Zusammengesetzte Verwaltung III

Lab Animal Research

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Overview

< p Class = "Jove_content" > Quelle: Kay Stewart, RVT, RLATG, Anus; Valerie A. Schroeder, RVT, RLATG. Universität von Notre Dame, IN

es gibt viele häufig verwendete Routen für zusammengesetzte Verwaltung bei Mäusen und Ratten. Bestimmte Protokolle erfordern jedoch den Einsatz von weniger häufig verwendete Routen, einschließlich intradermale, intranasale und intrakranielle Injektionen. Fachausbildung ist essentiell für diese Verfahren erfolgreich durchgeführt werden. Begründung für diese Strecken müssen bereitgestellt werden, um institutionelle Animal Care und Nutzung Committee (IACUC) Zustimmung zu gewinnen.

Cite this Video

JoVE Science Education Database. Lab Animal Research. Zusammengesetzte Verwaltung III. JoVE, Cambridge, MA, (2017).

Principles

Intraderma Linjections sind in den äußeren Schichten der Dermis, unterhalb der oberen Hautschicht (Epidermis) geliefert. Diese Injektion Route ist in der Regel für die Beurteilung der Entzündung, kutane Blut fließen Diagnostika oder allergische Reaktionen auf ein Antigen vorbehalten.

Obwohl häufig für die lokale Übermittlung von Impfungen oder abschwellende Spray verwendet, intranasale Verabreichung kann auch verwendet werden, für die systemische und zentralen Nervensystem (ZNS) Lieferung. Die Schleimhaut, die die Nasenhöhle Linien verfügt über ein reichhaltiges Angebot an Blutgefäßen und Nerven, die erlauben eine schnelle systemische Absorption und direkte Ausrichtung auf das ZNS. Bestehend aus lipophile niedermolekulare Substanzen haben eine weitaus größere Absorptionsrate als diejenigen, die größere Moleküle enthalten. 2

Obwohl Anästhesie nicht für dieses Verfahren erforderlich ist, kann erleichtert die richtige Platzierung der Verbindung in die Nasenlöcher, die genaue Dosierung zu gewährleisten. Es wurde nachgewiesen, dass narkotisierten Tiere um das Fünffache größere Lieferung von Medikamenten an das Gehirn im Vergleich zu einem bewussten Tier haben. 2 unanesthetized Ratten sind sehr resistent gegen intranasale Verabreichung. Allerdings gibt es eine Studie, die effektive Bereitstellung Techniken für intranasale Verabreichung von frei beweglichen Ratten gezeigt. 3 darüber hinaus alert Tiere können versuchen, an der Pipettenspitze oder Nadel, erschwert die Lieferung des Stoffes zu beißen.

Vorteile für intranasale Verabreichung sind, dass diese Technik nur wenig Training und Geschick erfordert, und es ist eine nichtinvasive Technik für das Tier. Jedoch wird durch die Möglichkeit der Aerosolization, die Benutzung von einem Biosafety Kabinett und Auge geraten, besonders beim Arbeiten mit einer bewussten Tier. Um zu vermeiden, die Tiere ertrinken, sollte darüber hinaus die kleinste Dosis möglich verwendet werden. Wenn während dieser Prozedur Zyanose jederzeit Mundatmung oder andere Zeichen der Bedrängnisses in das Tier gesehen, das Verfahren sollte sofort abgebrochen werden.

intrakranielle Injektionen bei Erwachsenen Mäusen und Ratten beschäftigen die Verwendung von stereotaktischen Ausrüstung, um die korrekte Platzierung zu gewährleisten und Tiefe der Injektion. Jedoch bei Mäusen 3 bis 28 Tage alt und Ratten bis zu 14 Tage alt, der Schädel ist dünn genug, um Spritzen direkt durch sie; Es ist zu empfindlich, um der stereotaktischen Gerät unterstützen. Die Maus oder Ratte Welpen sollten mit der Mutter bleiben, bis das Verfahren, und sie Ihr so bald wie möglich zurückgegeben werden soll sobald der Vorgang abgeschlossen ist. Postinjection Pflege beinhaltet kontinuierliche Überwachung auf eine Wärmequelle bis normale Bewegung und Verhalten, einschließlich Krankenpflege, eingehalten werden. Der Hauptgrund für diese Technik verwenden soll pharmakologische Agenten auf das zentrale Nervensystem, die die Blut - Hirn-Schranke zu überqueren, oder um die Auswirkungen der systemischen Route beteiligt erfordern. 1

