August 14th, 2018
Aqui, apresentamos um protocolo para apresentar um modelo do rato de fadiga central usando o modificado método de plataforma múltipla (MMPM).
Este método pode ajudar a responder a questões-chave na construção do modelo de fadiga central. Por exemplo, como produzir fadiga tanto do ponto de vista físico quanto psicológico e como avaliá-la. A principal vantagem dessa técnica é combinar fatores mentais com o método de múltiplas plataformas modificado para simular melhor o início da fadiga central.
Tivemos a ideia pela primeira vez quando notamos a estreita associação entre privação intermitente de sono e fadiga central. Tentamos diferentes horas e dias de privação para induzir a fadiga central e, finalmente, descobrimos que 14 horas em 21 dias era o padrão correto. O modelo mostra boa validade na fadiga central e pode ser usado em estudos futuros para ajudar a revisar o mecanismo subjacente da doença.
Comece construindo um tanque de plástico opaco sem tampa. Fixe 15 plataformas circulares no fundo do tanque, que se distribuem ordenadamente em três fileiras e cinco colunas. Deixe espaço suficiente entre cada plataforma, cerca de 13 centímetros entre as linhas e 10 centímetros entre as colunas.
Instale uma torneira na saída de água na lateral do tanque. Por fim, faça uma cobertura de rede de arame de ferro para o tanque, com uma caixa de comida pendurada nela. Comece numerando as raízes da cauda dos ratos com um marcador.
Pese os ratos, excluindo os extremamente leves ou pesados, e divida o restante aleatoriamente nos grupos modelo e controle. Coloque os ratos suavemente nas gaiolas limpas e deixe-os se aclimatar ao laboratório por pelo menos três dias. Forneça água e comida suficientes.
Comece colocando o tanque em um serviço plano e, em seguida, encha com sete centímetros de água morna, aproximadamente um centímetro abaixo da plataforma. Em seguida, coloque forragem e água para um dia na caixa de comida e pendure-a na tampa. Em seguida, retire o grupo modelo de ratos da gaiola pela cauda e coloque-os suavemente no tanque.
Lance todos os ratos na água em vez das plataformas para motivar seu medo da água. Certifique-se de que cada rato tenha uma plataforma para se apoiar, enquanto os ratos do grupo de controle permanecem em suas gaiolas originais com comida e água suficientes. Em seguida, cubra o tanque e monitore os ratos.
Após 14 horas, retire os ratos modelo do tanque e seque o cabelo com um secador. Observe as caudas dos ratos se ela desaparecer. Em seguida, retorne o rato à gaiola original com comida e água.
Por fim, lave o tanque e abra a torneira para escoar o esgoto. Em seguida, esterilize o tanque com um spray de etanol a 75%. Os resultados dos testes de campo aberto indicam que, em comparação com o grupo controle, há uma diminuição significativa no movimento de criação e na velocidade média da atividade voluntária em ratos modelo.
O teste do labirinto em cruz elevado mostra que 21 dias de modelagem diminuíram significativamente as entradas e a duração no braço aberto em comparação com o grupo controle, enquanto houve um aumento naqueles no braço fechado. O teste de natação exaustiva indicou que a duração da natação do grupo modelo é significativamente menor do que o grupo controle. Por fim, esses resultados indicam que a dopamina no hipotálamo, bem como a proporção de dopamina para serotonina, diminui significativamente no grupo modelo em comparação com o grupo controle, enquanto o conteúdo de serotonina aumenta significativamente.
Depois de assistir a este vídeo, você deve ter uma boa compreensão de como construir um tanque de plataforma múltipla e aplicá-lo em seu modelo de fadiga central. Este é um modelo não invasivo, fácil de dominar. Ao experimentar este modelo, é fundamental ficar de olho nos demais, pois eles são bastante agressivos nas primeiras duas semanas, e a lesão pode ocorrer.
Embora esse modelo tenha como objetivo fornecer informações sobre a fadiga central, ele também pode ser aplicado a outras doenças por fatores compostos ou ajustando as durações do modelo, como fadiga de navegação e depressão.
View the full transcript and gain access to thousands of scientific videos
Este estudo apresenta um protocolo para introduzir um modelo de rato de fadiga central usando o método modificado de múltiplas plataformas (MMPM). A abordagem combina fatores mentais e físicos para simular melhor a fadiga central, visando explorar os mecanismos subjacentes e os efeitos da privação intermitente de sono no modelo.
This rat model of central fatigue enables mechanistic de-risking in early discovery by simulating both physical and psychological contributors to fatigue, supporting target validation in CNS disorders. The model provides predictive value through quantifiable behavioral and neurochemical endpoints, aiding in lead identification and portfolio triage for fatigue-related indications.
The method fits within the discovery continuum from hypothesis testing to lead identification, providing a disease-relevant system for CNS target validation.