August 14th, 2018
Aqui, apresentamos um protocolo para apresentar um modelo do rato de fadiga central usando o modificado método de plataforma múltipla (MMPM).
Este método pode ajudar a responder a questões-chave na construção do modelo de fadiga central. Por exemplo, como produzir fadiga tanto do ponto de vista físico quanto psicológico e como avaliá-la. A principal vantagem dessa técnica é combinar fatores mentais com o método de múltiplas plataformas modificado para simular melhor o início da fadiga central.
Tivemos a ideia pela primeira vez quando notamos a estreita associação entre privação intermitente de sono e fadiga central. Tentamos diferentes horas e dias de privação para induzir a fadiga central e, finalmente, descobrimos que 14 horas em 21 dias era o padrão correto. O modelo mostra boa validade na fadiga central e pode ser usado em estudos futuros para ajudar a revisar o mecanismo subjacente da doença.
Comece construindo um tanque de plástico opaco sem tampa. Fixe 15 plataformas circulares no fundo do tanque, que se distribuem ordenadamente em três fileiras e cinco colunas. Deixe espaço suficiente entre cada plataforma, cerca de 13 centímetros entre as linhas e 10 centímetros entre as colunas.
Instale uma torneira na saída de água na lateral do tanque. Por fim, faça uma cobertura de rede de arame de ferro para o tanque, com uma caixa de comida pendurada nela. Comece numerando as raízes da cauda dos ratos com um marcador.
Pese os ratos, excluindo os extremamente leves ou pesados, e divida o restante aleatoriamente nos grupos modelo e controle. Coloque os ratos suavemente nas gaiolas limpas e deixe-os se aclimatar ao laboratório por pelo menos três dias. Forneça água e comida suficientes.
Comece colocando o tanque em um serviço plano e, em seguida, encha com sete centímetros de água morna, aproximadamente um centímetro abaixo da plataforma. Em seguida, coloque forragem e água para um dia na caixa de comida e pendure-a na tampa. Em seguida, retire o grupo modelo de ratos da gaiola pela cauda e coloque-os suavemente no tanque.
Lance todos os ratos na água em vez das plataformas para motivar seu medo da água. Certifique-se de que cada rato tenha uma plataforma para se apoiar, enquanto os ratos do grupo de controle permanecem em suas gaiolas originais com comida e água suficientes. Em seguida, cubra o tanque e monitore os ratos.
Após 14 horas, retire os ratos modelo do tanque e seque o cabelo com um secador. Observe as caudas dos ratos se ela desaparecer. Em seguida, retorne o rato à gaiola original com comida e água.
Por fim, lave o tanque e abra a torneira para escoar o esgoto. Em seguida, esterilize o tanque com um spray de etanol a 75%. Os resultados dos testes de campo aberto indicam que, em comparação com o grupo controle, há uma diminuição significativa no movimento de criação e na velocidade média da atividade voluntária em ratos modelo.
O teste do labirinto em cruz elevado mostra que 21 dias de modelagem diminuíram significativamente as entradas e a duração no braço aberto em comparação com o grupo controle, enquanto houve um aumento naqueles no braço fechado. O teste de natação exaustiva indicou que a duração da natação do grupo modelo é significativamente menor do que o grupo controle. Por fim, esses resultados indicam que a dopamina no hipotálamo, bem como a proporção de dopamina para serotonina, diminui significativamente no grupo modelo em comparação com o grupo controle, enquanto o conteúdo de serotonina aumenta significativamente.
Depois de assistir a este vídeo, você deve ter uma boa compreensão de como construir um tanque de plataforma múltipla e aplicá-lo em seu modelo de fadiga central. Este é um modelo não invasivo, fácil de dominar. Ao experimentar este modelo, é fundamental ficar de olho nos demais, pois eles são bastante agressivos nas primeiras duas semanas, e a lesão pode ocorrer.
Embora esse modelo tenha como objetivo fornecer informações sobre a fadiga central, ele também pode ser aplicado a outras doenças por fatores compostos ou ajustando as durações do modelo, como fadiga de navegação e depressão.
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Este estudo apresenta um protocolo para introduzir um modelo de rato de fadiga central usando o método modificado de múltiplas plataformas (MMPM). A abordagem combina fatores mentais e físicos para simular melhor a fadiga central, visando explorar os mecanismos subjacentes e os efeitos da privação intermitente de sono no modelo.