Программируемая Электрическая стимуляция у мышей

Мышь под наркозом крепится к нагревательной доске в положении лежа на спине. Правая яремная вена отделяется и проксимальный конец вены перевязывается. В вену вводится аполярный катетер 1,1 французского OC, а затем катетер продвигается в правое предсердие и правый желудочек.

Наконец, дистальный конец вены перевязывается, чтобы зафиксировать положение катетера и предотвратить кровотечение. Здравствуйте, я Наали из лаборатории доктора Звера на кафедре молекулярной физиологии и биофизики в Медицинском колледже Бейлора. Сегодня мы покажем вам методику программирования электростимуляции у мышей.

Мы используем эту процедуру в нашей лаборатории для изучения индуцируемых аритмий у мышей. Итак, приступим. Перед операцией по канюляции и введению катетера используйте машинки для стрижки волос, чтобы сбрить шерсть мыши, находящейся под наркозом, от линии шеи до середины груди.

Продезинфицируйте операционную область 10%-ным повидон-йодом. Поместите мышь в лежачее положение и прикрепите ее конечности к электродам ЭКГ Incorporated. В нагревательной панели мы рекомендуем систему, которая включает в себя ректальный датчик температуры, подключенный к грелке, управляемой системой термоанализатора, таким образом, чтобы температура тела поддерживалась на уровне 37 плюс-минус один градус Цельсия.

Убедившись, что мышь полностью обезболивалась, сделайте полудюймовый разрез справа от средней линии с окончанием кодала на уровне ключицы. Отделите подкожную клетчатку, слюнные железы и лимфатические ткани с помощью тупой диссекции. Чтобы визуализировать правую яремную вену, перевяжите проксимальный конец вены шестью ох швами.

Наложите еще один шов под вену на дистальном конце визуализируемого сегмента. Теперь начните компьютерный сбор данных для записи поверхностной ЭКГ. Подключите катетер к внешнему стимулятору в режиме записи.

Далее с помощью микроножниц сделайте небольшой разрез в продольном направлении вены, при этом аккуратно натягивая проксимальный шов. Чтобы сохранить вену прямой, проведите катетер French Octo puller 1.1 через вену в правое предсердие и желудочек. Правильное положение катетера проверяется путем визуализации волновых форм четырех внутрисердечных электрограмм на уровне верхушки правого желудочка, основания правого желудочка, межпредсердного желудочкового узла и правого предсердия окончательно перевязывают дистальный шов для обеспечения положения катетера и предотвращения возможного кровотечения при стимуляции предсердий.

Электродная пара, расположенная внутри предсердия, переключается из режима записи в режим стимуляции, в то время как другие электродные пары остаются в режиме записи. Чтобы определить, есть ли у мыши повышенная уязвимость к предсердным аритмиям, проводится программная электростимуляция правого предсердия. Во-первых, определите порог стимуляции предсердий, применяя импульсы тока не менее 52 миллисекунд при различной длине основного цикла или BCL для проверки постоянства захвата стимула.

БКЛ начальной последовательности импульсов немного ниже, чем собственная БКЛ, и уменьшается на 10 миллисекунд. Типичная амплитуда тока, необходимая для захвата стимула, составляет от 100 до 200 микроампер. После применения 15-секундной кардиостимуляции предсердий с БК в 100 миллисекунд измерьте время восстановления синусового узла или SNRT, которое определяется как интервал между последним стимулом в кардиостимуляции и началом первого спонтанного синусового сокращения.

Для определения эффективного рефрактерного периода предсердий или ERP применяют серию предсердных кардиостимуляционных линий на фиксированном BCLS One с парой более коротких преждевременных стимулов S two. Интервал от S 1 до S 2 постепенно сокращается на две миллисекунды в каждой кардиостимуляции с 70 миллисекунд до 20 миллисекунд с периодом восстановления не менее 30 секунд между каждым протоколом стимуляции. ERP определяется как самый длинный интервал связи от S one до S two для предсердий, которые не смогли сгенерировать распространенный ритм с S два.

Аналогичное применение предсердных кардиостимуляции и преждевременных стимулов используется для определения эффективного рефрактерного периода желудочкового узла предсердий AV NERP. AV NERP определяется как самый длинный интервал связи от S 1 до S два, при котором за преждевременной стимуляцией, подаваемой в предсердие, следует потенциал шипения, но не комплекс QRS. Индуцируемость предсердных аритмий, включая фибрилляцию предсердий, может быть проверена с использованием протокола пакетной стимуляции, при котором применяется серия из двух секундных всплесков.

Первый двухсекундный пакет имеет длину цикла или CL 40 миллисекунд, а каждый последующий двухсекундный пакет имеет CL на две миллисекунды короче предыдущего пакета до последнего CL 20 миллисекунд. После того, как все протоколы темпа завершены, сбор данных прекращается. В случае исследования терминальной ВП узел осторожно ослабляется, чтобы освободить катетер.

Здесь мы показываем некоторые репрезентативные поверхностные ЭКГ и внутрисердечные электрограммы у мыши. Эта поверхностная ЭКГ показывает регулярный синусовый ритм с частотой примерно 540 ударов в минуту. Следующие четыре электрограммы показывают записи биполярной внутрисердечной электрограммы на уровне правого предсердия.

Предсердный желудочковый узел, основание правого желудочка и верхушка правого желудочка. Внутрисердечная волна А в записи электрограммы на уровне правого предсердия соответствует зубцу Р на поверхности. ККИ. Зубец V на желудочковой электрограмме соответствует волне QRS на поверхностной ККИ.

Далее мы покажем репрезентативную поверхностную ККГ и внутрисердечную электрограмму, а также мышь, у которой развилась фибрилляция предсердий после взрыва предсердий, на поверхности. CCG, интервал RR нерегулярный, и нет видимых зубцов P. С другой стороны, электрограмма предсердий показывает быстрые предсердные сигналы, которые являются нерегулярными, что согласуется с фибрилляцией предсердий.

Желудочковая электрограмма имеет более медленную частоту, аналогичную интервалам RR поверхностных отведений. Мы только что показали вам, как проводить программную электростимуляцию у мыши, при этом важно помнить о необходимости избегать обильных кровотечений и поддерживать температуру тела в пределах нормы от 36 до 37 градусов. Кроме того, постарайтесь свести к минимуму воздействие Asof Florin, потому что воздействие более полной концентрации в течение двух часов может подавить сердечную и дыхательную функцию у мышей.

Поэтому мы рекомендовали усложнить все начатое в течение двух часов. Вот и все. Спасибо за просмотр и удачи в ваших экспериментах.