Анализ активности рецепторов эстрогена для скрининга эстрогенной эстрогенной активности

Эстрогены — это стероидные гормоны, которые действуют как эндокринные сигнальные молекулы и связываются с ядерными рецепторами — рецепторами эстрогена бета, образуя комплексы эстроген-бета-рецепторов.

Эти лиганд-рецепторные комплексы димеризуются и образуют гомодимеры в цитоплазме клетки. Полученный гомодимер попадает в ядро, связывается с ответным элементом эстрогена, ERE — специфической последовательностью ДНК в промоторе гена-мишени — и инициирует транскрипцию.

Для определения эстрогенной активности фитоэстрогенов — вторичных метаболитов растительного происхождения, имитирующих функцию эстрогенов, — начинают с многолуночного планшета, содержащего репортерные клетки, взвешенные в соответствующей среде.

Репортерные клетки спроектированы таким образом, чтобы сверхэкспрессировать рецепторы эстрогена бета и трансфицированы геном люциферазы, слитым с промотором ЭРЭ. Добавьте раствор образца, содержащий фитоэстрогены, и инкубируйте.

Во время инкубации фитоэстроген связывается с рецепторами эстрогенов, бета — экспрессируется в репортерных клетках. После связывания комплексы фитоэстроген-рецепторы димеризуются и транслоцируются в ядро.

Внутри ядра димеризованный комплекс связывается с ER