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DOI: 10.3791/62312-v
Ziyi Hu*1, Tingting Zhou*1, Fangrong Wu1, Fan Lin1,2
1Department of Cell Biology, School of Basic Medical Sciences,Nanjing Medical University, 2Institute for Brain Tumors & Key Laboratory of Rare Metabolic Diseases,Nanjing Medical University; Nanjing Medical University Affiliated Cancer Hospital; Key Laboratory of Human Functional Genomics of Jiangsu Province
Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.
As células-tronco de glioma (GSCs) são uma pequena fração de células cancerosas que desempenham papéis essenciais na iniciação do tumor, angiogênese e resistência a medicamentos no glioblastoma (GBM), o tumor cerebral primário mais prevalente e devastador. A presença de GSCs torna o GBM muito refratária para a maioria dos agentes alvos individuais, de modo que métodos de triagem de alto rendimento são necessários para identificar potenciais terapêuticas de combinação eficaz. O protocolo descreve um fluxo de trabalho simples para permitir uma triagem rápida para terapia de combinação potencial com interação sinérgica. As etapas gerais deste fluxo de trabalho consistem em estabelecer GSCs com marca de luciferase, preparar placas revestidas de matrigel, triagem combinada de medicamentos, analisar e validar os resultados.
Glioma stem As células-tronco são sub-população de células no glioma, que geralmente são resistentes à quimioterapia e radioterapia. Aqui descrevemos o método de identificação rápida de terapias combinadas, visando células-tronco glioma, em vez de células glioma diferenciadas. Comparado com outros métodos, o que pode ser um trabalhoso e complicado.
Este protocolo é relativamente simples e rápido, para identificar potenciais combinações de drogas úteis. Comece coletando as células-tronco de glioma ou GSCs do meio de cultura, e centrifugando-as a 70 vezes G por três minutos à temperatura ambiente. Depois de remover o supernante, digerir as células com accutase por quatro minutos a 37 graus Celsius.
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