Скрининг клеточной смерти с использованием окрашивания DAPI: метод быстрого скрининга ИК-индуцированной клоногенной гибели клеток в раковых клеточных линиях

Воздействие ионизирующего излучения, такого как рентгеновское излучение, может вызвать повреждение ДНК, что в конечном итоге приведет к гибели клеток. Чтобы проверить влияние ионизирующего излучения на профили гибели клеток, начните с использования чашки для культивирования, содержащей адгезивные раковые клетки, помещенной на поверхность покровного стекла.

Облучайте чашку для культуры рентгеновскими лучами в течение нужной продолжительности. Это лечение вызывает повреждение ДНК внутри клеток. Далее отсасывайте отработанные среды из чашки для культуры и добавляйте подходящий фиксатор. Этот раствор проникает в клетки и фиксирует клеточные компоненты на месте во время последующих этапов окрашивания.

Выбросьте фиксирующий раствор. Снимите покровную крышку, содержащую обработанные рентгеновскими лучами клетки, из чашки для культивирования. Откиньте покровную крышку и поместите ее на поверхность предметного стекла, на которую нанесена капля пятна DAPI таким образом, чтобы элементы находились в прямом контакте с DAPI.

Молекулы DAPI проникают в ядра и связываются с A-T-богатыми сайтами ДНК. Теперь визуализируйте клетки под флуоресцентным микроскопом. Ядра выглядят голубыми и имеют четкую м