Procedure

1. intradermale Verabreichung

  1. die intradermale Injektionen sind wässrige-basierte Verbindungen. Die Lösungen müssen physiologisch gepuffert werden, um einen neutralen pH-Wert haben zur Vermeidung von Gewebsnekrosen an der Injektionsstelle.
  2. Der Nadel Größenbereich ist 25-30 Gauge, die kleinstmögliche.
  3. Der Dosisbereich Pro Injektionsstelle ist 50-100 µL. Gatterschalters übermäßige Mengen können dazu führen, dass Nekrosen an der Injektionsstelle oder Leckage der Verbindung von der Seite durch Druck.
  4. Für die genaue Platzierung der Nadel in die intradermale Raum, es ist notwendig, um Mäuse und Ratten zu betäuben. Inhalation Anästhesie ermöglicht eine schnelle Einarbeitung und Erholung; injizierbare Anästhesie hat jedoch den Vorteil der Bereitstellung von ausreichend Zeit für die Vorbereitung des Bereichs und Durchführung der Injektion. 1
  5. entfernen die Haare an der Einstichstelle durch den Einsatz einer Enthaarungscreme oder durch das Rasieren Bereich.
  6. Gründlich entfernen Sie jeglichen Rest enthaarende Creme oder Haare Schmutz.
  7. Ein aktuelles Antiseptikum, z. B. eine Jodlösung, Chlorhexidin-Lösung oder Alkohol anwenden.
  8. Verwaltungsverfahren
    1. spannen Sie die Haut straff zwischen Daumen und Zeigefinger. Dies sorgt für Stabilität auf der Haut Wenn die Nadelpositionierung.
    2. Legen Sie die Nadel Fase oben auf der Haut.
    3. Nadel sanft in die Haut zwischen der Epidermis und der Dermis. Die Nadel direkt hinter der Abschrägung.
    4. Spritzen die Substanz langsam. Injektion der Verbindung schafft eine Blase oder kleine Blase, in der Haut.
    5. Pause nach der Injektion, lassen Sie die Haut zu dehnen und anpassen, bevor die Nadel zurückziehen.
  9. Vorsichtsmaßnahmen
    1. auf den Kolben zurückziehen ist nicht notwendig.
    2. Wenn die Nadel, in den subkutanen Raum, keine Blase eingeführt wird bildet. Injektion zu tief führt eine subkutane Injektion.
    3. Vermeiden beflecken oder Abwischen der Gegend, da dies die Verbindung undicht aus der Injektionsstelle führen kann.
    4. Wenn Sie mehrere Injektionen durchführen, Raum sie damit die Blebs nicht überlappen.

Figure 1
Abbildung 1. Intradermale Injektion bei Mäusen.

2. intranasale Verabreichung

  1. Anlagen
    1. verwenden eine Micropipetting-Einheit-Pipette kalibriert werden kann, um eine genaue Volumen liefern.
    2. Einweg-Pipettenspitzen sollte verwendet werden, um Kreuzkontaminationen zu vermeiden. TB-Spritzen, stumpfe Nadeln und Schläuche können auch für die Dosierung verwendet werden.
    3. Total Injektionsvolumina für Ratten sollte nicht mehr als 40-100 µL und sollte in 6 bis 10 µL Tropfen gegeben werden. Bei Mäusen, die maximale Gesamtvolumen beträgt 24 µL, in 3 bis 4 µL Tropfen gegeben.
  2. Verwaltung in bewusste Tiere
    1. manuelle Zurückhaltung bei bewussten Tieren erfordert, dass der Kopf relativ unbeweglich, so dass die Pipettenspitze oder stumpfen Nadel nahe genug, um die Nasenlöcher, die Verbindung zu liefern platziert werden kann, aber nicht so nah stecken oder zerreißt das Nasengewebe.
    2. Das Tier zurückhalten und halten Sie ihn in eine vertikale Position.
    3. Stellen einen kleinen Tropfen einer flüssigen Substanz in die nasale öffnen. Das Tier sollte das Tröpfchen einatmen.
    4. Verwalten ein zusätzliches Volumen, Nasenlöcher abwechselnd, bis das gesamte Volumen gegeben hat.
    5. Bei der Verabreichung von größerer Mengen, ist es wichtig, nicht die Brust während Zurückhaltung verengen. Brust-Kompression behindert die Fähigkeit des Tieres, die Flüssigkeit in die Bronchien und Lungen zeichnen ausreichend tiefe Atemzüge zu nehmen.

