Name: Um rato do modelo de fadiga Central usando um modificado método de plataforma múltipla (Vídeo) | JoVE Journal
Uploaded: 2018-08-14T13:30:00.000+00:00
Duration: 5 min 13 s
Description: Aprenda a construir um modelo de fadiga central em ratos usando o método de plataforma múltipla modificado. Esta técnica não invasiva combina fatores físicos e psicológicos para estudar mecanismos neurais e alterações comportamentais.

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Este trabalho foi financiado pela Fundação de ciência Natural de Beijing (No.7162124) e Xin-ao Fundação para a Universidade de Beijing de medicina chinesa.

Todos os animais foram mantidos em conformidade com as diretrizes da legislação chinesa sobre o uso ético e cuidar de animais de laboratório.
1. pré-modelagem preparação
<ol><li>
Preparação do laboratório
	<ol>
<li>Execute a lâmpada de UV durante pelo menos 30 min antes do experimento.</li>
		<li>Controle a temperatura do laboratório a 25 ± 3 ° C e umidade relativa em torno de 30%.</li>
		<li>Ligue o laboratório luz às 06:00 e desligar às 18:00 para estabelecer um ciclo claro/escuro de 12 h/12 h.</li>
	</ol>
</li>
	<li>
Construção de caixa de plataforma múltipla
	<ol>
<li>Construa um depósito de plástico opaco sem uma cobertura de 110 × 60 × 40 cm3.</li>
		<li>Corrigir a quinze plataformas circulares (h = 8 cm, d = 6,5 cm) na parte inferior do tanque, o enfermeiro que distribuir em três linhas e cinco colunas. Deixe espaço suficiente entre cada plataforma, mais ou menos 10 cm entre colunas e entre linhas de 13 centímetros.</li>
		<li>Definir uma saída de água no lado lateral do tanque e instalar uma torneira.</li>
		<li>Fazer uma cobertura de rede de fio de ferro para o tanque com uma caixa de comida pendurado nela.</li>
	</ol>
</li>
	<li>
Agrupamento e ratos de habitação Nota: Ratos machos Wistar de 8 semanas de idade, pesando aproximadamente 200-210 g, são utilizados no experimento. Os ratos vivem em grupos durante o processo de modelagem.<ol>
<li>Número de raízes de cauda dos ratos com uma caneta.</li>
		<li>Pesar os ratos, excluir o extremamente leve ou mais pesada e dividir o resto aleatoriamente em grupos de controle e modelo.</li>
		<li>Delicadamente colocou os ratos as gaiolas limpas e permitir-lhes para se aclimatar ao laboratório pelo menos 3 dias. Fornece água suficiente e fornecimento de alimentos.</li>
	</ol>
</li>
</ol>2. modelagem com MMPM
Nota: O processo começa às 18:00 e termina às 08:00 no dia seguinte, para um total de 14 h por dia, durante 21 dias. Para evitar fatores de interferência, a mesma pessoa é necessária para conduzir todo o experimento, enquanto usava o mesmo casaco de laboratório. 10 ratos Wistar são usados no experimento.
<ol><li>Coloque o reservatório sobre uma superfície plana, por exemplo, no chão. Em seguida, encha o reservatório com aproximadamente 7 cm de água morna (25 ± 3 ° C), cerca de 1 cm abaixo da plataforma plana.</li>
