bordas da área depilada. Coloque um campo estéril sobre o camundongo.Em seguida, segure a pele do abdômen inferior com uma pinça e faça um corte vertical superficial. Continue a incisão até o processo xifoide. Em seguida, segure a musculatura abdominal na linha média e use uma tesoura afiada para fazer cuidadosamente uma pequena incisão, tomando cuidado para evitar os órgãos internos.Quando os órgãos abdominais estiverem visíveis, insira a tesoura na incisão e corte cuidadosamente em ambas as direções para estender o corte desde o processo xifoide até acima da bexiga. Uma vez expostos os intestinos, localize o ceco e use uma pinça não traumática para exteriorizar suavemente o tecido. Oriente o ceco com a ponta voltada para a mão dominante e posicione o ceco sobre o dedo indicador da mão não dominante.Usando lixa de grão 100, abrase suavemente toda a superfície de ambos os lados do intestino exposto por 30 a 60 segundos. Uma pequena sensação de aspereza deve ser sentida ao mover a lixa sobre a superfície cecal. Se um vaso sanguíneo cecal for rompido durante a abrasão, pressione suavemente uma gaze sobre o local do sangramento por até dois minutos.Se o sangramento continuar após dois minutos, coloque um ponto em oito de sutura monofilamentar 870 ao redor do vaso. Quando a superfície cecal tornar-se menos brilhante e surgirem petéquias, use uma tira nova de lixa para abrasar a superfície peritoneal do músculo da parede lateral direita do abdômen até que toda a superfície da parede lateral pareça áspera. Em seguida, use um porta-agulha Castroviejo para colocar de dois a quatro pontos em oito de seda 840 na camada muscular da parede lateral direita do abdômen, deixando extremidades finas com cerca de um milímetro de comprimento.Use uma seringa de 10 mililitros de soro fisiológico aquecido para irrigar os intestinos e a cavidade abdominal várias vezes. Se a área sob o camundongo ficar encharcada, mova o animal para uma superfície seca para evitar hipotermia. Quando os intestinos estiverem bem irrigados, coloque uma gaze estéril sobre a incisão para absorver o excesso de soro fisiológico.Em seguida, posicione o ceco ao lado dos pontos de sutura na parede lateral direita do abdômen. Use uma gaze para aplicar pressão sobre quaisquer pontos com sangramento ativo. Em seguida, polvilhe uma pitada de amido de arroz sobre a superfície da parede lateral direita do abdômen e sobre o ceco.Para fechar o abdômen, utilize um fio absorvível trançado 60 para fazer um ponto contínuo na camada muscular no topo da incisão. Passe o fio em direção ao fundo da incisão, aproximando seções de três por três milímetros da musculatura com cada novo ponto. No fundo da incisão, deixe uma alça do fio do ponto anterior para fazer um nó instrumental, corte o fio, deixando pontas de cinco milímetros.Use uma sutura de monofilamento de náilon 60 para fechar a pele da mesma maneira. Em seguida, administre um bolo de salina subcutânea de 20 mililitros por quilograma e seque completamente todo o animal com gaze limpa. Por fim, enrole levemente um curativo adesivo ao redor da incisão, tomando cuidado para não restringir as pernas do animal nem a mecânica respiratória, e monitore o camundongo até que esteja totalmente recuperado.Sete dias após a cirurgia, o ceco e possivelmente o cólon ascendente, fígado e alças do intestino delgado devem estar aderidos à parede abdominal do lado direito. O inclusão e o corte histológico do tecido abdominal ressecado produzem lâminas excelentes para análises histológicas e imunohistoquímicas. Uma vez dominado este procedimento, ele pode ser realizado em menos de 30 minutos.Após este procedimento, outros métodos, como PCR quantitativa e cultivo em fibra de vidro, podem ser utilizados para responder perguntas sobre a expressão gênica no tecido de adesão.

Research

JoVE Journal

Medicine

Medicina

Este vídeo mostra como induzir aneurismas da aorta abdominal (AAA) em camundongos através de infusão intraluminal transitória da elastase pancreática suína no segmento de infra-renal da aorta abdominal. O modelo tem a capacidade de adicionar uma visão ampla para o pathobiology da AAA, devido ao surgimento de inúmeros transgênicos e camundongos knockout do gene.