Figure 2
Abbildung 2. Intranasale Verabreichung in bewusste Mäuse.

  1. Verwaltung im Unbewussten Tiere
    1. Using Inhalation Anästhetika ermöglicht ein immobilisierten Tier während der Ansatz und die Lieferung der Verbindung. Dies verhindert, dass das Tier beißen die Dosierausrüstung, den Verlust der Verbindung durch Rucken des Kopfes und der Schädigung des Tieres ' s Nasengewebe, Augen oder Haut. Das Tier ist auch weniger wahrscheinlich, snort und sprühen Sie die Verbindung aus den Nasenlöchern bei Verabreichung.
    2. Legen Sie das Tier in die Rückenlage. Die Position des Kopfes hat Einfluss auf die Platzierung der Lösung in die Nasenlöcher. Es hat sich gezeigt, dass die ideale Position für die CNS Lieferung mit dem Tier Rückenlage; Dies ermöglicht eine bessere Absorption. 2
    3. die Hälfte der Verbindung direkt in eine Seite der nasalen Öffnung, timing es mit Inhalation zu verwalten. Schalten Sie das Tier über.
    4. Wie oben beschrieben, Verwalten der anderen Hälfte des Volumens in die nasale Öffnung.

Figure 3
Abbildung 3. Intranasale Verabreichung im Unbewussten Mäuse.

3. intrakranielle Verabreichung bei neugeborenen Mäusen und Ratten

  1. Mäusen oder Ratten müssen für intrakranielle Injektionen betäubt.
-------
Maus Ratte
Alter (Tage) Nadel zu messen (g) Alter (Tage) Nadel messen (g)
0-729-300-5 27-29
7-14 27 5-1025-27
14-28 25 10-14 25
Alter (Tage) Nadel Länge (mm) Alter (Tage) Nadel Länge (mm)
0-7 2 0-42-3
7-1434-7 3
14-21 4 7 10 4
21-285 10-14 5
Alter (Tage) Volumen (µL) Alter (Tage) Volumen (µL)
0-5 < 20 1-3 < 20
6-20 < 60 4-10 < 60
20-28 < 100 11-14 < 100

Tabelle 1. Gauge Nadel, Nadel Länge und maximale Lautstärke von intrakraniellen Verwaltung gemäß Alter von Mäusen und Ratten. 4

  1. Anlagen
    1. bestimmen die richtige Nadel Manometer und maximale Lautstärke der Verwaltung gemäß Tabelle 1.
    2. Bereiten einen Nadelschutz vor das Tier betäuben.
      Hinweis: Die Injektion Tiefe der Nadel wird durch den Einsatz einer Wache gesteuert, die mit die Nadelschutzkappe erstellt wird.
      1. Die Garde, eine Nadel zu erstellen ist gegen die Nadelschutzkappe gemessen und eine Marke befindet sich auf der Kappe um anzugeben, wo zu schneiden. Der Schnitt sollte gemacht werden, so dass 2 bis 5 mm der Nadel werden ausgesetzt, wenn die Kappe auf den Nadel ersetzt wird.
      2. Die Länge der freiliegenden Nadel muss so lang sein, dringen in die Haut und Schädel, und die gewünschte Tiefe in das Gehirn zu erreichen.
      3. Die Nadellängen benötigt für Mäuse und Ratten sind in Tabelle 1 aufgeführt.
    3. Eine Heizquelle ist erforderlich, um Unterkühlung in die Welpen zu verhindern. Es gibt verschiedene Arten: ein elektrisches Heizkissen gesetzt auf Low, eine zirkulierende Wasser Decke oder eine wiederverwendbare chemische Reaktion Wärme Beutel.
  2. Zurückhaltung
    1. Maus und Ratte Welpen 10 Tage erfordern keine Anästhesie für dieses Verfahren. Zügeln sie manuell durch sie nur hinter dem Kopf halten und ziehen die Haut kaudal, leichten Druck über die Schultern.
    2. Anesthetize Welpen mehr als 10 Tage alt mit Isofluran Inhalation. Legen Sie eine Induktion Kammer auf eine Präzision Vaporizer oder eine Glasglocke mit einem Wattebausch, getränkt mit Isofluran. Sobald der Welpe immobilisiert ist, die Narkose ist wirksam für ca. 40 Sekunden die bietet genügend Zeit für die Injektion.
  3. Injektionstechnik
    1. ziehen die Substanz in die Spritze und die Kappe/Nadelführung über die Nadel legen.
    2. Das Injektionsvolumen empfohlen, da das maximale Volumen pro Neugeborenen Maus oder Ratte 100 µL beträgt und das Absetzer oder ältere Mäuse für bis zu 300 µL ist.
    3. In der Hirnrinde des Neugeborenen zu injizieren, stechen Sie die Nadel 5 mm hinter dem Auge, ca. 3 mm von der Mittellinie des Schädels.
    4. Die Absetzer Maus Injektionsstelle ist etwa auf halbem Weg zwischen dem Auge und Ohr und direkt an der Mittellinie.