	<li>Prepare comida e bebida suficiente para todos os ratos no tanque para 1 dia. Forragem e água colocaram na caixa de comida e pendurá-lo na capa. Nota: Alguns ratos inteligentes aprendem a descansar na caixa de comida. Em caso afirmativo, conduzi-los a volta para o tanque.</li>
	<li>Levar os ratos do grupo de modelo fora da gaiola, agarrá-los pelo rabo e colocá-los suavemente para o tanque. Lançar todos os ratos na água em vez das plataformas para motivar o seu medo de água. Certifique-se de que todos os ratos Obtém uma plataforma para se sustentar, enquanto ratos do grupo controle permanecer em suas gaiolas originais com comida e água suficientes.</li>
	<li>Tampa do tanque. Monitore os ratos para evitar ferimento acidental. Se um rato permanece na água por mais de 1h sem subir na plataforma, buscá-lo fora do tanque e removê-lo do teste.</li>
	<li>Após 14 h, tirar os ratos do modelo do tanque e seque os cabelos com um secador. Re-marca as caudas dos ratos se desvanece-se. Retornar os ratos para suas gaiolas originais e fornecer-lhes comida e água suficientes.</li>
	<li>Limpe todos os cantos do aquário. Elevar um lado do tanque e abra a torneira para a água de esgoto de saída.</li>
	<li>Esterilizar o tanque com um spray de etanol 75% e expô-lo à luz UV.</li>
</ol>3. modelo de avaliação: Teste comportamental
Nota: Todos os testes são realizados no laboratório comportamental. Ruído e luz extra não são permitidas durante o teste para evitar a perturbação. Se possível, use o mesmo pessoa (s) para realizar cada teste. Um casaco escuro e luvas são necessárias para o reconhecimento de escala de cinza no processamento de imagem. Executar o OFT primeiro como tem o menor efeito sobre o comportamento do rato.
<ol><li>
OFT
	<ol>
<li>Verifique se o gravador sobre a caixa de campo aberto para se certificar que está ligado à estação de trabalho e cobre cada canto da caixa. Ajuste a iluminação para eliminar sombras na caixa.</li>
		<li>Mova os ratos em laboratório comportamental em suas gaiolas originais. Permita-lhes para se aclimatar pelo menos 1 h antes do teste.</li>
		<li>Limpar e desinfetar a caixa com 75% de etanol para garantir que não há nenhum excremento ou cheiro do experimento anterior.</li>
		<li>Remover um rato da gaiola por suas costas e colocá-lo suavemente na área central da caixa. Rapidamente os braços retiro da caixa para não bloquear o tiro.</li>
		<li>Entrada de número de ratos e iniciar a gravação. Contagem e registro da frequência de atividades verticais, como o rato, incluindo a criação e a escalada.</li>
		<li>Depois de 5 min, parar a gravação, tira da caixa com o rato e devolvê-lo para a gaiola.</li>
		<li>Repita as etapas 3.1.3 - 3.1.6 até que todos os ratos terminaram o teste.</li>
	</ol>
</li>
	<li>
EPM
	<ol>
<li>Execute as etapas de pré-seleção e aclimatação quanto o OFT (etapas 3.1.1 - 3.1.2).</li>
