Точный и высокопроизводительный анализ роста бактерий с помощью считывателя микропластин

Начните с бактерий, сохранённых в глицероловом запасе, ранее выращенном до ранней экспоненциальной фазы для обеспечения равномерного физиологического состояния и воспроизводимого роста.

Добавьте среду роста и вихрь для равномерного восстановления бактерий.

Последовательно разбавлять суспензию с помощью свежих сред для получения диапазона исходной плотности клеток.

Загрузите образцы во внутренние скважины многоколодной пластины, оставляя крайние ямы заполненными пустыми материалами, чтобы минимизировать вариабельность, связанную с испарением.

Поставьте пластину в считыватель микропластин, настроенный для постоянного встряхивания и оптимальной температуры для роста бактерий.

По мере размножения бактерий оптическая плотность или передозировка культуры увеличивается.

Измеряйте перегрузку с фиксированными интервалами.

Вычтите начальные значения OD, полученные из пустых ям, чтобы скорректировать фоновое поглощение.

Затем вычислите скорость роста по последовательным значениям OD, измеряемых в определённые временные интервалы, что позволяет высокопроизводительную и точную количественную оценку динамики роста бактерий.

Для фиксации роста в реальном времени добавьте примерно 25 миллилитров M63 в стер