Figure 4
Abbildung 4. Intrakranielle Verwaltung in Maus Pup.

manchmal verschiedene experimentelle Ansätze erfordern den Einsatz von weniger verwendeten Darreichungsformen zusammengesetzte bei Nagetieren. Intradermale, intranasale und intrakranielle sind drei solcher alternativen Routen, dass heute die biomedizinische Forscher im Labor verwenden.

Wie der Name schon sagt, intradermale liefert Verbindungen in den äußeren Schichten der Dermis. Intranasale setzt die Lösung in das Tier ' s Nasenlöchern. Und intrakraniellen beinhaltet das Einfügen der Nadelöhrs direkt in das Nagetier ' Gehirn s.

Fachausbildung ist wichtig, diese Verfahren erfolgreich durchführen. Hier, wir ' ll zeigen zunächst die Überlegungen für jede dieser Methoden und dann zeigen wir lernen die Techniken, die Ihnen hilft die Verfahren bei der Gewährleistung der Sicherheit des Tieres und Erfolg des Experiments.

lassen ' s beginnen mit der Diskussion über wenn diese Routen in der Regel beschäftigt sind und Dinge, die man sollten nicht vergessen bevor Sie beginnen, diese Techniken spezialisierte Verwaltung durchzuführen.

Die intradermale Injektionen werden verwendet, um einen Artikel zu liefern, in den Raum zwischen der Epidermis und der Dermis, die diese Route ist in der Regel für die Beurteilung der Entzündung, kutane Blut fließen Diagnostika oder allergische Reaktionen auf ein Antigen reserviert. Ähnlich wie bei anderen Strecken, sollten die intradermale Lösung auch vorbereitet werden mit Hilfe der sterilen Technik. Und es muss physiologisch gepuffert werden, um einen neutralen pH-Wert haben zur Vermeidung von Gewebsnekrosen an der Injektionsstelle. Ein Hub-Less System mit einem 25-30-Gauge-Nadel wird oft für diese Injektion verwendet. Dieses System hilft bei der Erhaltung der Volumen der Verwaltung, die im Bereich von 50-100 Mikroliter pro Injektionsstelle ist. Injektion von Überschuss kann dazu führen, Nekrose oder unerwünschte zusammengesetzte Leckage durch Druck.

Intranasale Route wird oft für lokale Übermittlung von Impfungen oder auch systemische abschwellende Spray und CNS Lieferung gewählt. Die Schleimhaut, die die Nasenhöhle Linien verfügt über ein reichhaltiges Angebot an Blutgefäßen und Nerven, die erlauben eine schnelle systemische Absorption und direkte Ausrichtung auf das ZNS. Dies ist eine nicht invasive Methode, die nur wenig Training und Geschick und einfache Ausstattung - ein kalibriertes Mikropipette und Einweg-Tips erfordert. Die Verwaltung Volumina für Ratten sollte 40-100 Mikroliter in 6-10 Mikroliter-Tropfen gegeben nicht überschreiten. Und bei Mäusen, die maximale Gesamtvolumen beträgt 24 Mikroliter in 3-4 Mikroliter-Tropfen gegeben.

Obwohl Anästhesie nicht für dieses Verfahren erforderlich ist, hat es einige Vorteile über intranasale Verabreichung in bewusste Tiere (1) erleichtert die richtige Platzierung der Verbindung in die Nasenlöcher, eine exakte Dosierung (2) verhindert, dass die Tier beißen die Dosierausrüstung 3) sorgt dafür, dass es keine Verletzungsgefahr für das Tier ' s Nasengewebe, Augen oder Haut durch Rucken des Kopfes und 4) Tier ist weniger wahrscheinlich, snort und sprühen Sie die Verbindung aus den Nasenlöchern bei Verabreichung.