		<li>Remover um rato da gaiola por suas costas e colocá-lo suavemente sobre a parte de junção dos dois braços. Aterrar o rato para o braço esquerdo aberto e sair rapidamente para não bloquear o tiro.</li>
		<li>Entrada de número de ratos e iniciar a gravação. Contagem e registo a frequência de entradas diferentes de braço. Se o rato cai fora do labirinto no teste, buscá-lo e enviá-lo para o labirinto. Gravar informações detalhadas para análise de dados.</li>
		<li>Depois de 5 min, parar a gravação, pegue o rato fora e devolvê-lo para a gaiola.</li>
		<li>Remover o excremento e limpe o labirinto com 75% de etanol para eliminar cheiro do antigo rato.</li>
		<li>Repita as etapas 3.2.2 - 3.2.5 até que todos os ratos terminaram o teste.</li>
	</ol>
</li>
	<li>
Teste de ES
	<ol>
<li>Encha o tanque de natação (70 × 30 × 110 cm3) com 80 cm de água morna (25 ± 3 ° C). Nota: Se houver um termostato no tanque, temperatura da água deve ser definida em 37 ° C, que é semelhante à temperatura do corpo do rato. Caso contrário, defina-o como a temperatura para mantê-la constante.</li>
		<li>Faça uma carga para cada rato com pino cachos e amarrá-lo suavemente na sua raiz da cauda. A carga pesa 10% do peso do rato.</li>
		<li>Pegar um rato pela cauda e jogá-lo no tanque de natação. Se os ratos huddle ou agarrar-se à parede, os distinguem e conduzi-los de volta na água.</li>
		<li>Iniciar a cronometragem no momento em que o rato é colocado em água e parar o tempo quando ele está esgotado, que é demonstrada como a incapacidade de lutar fora da água com a boca e o nariz por baixo da água por mais de 10 s. Nota: Às vezes, exaustão e afogamento ocorrem de repente. Certifique-se de ter bastante experimentadores para gravar e salvar o animal ao mesmo tempo.</li>
		<li>Remova os ratos exaustos fora da água sem interromper os outros. Seque os cabelos, re-marcar seus números e enviá-los de volta para a gaiola.</li>
		<li>Mude a água no tanque após conclusão de um grupo. Depois de fazem todos os ratos, esvaziar o tanque de natação e limpar e esterilizá-lo com etanol e luz UV.</li>
	</ol>
</li>
</ol>4. modelo de avaliação: Deteção de neurotransmissor Central
<ol><li>Anestesia o rato com injeção intra-peritoneal de hidrato de cloral 10% (3ml/kg) até que esteja inconsciente.</li>
	<li>Decapitar o rato.</li>
	<li>Faça uma incisão longitudinal ao longo da linha pós-medial, abrir o crânio para ambos os lados e expor o cérebro. Vire o crânio, remover o cérebro e colocar o cérebro em um saco de gelo.</li>
	<li>Separar e remover o hipotálamo, que é a área em forma de diamante na parte central da base do cérebro que tem uma fronteira clara com tecidos circundantes. Coloque-o em um tubo estéril e congelá-lo com nitrogênio líquido. Armazene todas as amostras em um frigorífico de-80 ° C.</li>
	<li>Detecta o conteúdo da DA e 5-HT no hipotálamo usando cromatografia líquida de alto desempenho (HPLC)8.</li>
</ol>

