Одноклеточный экспрессии генов с помощью Multiplex RT-КПЦР к характеризации гетерогенности редких популяций лимфоидных

10.9K просмотров

Цитируется: 7

10:23 мин.

19 января 2017 г.

10.3791/54858-v

19 января 2017 г.

10.9K просмотров

Thibaut Perchet¹ , Sylvestre Chea¹ , Milena Hasan² , Ana Cumano¹ , Rachel Golub¹

¹Unit for Lymphopoieseis, Immunology Department, INSERM U1223, University Paris Diderot, Sorbonne Paris Cité, Cellule Pasteur, Institut Pasteur, ²Center for Translational Science, Institut Pasteur, INSERM UMS20

Этот протокол описывает, как оценить экспрессию большого массива генов на клоновых уровне. Одноклеточный RT-КПЦР производит весьма надежные результаты с сильной чувствительностью для сотен образцов и генов.

Больше видео

Врожденные лимфоидные клетки

печеночный компартмент ВЛК

сортировка клеток с помощью флуоресцентно-активированного цитометра

микрофлюидный чип для кПЦР

смесь для преамплификации

гетерогенность экспрессии генов

ПЦР-анализ в реальном времени

Chapters in this video

0:05

Название

0:40

Подготовка 96-луночного планшета для сортировки единичных клеток

1:55

Флуоресцентная активированная сортировка единичных клеток (FACS)

3:02

Преамплификация

3:38

Подготовка 96-луночного планшета с образцами

4:23

Подготовка 96-луночного анализационного планшета

4:51

Подготовка и запуск чипа для анализа экспрессии генов в единичных клетках

6:52

Анализ данных

8:04

Результаты: мультиплексная RT-qPCR на уровне единичных клеток выявляет клеточную гетерогенность пула ILC печени

9:33

Заключение