Intrakranielle Injektionen bei Erwachsenen Mäusen und Ratten setzen den Gebrauch von stereotaktischen Ausrüstung, die in einem Video in beschrieben wird die " Essentials of Neuroscience " Sammlung. Die Ausrüstung sorgt für die richtige Positionierung und richtige Tiefe der Injektion. Hier konzentrieren wir uns auf intrakraniellen Lieferung bei neugeborenen Mäusen und Ratten, bei denen der Schädel ist dünn genug, um direkt durch sie injizieren, und möglicherweise zu empfindlich, um der stereotaktischen Gerät unterstützt. Die Hauptgründe für die Verwendung dieser Technik sind, CNS pharmakologische Wirkstoffe direkt in das ZNS zu liefern und die Auswirkungen, die über systemischen Weg begegnet zu vermeiden. Die Nadelstärke, Länge und Volumen der Verwaltung werden basierend auf die Art und das Alter der Welpen bestimmt. Beachten Sie, dass als das Tier ' s Alter erhöht, die Spurweite abnimmt, die erforderlichen Nadel Länge steigt, und die maximale empfohlene Verwaltung Volumen auch Erhöhungen.

mit diesen Hintergrundinformationen im Hinterkopf lassen ' s Tauchen Sie ein in die Verfahren der diese Injektionsmethoden. Zunächst ist die intradermale Verwaltung-Technik. Dieser Vorgang muss bei narkotisierten Tieren durchgeführt werden. Ein weiteres video in dieser Auflistung zu verstehen, die Verfahren zur Induktion der Anästhesie und Wartung zu überprüfen.

Sobald das Tier betäubt ist, Rasieren Sie die Injektionsstelle mit einen elektrischen Rasierapparat oder einer Enthaarungscreme. Entfernen Sie mit Wasser angefeuchtet Mull die verbleibende Haare gründlich von der Website. Dann, mit einem anderen Gaze-Pad, wenden Sie eine topische antiseptische Lösung auf den rasierten Bereich an. Für die Verwaltung zuerst stabilisieren Sie ter Haut an der Injektionsstelle durch zwischen Daumen und Zeigefinger dehnen.

Legen Sie nun die Nadel Fase oben auf der Haut und sanft gleich hinter der Abschrägung einsetzen, so dass die Öffnung zwischen der Epidermis und der Dermis-Schichten. Dann injizieren Sie langsam zu, und beachten Sie, dass es eine Blase in der Haut bildet. Wenn die Nadel zu tief eingeführt wird, werden keine Blase gebildet. Innehalten Sie nach der Injektion und lassen Sie die Haut zu dehnen und anzupassen, und dann zurückziehen Sie die Nadel langsam. Ziehen Sie nicht zurück auf den Kolben zu jeder Zeit, wie Sie Sie das Gewebe ziehen und Trauma an der Injektionsstelle verursachen. Auch nicht abwischen oder Beflecken der Injektionsstelle, wie dadurch die eingespritzte Substanz austreten kann. Wenn Sie mehrere Injektionen durchführen, achten Sie darauf, ihnen neben Raum breit genug, so dass die Blebs nicht mit einander überlappen.

als nächstes lassen Sie ' s lernen die intranasale Verabreichung Verfahren bei bewussten und narkotisierten Tieren.

Für wach Tiere bändigen sie durch scruffen die Haut an den Nacken und halten Sie dann das Tier in einer senkrechten Position mit dem Kopf immobilisiert. Achten Sie darauf, nicht die Brust verengen, dass das Tier behindern könnte ' s Fähigkeit, ausreichend tiefe Atemzüge, die Flüssigkeit in die Lunge zu ziehen. Mit einer Mikropipette, Teil der Lösung verwalten Sie indem Sie einen kleinen Tropfen der Flüssigkeit auf die nasale Öffnung. Das Tier wird das Tröpfchen einatmen. Wiederholen Sie diesen Vorgang, der Wechsel zwischen den beiden Nasenöffnungen bis das gesamte Volumen verabreicht werden gegeben hat. Erinnern - das Gesamtvolumen der Verwaltung sollte nicht mehr als 24 μl und 100 μl in Mäusen und Ratten, bzw..