<ol><li>Ishii, A., Tanaka, M., Yamano, E., Watanabe, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+neural+substrates+of+physical+fatigue+sensation+to+evaluate+ourselves%3A+a+magnetoencephalography+study%5BTitle%5D)+AND+%22Neuroscience%22%5BJournal%5D)">The neural substrates of physical fatigue sensation to evaluate ourselves: a magnetoencephalography study.</a> Neuroscience. 261, 60-67 (2014).</li>
<li>Dalsgaard, M. K., Secher, N. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+Brain+at+Work%3A+A+Cerebral+Metabolic+Manifestation+of+Central+Fatigue%3F%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Neuroscience+Research%22%5BJournal%5D)">The Brain at Work: A Cerebral Metabolic Manifestation of Central Fatigue?</a> Journal of Neuroscience Research. 85 (15), 3334-3339 (2007).</li>
<li>Chaudhuri, A., Behan, P. O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Fatigue+in+neurological+disorders%5BTitle%5D)+AND+%22The+Lancet%22%5BJournal%5D)">Fatigue in neurological disorders.</a> The Lancet. 363, 978-988 (2004).</li>
<li>Baston, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Exercise-induced+central+fatigue%3A+a+review+of+the+literature+with+implications+for+dance+science+research%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Dance+Medicine+%26+Science%22%5BJournal%5D)">Exercise-induced central fatigue: a review of the literature with implications for dance science research.</a> Journal of Dance Medicine & Science. 17 (2), 53-62 (2013).</li>
<li>Yamashita, M., Yamamoto, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Tryptophan+and+Kynurenic+Acid+May+Produce+an+Amplified+Effect+in+Central+Fatigue+Induced+by+Chronic+Sleep+Disorder%5BTitle%5D)+AND+%22International+Journal+of+Tryptophan+Research%22%5BJournal%5D)">Tryptophan and Kynurenic Acid May Produce an Amplified Effect in Central Fatigue Induced by Chronic Sleep Disorder.</a> International Journal of Tryptophan Research. 7, 9-14 (2014).</li>
<li>Lee, S. W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+impact+of+duration+of+one+bout+treadmill+exercise+on+cell+proliferation+and+central+fatigue+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Exercise+Rehabilitation%22%5BJournal%5D)">The impact of duration of one bout treadmill exercise on cell proliferation and central fatigue in rats.</a> Journal of Exercise Rehabilitation. 9 (5), 463-469 (2013).</li>
<li>Su, kY., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Rutin%2C+a+flavonoid+and+principal+component+of+saussurea+involucrata%2C+attenuates+physical+fatigue+in+a+forced+swimming+mouse+model%5BTitle%5D)+AND+%22International+Journal+of+Medical+Sciences%22%5BJournal%5D)">Rutin, a flavonoid and principal component of saussurea involucrata, attenuates physical fatigue in a forced swimming mouse model.</a> International Journal of Medical Sciences. 11 (5), 528-537 (2014).</li>
<li>Hashemi, F., Laufer, R., Szegi, P., Csomor, V., Kal ász, H., Tekes, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((HPLC+determination+of+brain+biogenic+amines+following+treatment+with+bispyridinium+aldoxime+K203%5BTitle%5D)+AND+%22Acta+Physiologica+Hungarica%22%5BJournal%5D)">HPLC determination of brain biogenic amines following treatment with bispyridinium aldoxime K203.</a> Acta Physiologica Hungarica. 101 (1), 40-46 (2014).</li>
<li>Machado, R. B., Hipo'lide, D. C., Benedito-Silva, A. A., Tufik, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Sleep+deprivation+induced+by+the+modified+multiple+platform+technique%3A+quantification+of+sleep+loss+and+recovery%5BTitle%5D)+AND+%22Brain+Research%22%5BJournal%5D)">Sleep deprivation induced by the modified multiple platform technique: quantification of sleep loss and recovery.</a> Brain Research. 1004 (1-2), 45-51 (2004).</li>
<li>Alzoubi, K. H., Khabour, O. F., Tashtoush, N. H., AI-Azzam, S. I., Mhaidat, N. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Evaluation+of+the+Effect+of+Pentoxifylline+on+Sleep-Deprivation+Induced+Memory+Impairment%5BTitle%5D)+AND+%22Hippocampus%22%5BJournal%5D)">Evaluation of the Effect of Pentoxifylline on Sleep-Deprivation Induced Memory Impairment.</a> Hippocampus. 23 (9), 812-819 (2013).</li>