Criação de Murina Experimental aneurismas de aorta abdominal com Elastase

A interrupção do fluxo biliar resulta em lesão hepática colestática inflamatória grave com uma sequência característica de alterações morfológicas dependentes do tempo. Aqui apresentamos um protocolo para a ligadura cirúrgica do ducto colédoco em camundongos que permite induzir uma forte resposta fibrótica após 21 a 28 dias.

Ligadura do ducto biliar em ratos: Indução de Inflammatory Lesão hepática e fibrose por colestase obstrutiva

Aqui, apresentamos a ligadura parcial biliar como modelo cirúrgico de lesão hepática e regeneração em roedores.

Ligadura do colédoco parcial no Mouse: um modelo controlado da colestase obstrutiva localizada

Fuga anastomótica ou avaria após a cirurgia é das principais causas de mortalidade e morbidade pós-operatória. A cirurgia para a criação de uma anastomose colônica é um método confiável e reprodutível para estudar os mecanismos de cicatrização de anastomoses.

Criação de uma anastomose colônica em ratos

Descrevemos um modelo murino de íleo paralítico pós-operatório gerado por manipulação intestinal. A função do trânsito gastrointestinal, as alterações patológicas e a ativação das células imunes foram avaliadas 24 h após a cirurgia.

Modelo Murino de Íleo Pós-Operatório

Este manuscrito apresenta um protocolo para estabelecer um modelo de aneurisma de aorta abdominal de camundongo usando cloreto de cálcio e elastase, combinando as vantagens dos métodos de modelagem anteriores. Este modelo pode ser utilizado para investigar os mecanismos fisiopatológicos subjacentes aos aneurismas da aorta abdominal.

Um modelo de aneurisma de aorta abdominal de camundongo por infiltração periadventícia de cloreto de cálcio e elastase

Este protocolo descreve uma abordagem cirúrgica metódica para modelar aneurismas avançados da aorta abdominal em camundongos por uma combinação de aplicação direta de elastase na aorta infrarrenal e administração de ß-aminopropionitrila através da água potável.

Modelagem Avançada de Aneurisma da Aorta Abdominal em Camundongos por Combinação de Elastase Tópica e ß-aminopropionitrila Oral

As aderências intrauterinas (AIUs), a consequência patológica mais comum da lesão endometrial, prejudicam gravemente a função reprodutiva. Trauma e infecção são amplamente reconhecidos como fatores de risco importantes para o desenvolvimento de AIU. Estabelecemos com sucesso um modelo de rato reprodutível de AIUs, combinando dois métodos de lesão crítica: curetagem mecânica e indução infecciosa com lipopolissacarídeo.

Estabelecimento de um Modelo de Rato para Aderências Intrauterinas via Lesão Dupla: Curetagem e Infecção

Este estudo apresenta um dispositivo de massagem abdominal para camundongos que replica a massagem manual, minimizando o estresse e os danos aos tecidos. O dispositivo reduz significativamente os níveis de glicose no sangue, melhora o metabolismo lipídico e aumenta a sensibilidade à insulina em camundongos com diabetes tipo 2, oferecendo uma abordagem terapêutica promissora e não invasiva com potencial clínico.

Fixação e Método Operacional para Massagem Abdominal em Camundongos DM2

Este protocolo descreve um modelo suíno de formação de aderências intraabdominais pós-operatórias usando mini suínos de Yucatán submetidos a cirurgia abdominal aberta com resseção intestinal. A abordagem induz aderências intra-abdominais de forma confiável e oferece uma plataforma para avaliar o desenvolvimento das aderências e testar estratégias antiaderência.

Um modelo cirúrgico translacional suíno para formação de aderências intraabdominais pós-operatórias

Esse protocolo oferece um método repetível e confiável para induzir aneurismas da aorta abdominal (AAA) em camundongos C57BL/6, utilizando sensibilização com elastina e aplicação de elastase perivascular, como um modelo AAA que incorpora um componente de sensibilização imunológica.

Criação confiável de um modelo de aneurisma aórtico abdominal murino usando sensibilização com elastina e elastase perivascular

Aprenda a criar aderências abdominais em camundongos usando lixa e amido para estudar mecanismos celulares e vias de sinalização. Este método reprodutível permite investigar a formação de aderências com baixa mortalidade.

Criação de abdominais aderências em Ratos

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