Für narkotisierten Mäuse und Ratten, positionieren Sie das Tier dorsal liegen. Diese Position ist ideal für CNS-Lieferung, da es für eine bessere Aufnahme der Verbindung ermöglicht. Drehen Sie das Tier ' s den Kopf und die Hälfte der Verbindung direkt in eine Seite der nasalen Öffnung, timing es mit Inhalation zu verwalten. Dann drehen Sie das Tier ' Kopf, für die nächste Regierung zu positionieren. Verwalten Sie nach 2 Atemzüge oder so das restliche Volumen in die zweite nasale Öffnung. Nach komplette Verwaltung kehren die Tiere zurück zu seinen Käfig.

als nächstes lassen Sie ' s der intrakraniellen Verwaltung Überprüfungsverfahren für Neugeborene Mäuse und Ratten . Vor Beginn des Verfahrens, legen Sie den Käfig mit den Welpen und den Damm auf einer elektrischen Heizung Pad Set zu niedrig. Stellen Sie sicher, dass ein Teil des Käfigs aus das Heizkissen. Dies ist die Unterkühlung zu verhindern und zur gleichen Zeit erlauben den Damm vor der Hitze zu bewegen, wenn sie begehrt. Wählen Sie als nächstes eine Nadelstärke für das Alter des Tieres geeignet. Rückruf, der Nadelabstand; Nadel-Länge, die verwendet wird, um die Tiefe der Nadel während der intrakraniellen Injektion zu steuern; und das Volumen der Verwaltung... alle variieren mit Tier ' s Alter und Art.

Die Länge passt sich mit einer Wache. Zur Vorbereitung dieser Wächter, messen die richtige Nadel mit Schutzkappe und machen Sie eine Markierung. Dann geben Sie eine zweite Markierung auf die Kappe, um anzugeben, wo es geschnitten wird. Der Abstand zwischen den beiden Markierungen ist die gewünschte Nadel Länge. Dann schneiden Sie die Kappe mit einer Rasierklinge. Verwenden Sie Schere nicht, da sie die Kappe zu vernichten und einen saubere Ebenen Schnitt nicht produzieren. Dies ist die " Nadel Wache. " entsorgen die Nadel für die Erstellung der Guard verwendet, da es nicht mehr steril ist und stattdessen eine neue Nadel in die Wache und sicherzustellen, dass die richtige Länge ausgesetzt ist. Als nächstes zeichnen Sie mit einer anderen Nadel befestigt an der geeigneten Spritze, die Injektion Substanz. Eine andere Nadel wird dazu verwendet, da Platzierung in den Stopfen ist nicht ideal für intrakranielle Verwaltung deutlich diese feine g-Nadeln, dull. Dann setzen Sie die gefüllte Spritze auf der Nadel mit der Wache. Jetzt ist das System bereit für eine Injektion.

Für Welpen über 10 Tage alt, Inhalation Narkose verabreichen. Jünger als 10 Tage alten Welpen brauchen nicht betäubt werden. Um die Injektion durchzuführen, suchen Sie zuerst die Website, die 5 mm hinter dem Auge und ca. 3 mm von der Mittellinie des Schädels. Als nächstes stechen Sie die Nadel in die Tiefe der Nadelschutz ermöglichte. Dann Spritzen Sie in einer langsamen stetigen Weise Trauma des Gehirns zu vermeiden. Entfernen Sie die Nadel sofort und mit großer Sorgfalt zum Schutz vor Verletzungen auf das Hirngewebe. Zu guter Letzt legen Sie Tier hinten in den Damm, um richtige Erholung zu ermöglichen.

nun ' s überprüfen einige Experimente in Laboren heute, die diese ungewöhnlichen Verabreichungsarten nutzen.

Eine intradermale Injektion wird oft verwendet, um entzündliche Reaktion der Haut zu studieren. In diesem Experiment verwendeten die Forscher diese Methode ein Allergen in einem Ohr und eine neutrale Substanz in das gegenüberliegende Ohr bereits sensibilisierten Mausklick zu injizieren. Als nächstes sie lieferten einen blauen Farbstoff in das Tier ' s Herz-Kreislauf-System, die Änderungen im vaskulären Permeabilität durch Allergen Injektion zu untersuchen.

, Wie bereits erwähnt, gehört zu den Anwendungen der intranasale Verabreichung, Impfstoffe zu verwalten. Hier Wissenschaftler diese Route verwendet, um eine gentechnisch veränderte, live abgeschwächten Grippe-Impfstoff in den Wildtyp und transgenen Mäusen und studierte Schleimhaut Immunität über die Produktion eines bestimmten Typs von T-Zellen zu liefern.