<li>Pires, G. N., Tufik, S., Andersen, M. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Grooming+analysis+algorithm%3A+Use+in+the+relationship+between+sleep+deprivation+and+anxiety-like+behavior%5BTitle%5D)+AND+%22Progress+in+Neuro-Psychopharmacology+and+Biological+Psychiatry%22%5BJournal%5D)">Grooming analysis algorithm: Use in the relationship between sleep deprivation and anxiety-like behavior.</a> Progress in Neuro-Psychopharmacology and Biological Psychiatry. 41, 6-10 (2013).</li>
<li>Yamashita, M., Yamamoto, T. <a target="_blank" href="https://www.jstage.jst.go.jp/article/ninchishinkeikagaku/15/1/15_67/_article">Establishment of a rat model of central fatigue induced by chronic sleep disorder and excessive brain tryptophan.</a> Japanese Journal of Cognitive Neuroscience. 15, 67-74 (2013).</li>
<li>Arai, M., Yamazaki, M., Inoue, K., Fushiki, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+of+intracranial+injection+of+transforming+growth+factor-beta+relevant+to+central+fatigue+on+the+waking+electroencephalogram+of+rats+Comparison+with+effects+of+exercise%5BTitle%5D)+AND+%22Progress+in+Neuro-Psychopharmacology+and+Biological+Psychiatry%22%5BJournal%5D)">Effects of intracranial injection of transforming growth factor-beta relevant to central fatigue on the waking electroencephalogram of rats Comparison with effects of exercise.</a> Progress in Neuro-Psychopharmacology and Biological Psychiatry. 26 (2), 307-312 (2002).</li>
<li>Han, C. X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Distinct+behavioral+and+brain+changes+after+different+durations+of+the+modified+multiple+platform+method+on+rats%3A+An+animal+model+of+central+fatigue%5BTitle%5D)+AND+%22PloS+One%22%5BJournal%5D)">Distinct behavioral and brain changes after different durations of the modified multiple platform method on rats: An animal model of central fatigue.</a> PloS One. 12 (5), e0176850(2017).</li>
<li>Tang, X., Yang, L., Sanford, L. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Individual+variation+in+sleep+and+motor+activity+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Behavioural+Brain+Research%22%5BJournal%5D)">Individual variation in sleep and motor activity in rats.</a> Behavioural Brain Research. 180 (1), 62-68 (2007).</li>
<li>Stanford, S. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+Open+Field+Test%3A+reinventing+the+wheel%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Psychopharmacology%22%5BJournal%5D)">The Open Field Test: reinventing the wheel.</a> Journal of Psychopharmacology. 21 (2), 134-135 (2007).</li>
<li>Ahn, S. H., et al. <a target="_blank" href="https://www.tandfonline.com/doi/abs/10.1080/19768354.2013.790840">Basal anxiety during an open field test is correlated with individual differences in contextually conditioned fear in mice.</a> Animal Cells and Systems. 17 (3), 154(2013).</li>
<li>Costa, A. A., Morato, S., Roque, A. C., Tin ós, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+computational+model+for+exploratory+activity+of+rats+with+different+anxiety+levels+in+elevated+plus-maze%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Neuroscience+Methods%22%5BJournal%5D)">A computational model for exploratory activity of rats with different anxiety levels in elevated plus-maze.</a> Journal of Neuroscience Methods. 236, 44-50 (2014).</li>
<li>Liu, Z., Wu, Y., Liu, T., Li, R., Xie, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Serotonin+regulation+in+a+rat+model+of+exercise-induced+chronic+fatigue%5BTitle%5D)+AND+%22Neuroscience%22%5BJournal%5D)">Serotonin regulation in a rat model of exercise-induced chronic fatigue.</a> Neuroscience. 349, 27-34 (2017).</li>
<li>Foley, T. E., Fleshner, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Neuroplasticity+of+dopamine+circuits+after+exercise%3A+implications+for+central+fatigue%5BTitle%5D)+AND+%22NeuroMolecular+Medicine%22%5BJournal%5D)">Neuroplasticity of dopamine circuits after exercise: implications for central fatigue.</a> NeuroMolecular Medicine. 10 (2), 67-80 (2008).</li>
<li>Leite, L. H., Rodrigues, A. G., Soares, D. D., Marubayashi, U., Coimbra, C. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Central+fatigue+induced+by+losartan+involves+brain+serotonin+and+dopamine+content%5BTitle%5D)+AND+%22Medicine+%26+Science+in+Sports+%26+Exercise%22%5BJournal%5D)">Central fatigue induced by losartan involves brain serotonin and dopamine content.</a> Medicine & Science in Sports & Exercise. 42 (8), 1469-1476 (2010).</li>
</ol>

