June 16th, 2018
Aqui, apresentamos um protocolo de microescala para processamento de amostras de grãos e para incorporar esta abordagem microescala em um pipeline de analítico de alta produtividade. Esta é uma adaptação de taxa de transferência maior de protocolos disponíveis atualmente.
Este método pode ajudar a responder a perguntas-chave, sobre como podemos selecionar melhor as variedades de milho que produzem produtos alimentícios mais nutritivos e também como diferentes compostos nutricionais reagem aos parâmetros atuais de processamento de alimentos. A principal vantagem desta técnica é que ela nos permite analisar várias amostras em laboratório simultaneamente. E nos permite experimentar os estágios inicial, intermediário e final incluídos na produção de flocos de milho.
A demonstração visual do método é crítica, uma vez que muitas das etapas que aumentam o rendimento do protocolo não são intuitivas e resultam em contaminação cruzada de amostras, se não for tomado cuidado. Para começar, coloque uma panela de pressão de 15 litros em uma placa elétrica. Adicione um litro de água da torneira à panela de pressão e aqueça a água a 100 graus Celsius.
Enquanto a água esquenta, adicione uma solução de açúcar e sal e 100 gramas de grãos para descascar em quatro potes de conservas de um litro. Em seguida, use uma vareta de vidro para misturar a solução com os grãos de descamação. Quando a água da panela de pressão começar a ferver, adicione um litro de água da torneira para reduzir a temperatura da água.
Em seguida, coloque os potes de conservas contendo os grãos de lascas de amostra na panela de pressão. Depois que a água ferver, recoloque a tampa da panela de pressão. Cozinhe os grãos de lascas da amostra a 15 PSI por uma hora.
Em seguida, deixe a panela de pressão esfriar e despressurize completamente. Com cuidado, use luvas resistentes ao calor para remover a tampa da panela de pressão. Em seguida, use pinças especializadas para remover os grãos de descamação da panela de pressão.
Use uma espátula para remover qualquer material que não seja endosperma dos grãos de descamação. Coloque 30 gramas dos grãos cozidos em um barco de pesagem e seque em um forno a 65 graus Celsius por 12 horas. Em seguida, use um moinho de café para moer a amostra de grãos cozidos em um pó fino.
Primeiro, asse as amostras de grão, em uma assadeira forrada com papel alumínio em um forno de convecção, a 107,2 graus Celsius por 50 minutos. Mexa as amostras após 25 minutos para garantir um cozimento uniforme. Após o período de cozimento de 50 minutos, remova a assadeira e deixe as amostras esfriarem em temperatura ambiente por 30 minutos.
Em seguida, remova 30 gramas dos grãos cozidos da assadeira, coloque a amostra em um barco de pesagem e seque em um forno a 65 graus Celsius por 12 horas. Após a secagem, use um moinho de café para moer a amostra até formar um pó fino e armazene para análise posterior. Primeiro, remova os grãos cozidos restantes da assadeira e coloque-os em um pedaço de papel manteiga de 1 metro dobrado em uma bolsa.
Em seguida, alimente cuidadosamente os grãos assados na bolsa por meio de uma prensa de tortilha. Depois de enrolar os grãos assados na prensa, use um cortador de pizza para cortar os grãos assados enrolados em quadrados de dois centímetros e meio por dois centímetros e meio. Abra a bolsa de papel manteiga e deixe as amostras de flocos enroladas secarem em temperatura ambiente por 12 horas.
Em seguida, coloque as amostras em flocos em um forno de convecção pré-aquecido, a 204,4 graus Celsius por 60 a 90 segundos. Para garantir uma torragem uniforme, espalhe as amostras uniformemente. Deixe as amostras esfriarem em temperatura ambiente, por cinco minutos para produzir o produto final de floco de milho torrado.
Por fim, use um moinho de café para moer a amostra de floco de milho torrado em um pó fino. Este protocolo pode ser usado em conjunto com muitas análises nutricionais diferentes. Utilizando este protocolo, foi analisado o teor de ácido ferúlico e ácido p-cumárico dos flocos de milho em todas as etapas do processamento.
Independentemente da cultivar híbrida específica, a maior parte do ácido ferúlico insolúvel foi removida durante a moagem a seco e o cozimento. Da mesma forma, o ácido p-cumárico também foi removido durante a moagem a seco e o cozimento. Além disso, a classificação inicial das cultivares em termos do teor de ácido ferúlico ligado insolúvel e teor de ácido p-cumárico não foi indicativa de sua classificação no estágio final de processamento.
Uma vez dominadas, 16 amostras podem ser analisadas diariamente usando esta técnica, se realizada corretamente. Isso é em comparação com os protocolos mais antigos que usamos, que permitiam que apenas três a quatro amostras fossem analisadas diariamente. Após o seu desenvolvimento, esta técnica permitiu-nos explorar não só o que acontece ao conteúdo global de certos compostos nutricionais ao longo do processamento, mas também se os compostos estão presentes em diferentes formas com diferentes biodisponibilidades.
Não se esqueça que ao trabalhar com uma panela de pressão, pode ser extremamente perigoso, e cuidados, como seguir e entender todos os materiais escritos fornecidos com o equipamento e protocolos de segurança, devem sempre ser seguidos durante a realização deste procedimento.
Este artigo apresenta um protocolo em microescala para processamento de amostras de grãos, focando especificamente em variedades de milho. O método aumenta o rendimento na análise nutricional ao permitir a análise simultânea de múltiplas amostras.