Verwendet schließlich diese biomedizinische Forschungen intrakraniellen Verwaltung, um Krebszellen bei immungeschwächten Mäusen zu implantieren, um ein menschliches Gehirn-Tumor-Modell zu schaffen. Die Wirksamkeit der Injektion wurde dann mit einer in-vivo imaging-System analysiert.

Sie haben Jus sah Jupiter ' s-video auf einige der speziellen Methoden der zusammengesetzten Verwaltung bei Mäusen und Ratten. Sie sollten jetzt verstehen, wenn diese Verfahren sind hilfreich, die Überlegungen sollten Sie nicht vergessen vor und während der Durchführung dieser Techniken und die wesentlichen Verfahrensschritte zu gewährleisten, dass die Verwaltung hat nur minimale Auswirkungen auf das Tier ' s Gesundheit und auf die experimentellen Daten gesammelt werden. Wie immer, vielen Dank für das Ansehen von!

Summary

die Verwaltung von Verbindungen in Tiere kann eine erhebliche Wirkung auf sowohl das Wohlbefinden des Tieres und die Ergebnisse der experimentellen Daten und wissenschaftlichen Wert haben. Die richtige Methode der Lieferung ist entscheidend für den Erfolg des Experiments. Viele Faktoren müssen berücksichtigt werden, um die beste Route, einschließlich das wissenschaftliche Ziel der Studie, der pH-Wert des Stoffes, das gewünschte Dosiervolumen, die Viskosität des Stoffes und das Wohlergehen der Tiere zu bestimmen. Technisches Know-how ist auch eine Voraussetzung für alle Injektionsmethoden.

References

  1. Turner, P.V., Pekow, C., Vasbinder, M. A., and Brabb, T. 2011. Administration of substances to laboratory animals: equipment and considerations, vehicle selection, and solution preparation. JAALAS. 50: 614-627.
  2. Dhuria, S.V., Hanson, L.R., and Frey II, W.H. 2010. Intranasal delivery to the central nervous system: mechanisms and experimental considerations. Journal of Pharmaceutical Sciences. 99: 1654-1673.
  3. Stevens, J., Suidgeest, E, Van der Graaf, P.H., Danhof, M., and De Lange, E.C. 2008. Development and evaluation of a new, minimal-stress animal model for intranasal administration in freely moving rats. Poster presentation at American Association of Pharmaceutical Scientists Annual Meeting, Atlanta, Georgia.
  4. Morton, D.A., Jennings, M., Buckwell, A., Ewbank, R., Godfrey, C., Holgate, B., Inglis, I., James, R., Page, C., Sharman, I., Verschoyle, R., Westall, L., and Wilson, A.B. 2001. Refining procedures for the administration of substances Report of the BVAAWF/FRAME/RSPCA/UFAW Joint Working Group on Refinement. Members of the Joint Working Group on Refinement. Laboratory Animals. 35: 1-41.

1. intradermale Verabreichung

  1. die intradermale Injektionen sind wässrige-basierte Verbindungen. Die Lösungen müssen physiologisch gepuffert werden, um einen neutralen pH-Wert haben zur Vermeidung von Gewebsnekrosen an der Injektionsstelle.
  2. Der Nadel Größenbereich ist 25-30 Gauge, die kleinstmögliche.
  3. Der Dosisbereich Pro Injektionsstelle ist 50-100 µL. Gatterschalters übermäßige Mengen können dazu führen, dass Nekrosen an der Injektionsstelle oder Leckage der Verbindung von der Seite durch Druck.
  4. Für die genaue Platzierung der Nadel in die intradermale Raum, es ist notwendig, um Mäuse und Ratten zu betäuben. Inhalation Anästhesie ermöglicht eine schnelle Einarbeitung und Erholung; injizierbare Anästhesie hat jedoch den Vorteil der Bereitstellung von ausreichend Zeit für die Vorbereitung des Bereichs und Durchführung der Injektion. 1
  5. entfernen die Haare an der Einstichstelle durch den Einsatz einer Enthaarungscreme oder durch das Rasieren Bereich.
  6. Gründlich entfernen Sie jeglichen Rest enthaarende Creme oder Haare Schmutz.
  7. Ein aktuelles Antiseptikum, z. B. eine Jodlösung, Chlorhexidin-Lösung oder Alkohol anwenden.
  8. Verwaltungsverfahren
    1. spannen Sie die Haut straff zwischen Daumen und Zeigefinger. Dies sorgt für Stabilität auf der Haut Wenn die Nadelpositionierung.
    2. Legen Sie die Nadel Fase oben auf der Haut.
    3. Nadel sanft in die Haut zwischen der Epidermis und der Dermis. Die Nadel direkt hinter der Abschrägung.
    4. Spritzen die Substanz langsam. Injektion der Verbindung schafft eine Blase oder kleine Blase, in der Haut.
    5. Pause nach der Injektion, lassen Sie die Haut zu dehnen und anpassen, bevor die Nadel zurückziehen.
  9. Vorsichtsmaßnahmen
    1. auf den Kolben zurückziehen ist nicht notwendig.
    2. Wenn die Nadel, in den subkutanen Raum, keine Blase eingeführt wird bildet. Injektion zu tief führt eine subkutane Injektion.
    3. Vermeiden beflecken oder Abwischen der Gegend, da dies die Verbindung undicht aus der Injektionsstelle führen kann.
    4. Wenn Sie mehrere Injektionen durchführen, Raum sie damit die Blebs nicht überlappen.