Os autores não têm nada para divulgar.

O MMPM é projetado originalmente por privação de sono9. Ratos são lançados em um tanque de água com plataformas fixadas na parte inferior. Impulsionado pelo medo instintivo de água, ratos permanecem em pé nas plataformas e ocorre sem dormir. O estudo mostra que diferentes horas de privação de sono levam a várias alterações no comportamento do rato e humor, incluindo reconhecimento de imparidade10en11e fadiga central. Alguns pesquisadores provam que p...

A fadiga é um dos principais fatores que ameaçam a saúde humana1. Nas últimas décadas, várias pesquisas provaram que fadiga é acionada por perifericamente mas centralmente orientada e sempre acompanhado com distúrbios emocionais e cognitivos. Fisiologista italiano Mosso r. proposto pela primeira vez a palavra fadiga Central2. Geralmente é definida como a actividade voluntária limitada e comprometimento da cognição devido à disfunção da transmissão do impulso no sistema nervoso central (SNC)3. Comparado com fadiga muscular periférica, fadiga central enfatiza alterações no SNC, bem como as consequentes perturbações emocionais/comportamentais, incluindo depressão, ansiedade, deficiência de cognição e perda de memória. Um estudo mostra que muitos fatores podem induzir a fadiga central, entre os quais excessiva atividade física e estresse mental, são imprescindíveis4. Quanto a patogênese, teorias como o triptofano-Quinurenina via hipótese5 explicar alterações em determinadas vias; no entanto, estudos mais aprofundados ainda são necessários para revelar as correlações central-periférico da fadiga central.
Como o mecanismo subjacente de fadiga central ainda não está claro, um modelo animal eficaz é muito importante para futuras pesquisas. Os modelos existentes de fadiga são principalmente induzidos por exercício excessivo, como escadas rolantes6 e natação peso carregado7, com pouca preocupação sobre fatores mentais. Para melhor simular o desenvolvimento da fadiga central, nosso grupo desenvolveu um modelo do rato com o MMPM. Durante o processo de modelagem, ratos permanecem em pé nas plataformas estreitas na caixa múltipla plataforma por longas horas, incluindo a parte do tempo de sono. Diferente dos modelos de exercício excessivo, o modelo MMPM usa a privação do sono parcial como um fator mental tendo em consideração a complexa patogênese da fadiga central.
Para avaliação do modelo, usamos os OFT e EPM testes para determinar o clima de ansiedade e voluntariado. O teste de ES é realizado para medir o desempenho muscular periférica. Além disso, tomamos o cérebro do rato e detectar a dopamina (DA) / conteúdo de serotonina (5-HT) em ambos os hypothalamuses para observar as diferenças de neurotransmissor central.
O protocolo apresentado abaixo destina-se à fadiga central de modelo induzida pela atividade física repetida e falta de sono, imitando uma condição comum na vida humana. No entanto, ao ajustar a duração do modelo, pode ser usada em muitos outros campos, como em estudos de observação e estresse do sono. No futuro, pesquisa, esperamos que este modelo vai ajudar a descobrir mais mudanças do CNS e sua conexão com o sistema periférico, para revelar o mecanismo de patogênese da fadiga central.

