Структурно-функциональные исследования в мышиных эмбриональных стволовых клеток Использование Рекомбиназа-опосредованного кассетный Обмен

Общая цель этого структурно-функционального метода состоит в том, чтобы проанализировать на молекулярном уровне роль различных белковых доменов или мутаций, связанных с заболеванием, в наивных или дифференцированных эмбриональных стволовых клетках мышей. Этот метод может помочь выяснить, как различные остатки или домены белка могут способствовать его функционированию в данном клеточном контексте. Основное преимущество этого метода заключается в том, что он позволяет очень эффективно нацеливаться на спасательные конструкции в геноме нокаутированных эмбриональных стволовых клеток, или ES-клеток, и исследовать их роль в различных типах клеток.

Для этого мы объединили три высокоэффективные технологии. К ним относятся улучшенная изоляция эмбриональных стволовых клеток мыши, сборка фактора нацеливания на основе рекомбинации и нацеливание на ES-клетки с помощью рекомбинационно-опосредованного кассетного обмена, или RMC. Некоторые из процедур будет демонстрировать Джинке Д'Хонт, техник из моей лаборатории.