Энциклопедия экспериментов JoVE
Нейронауки
0 просмотров • 6:37 мин. • May 29th, 2025
Закрепите мышь под наркозом с краниальным окном над моторной корой головного мозга на беговой дорожке.
Мышь экспрессирует репортер Protein Kinase-A в нейронах коры головного мозга.
Расположите беговую дорожку под двухфотонным объективом FLIM.
Добавьте каплю воды между объективом и черепным окном.
Дайте мыши проснуться и акклиматизироваться к беговой дорожке.
Используя светлопольное освещение, определите местоположение области изображения. Закройте корпус микроскопа, чтобы заблокировать внешний свет.
Установите параметры визуализации, начните вращение беговой дорожки, чтобы вызвать локомоцию, и начните визуализацию.
Принудительная локомоция активирует PKA, которая фосфорилирует репортер, приближая его донора и акцепторные флуорофоры.
Микроскоп направляет инфракрасный лазер, возбуждая донора к передаче энергии акцептору, сокращая время жизни флуоресценции донора.
Когда локомоция прекращается, PKA и репортер возвращаются в свои неактивные состояния, уменьшая передачу энергии и увеличивая время жизни флуоресценции донора.
Проанализируйте изображения, чтобы сравнить уровни корковой ФКА во время отдыха и передвижения.
По крайней мере, через две недели после установки черепного окна установите дл
Просмотрите полный транскрипт и получите доступ к тысячам научных видео