<table><tbody><tr><td>Personalização do tanque de água de privação de sono de plataforma múltipla</td><td>, é fornecida pelo laboratório neuroimunológico da Universidade de Medicina Chinesa de Pequim</td><td></td><td>110cm x 60cm x 40cm. Existem 15 pequenas plataformas de plástico na parte inferior. A pequena plataforma tem 6,5cm de diâmetro e 8cm de altura</td></tr><tr><td>Ratos Wistar</td><td>Beijing Weitong Lihua Experimental Animal Technology Company</td><td>número de licença SYXK (Pequim) 2016-0011</td><td>Use 32 ratos Wistar machos saudáveis, 8 semanas de idade (200-210 g)</td></tr><tr><td>Cromatógrafo líquido de alto desempenho Agilent 1100LC&nbsp;</td><td>A Agilent</td><td>&nbsp; G1379A, G1311A, G1313A, G1316A&nbsp;</td><td>&nbsp; G1379A, bomba cromatográfica tipo G1311A, amostrador automático G1313A, caixa de temperatura de coluna G1316A</td></tr><tr><td>Detector eletroquímico DECADE II SDC eletrodo</td> de carbono vítreo <td>da empresa holandesa ANTEC</td><td>, eletrodo de referência Ag/AgCl, estações de trabalho (Clarity CHS)</td>Centrífuga de refrigeração de alta velocidade Biofuge Stratos Instrumento de fraturamento ultrassônico HERAEUS VCX130 SONICS <td></td></tr><tr><td></td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td></td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Balança eletrônica ACS-ZEAS</td><td>Desenvolvimento de tecnologia Phos, Pequim.</td><td></td><td>O peso dos ratos de pesagem pode ser preciso para 0,1g.</td></tr><tr>Personalização da <td>caixa de campo aberto</td><td>, é fornecida pelo laboratório neuroimunológico da Universidade de Medicina Chinesa</td><td></td> de Pequim <td>caixa de madeira de campo aberto&nbsp; 100 cm por 100 cm x 40 cm, parede interna e fundo como cinza. A parte inferior é dividida em 25 quadrados de área igual, cada um com 20 cm x 20 cm, e as 16 grades ao longo da parede externa são as externas e as outras 9 grades são centrais. A câmera é montada acima do canteiro central.</td></tr><tr><td>Elevado Plus-maze</td><td>Beijing zhongshi dechuang technology development co. LTD.</td><td></td><td>Os braços abertos e fechados da cruz são compostos por 30cm x 5cm x 15cm, e a área central é de 5cm x 5cm, com uma câmera montada acima do centro e 45cm de altura.</td></tr><tr><td>balde de natação de ratos.</td><td>Equipamento de instrumento biológico Zhenhua co., LTD. Anhui, China.</td><td></td><td>O volume do tambor de plástico é de 70 cm x 30 cm x 110 cm, que é usado para nadar em ratos.</td></tr><tr><td>Termômetro</td><td>Shiya instrument co., LTD., changzhou, China.</td><td></td><td>Controle a temperatura da água</td></tr><tr><td>Bomba de água pequena</td><td>Xincheng technology co., LTD., chengdu, China.</td><td></td><td>Usado para tanque de água e comportamento de natação.</td></tr><tr><td>Software comportamental Ethovition3.0.</td><td>Nuldus, Holanda</td><td></td><td>Análise de medição de vídeos de comportamento de ratos.</td></tr></tbody></table>

um rato do modelo de fadiga central usando um modificado método de plataforma múltipla

A Rat Model of Central Fatigue Using a Modified Multiple Platform Method

Neste artigo, apresentamos um modelo do rato de fadiga central usando o modificado método de plataforma múltipla (MMPM). A caixa de plataforma múltipla foi concebida como um tanque de água com plataformas estreitas na parte inferior. Os ratos do modelo foram colocados no tanque e ficou nas plataformas para 14 h (18:00-08:00) por dia por 21 dias consecutivos, com um grupo de controle em branco para contraste. No final da modelagem, ratos no grupo modelo mostraram uma aparência cansada óbvia. Para avaliar o modelo, realizamos vários testes comportamentais, incluindo o campo aberto (OFT), teste da elevada além de labirinto (EPM) e o teste de natação exaustiva (ES). Os resultados mostraram que essa ansiedade, comprometimento da cognição espacial, desempenho pobre do músculo e recusada atividade voluntária apresentado em ratos modelo confirmam o diagnóstico da fadiga central. Alterações de neurotransmissores a central também verificado o resultado. Em conclusão, o modelo simulado com êxito a fadiga central, e estudos futuros com o modelo podem ajudar a revelar o mecanismo patológico da doença.

Descrevemos um modelo do rato de fadiga central usando MMPM. 24 ratos Wistar são aleatoriamente divididos em grupo controle e o grupo modelo, com 12 ratos em cada grupo. O aparelho modelo é projetado como um tanque de água com plataformas estreitas na parte inferior (Figura 1). Ratos do modelo fique nas plataformas para 14 h por dia, incluindo o tempo de sono parcial, durante 21 dias (Figura 2).
<p class="jove_content" fo:kee...

Aqui, apresentamos um protocolo para apresentar um modelo do rato de fadiga central usando o modificado método de plataforma múltipla (MMPM).

Um rato do modelo de fadiga Central usando um modificado método de plataforma múltipla

In this article, we introduced a rat model of central fatigue using the modified multiple platform method (MMPM). The Multiple Platform box was designed ...

