Высокопроизводительная количественная оценка синтеза и распределения митохондриальной ДНК на основе изображений

4.3K просмотров

10:47 мин

5 мая 2023 г.

10.3791/65236-v

5 мая 2023 г.

4.3K просмотров

Описана процедура изучения динамики метаболизма митохондриальной ДНК (мтДНК) в клетках с использованием формата многолуночного планшета и автоматизированной иммунофлуоресцентной визуализации для обнаружения и количественной оценки синтеза и распределения мтДНК. Это может быть дополнительно использовано для исследования влияния различных ингибиторов, клеточных стрессов и подавления генов на метаболизм мтДНК.

Больше видео

Mitochondrial DNA

Chapters in this video

0:00

Introduction

1:21

Preparation of siRNA Mixture for Mitochondrial DNA Synthesis

2:00

Cell Transfection and 5‐Bromo‐2’‐Deoxyuridine (BrdU) Incorporation in HeLa Cells

3:14

5-Bromo-2'-Deoxyuridine (BrdU) Labeling of Mitochondrial DNA in HeLa Cells

4:51

HeLa Cell Fixation with Hoechst 33342 and Blocking

5:51

Addition of Primary and Secondary Antibodies to the Transfected HeLa Cells to Monitor the mtDNA Distribution

7:49

Quantitative Image Analysis to Measure the mtDNA and Gene Expression Levels in the Transfected HeLa Cells

Related Videos