Este método pode ajudar a responder a questões-chave na construção do modelo de fadiga central. Por exemplo, como produzir fadiga tanto do ponto de vista físico quanto psicológico e como avaliá-la. A principal vantagem dessa técnica é combinar fatores mentais com o método de múltiplas plataformas modificado para simular melhor o início da fadiga central.Tivemos a ideia pela primeira vez quando notamos a estreita associação entre privação intermitente de sono e fadiga central. Tentamos diferentes horas e dias de privação para induzir a fadiga central e, finalmente, descobrimos que 14 horas em 21 dias era o padrão correto. O modelo mostra boa validade na fadiga central e pode ser usado em estudos futuros para ajudar a revisar o mecanismo subjacente da doença.Comece construindo um tanque de plástico opaco sem tampa. Fixe 15 plataformas circulares no fundo do tanque, que se distribuem ordenadamente em três fileiras e cinco colunas. Deixe espaço suficiente entre cada plataforma, cerca de 13 centímetros entre as linhas e 10 centímetros entre as colunas.Instale uma torneira na saída de água na lateral do tanque. Por fim, faça uma cobertura de rede de arame de ferro para o tanque, com uma caixa de comida pendurada nela. Comece numerando as raízes da cauda dos ratos com um marcador.Pese os ratos, excluindo os extremamente leves ou pesados, e divida o restante aleatoriamente nos grupos modelo e controle. Coloque os ratos suavemente nas gaiolas limpas e deixe-os se aclimatar ao laboratório por pelo menos três dias. Forneça água e comida suficientes.Comece colocando o tanque em um serviço plano e, em seguida, encha com sete centímetros de água morna, aproximadamente um centímetro abaixo da plataforma. Em seguida, coloque forragem e água para um dia na caixa de comida e pendure-a na tampa. Em seguida, retire o grupo modelo de ratos da gaiola pela cauda e coloque-os suavemente no tanque.Lance todos os ratos na água em vez das plataformas para motivar seu medo da água. Certifique-se de que cada rato tenha uma plataforma para se apoiar, enquanto os ratos do grupo de controle permanecem em suas gaiolas originais com comida e água suficientes. Em seguida, cubra o tanque e monitore os ratos.Após 14 horas, retire os ratos modelo do tanque e seque o cabelo com um secador. Observe as caudas dos ratos se ela desaparecer. Em seguida, retorne o rato à gaiola original com comida e água.Por fim, lave o tanque e abra a torneira para escoar o esgoto. Em seguida, esterilize o tanque com um spray de etanol a 75%. Os resultados dos testes de campo aberto indicam que, em comparação com o grupo controle, há uma diminuição significativa no movimento de criação e na velocidade média da atividade voluntária em ratos modelo.O teste do labirinto em cruz elevado mostra que 21 dias de modelagem diminuíram significativamente as entradas e a duração no braço aberto em comparação com o grupo controle, enquanto houve um aumento naqueles no braço fechado. O teste de natação exaustiva indicou que a duração da natação do grupo modelo é significativamente menor do que o grupo controle. Por fim, esses resultados indicam que a dopamina no hipotálamo, bem como a proporção de dopamina para serotonina, diminui significativamente no grupo modelo em comparação com o grupo controle, enquanto o conteúdo de serotonina aumenta significativamente.Depois de assistir a este vídeo, você deve ter uma boa compreensão de como construir um tanque de plataforma múltipla e aplicá-lo em seu modelo de fadiga central. Este é um modelo não invasivo, fácil de dominar. Ao experimentar este modelo, é fundamental ficar de olho nos demais, pois eles são bastante agressivos nas primeiras duas semanas, e a lesão pode ocorrer.Embora esse modelo tenha como objetivo fornecer informações sobre a fadiga central, ele também pode ser aplicado a outras doenças por fatores compostos ou ajustando as durações do modelo, como fadiga de navegação e depressão.

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