Figure 1
Abbildung 1. Intradermale Injektion bei Mäusen.

2. intranasale Verabreichung

  1. Anlagen
    1. verwenden eine Micropipetting-Einheit-Pipette kalibriert werden kann, um eine genaue Volumen liefern.
    2. Einweg-Pipettenspitzen sollte verwendet werden, um Kreuzkontaminationen zu vermeiden. TB-Spritzen, stumpfe Nadeln und Schläuche können auch für die Dosierung verwendet werden.
    3. Total Injektionsvolumina für Ratten sollte nicht mehr als 40-100 µL und sollte in 6 bis 10 µL Tropfen gegeben werden. Bei Mäusen, die maximale Gesamtvolumen beträgt 24 µL, in 3 bis 4 µL Tropfen gegeben.
  2. Verwaltung in bewusste Tiere
    1. manuelle Zurückhaltung bei bewussten Tieren erfordert, dass der Kopf relativ unbeweglich, so dass die Pipettenspitze oder stumpfen Nadel nahe genug, um die Nasenlöcher, die Verbindung zu liefern platziert werden kann, aber nicht so nah stecken oder zerreißt das Nasengewebe.
    2. Das Tier zurückhalten und halten Sie ihn in eine vertikale Position.
    3. Stellen einen kleinen Tropfen einer flüssigen Substanz in die nasale öffnen. Das Tier sollte das Tröpfchen einatmen.
    4. Verwalten ein zusätzliches Volumen, Nasenlöcher abwechselnd, bis das gesamte Volumen gegeben hat.
    5. Bei der Verabreichung von größerer Mengen, ist es wichtig, nicht die Brust während Zurückhaltung verengen. Brust-Kompression behindert die Fähigkeit des Tieres, die Flüssigkeit in die Bronchien und Lungen zeichnen ausreichend tiefe Atemzüge zu nehmen.

Figure 2
Abbildung 2. Intranasale Verabreichung in bewusste Mäuse.

  1. Verwaltung im Unbewussten Tiere
    1. Using Inhalation Anästhetika ermöglicht ein immobilisierten Tier während der Ansatz und die Lieferung der Verbindung. Dies verhindert, dass das Tier beißen die Dosierausrüstung, den Verlust der Verbindung durch Rucken des Kopfes und der Schädigung des Tieres ' s Nasengewebe, Augen oder Haut. Das Tier ist auch weniger wahrscheinlich, snort und sprühen Sie die Verbindung aus den Nasenlöchern bei Verabreichung.
    2. Legen Sie das Tier in die Rückenlage. Die Position des Kopfes hat Einfluss auf die Platzierung der Lösung in die Nasenlöcher. Es hat sich gezeigt, dass die ideale Position für die CNS Lieferung mit dem Tier Rückenlage; Dies ermöglicht eine bessere Absorption. 2
    3. die Hälfte der Verbindung direkt in eine Seite der nasalen Öffnung, timing es mit Inhalation zu verwalten. Schalten Sie das Tier über.
    4. Wie oben beschrieben, Verwalten der anderen Hälfte des Volumens in die nasale Öffnung.

Figure 3
Abbildung 3. Intranasale Verabreichung im Unbewussten Mäuse.

3. intrakranielle Verabreichung bei neugeborenen Mäusen und Ratten

  1. Mäusen oder Ratten müssen für intrakranielle Injektionen betäubt.
-------
Maus Ratte
Alter (Tage) Nadel zu messen (g) Alter (Tage) Nadel messen (g)
0-729-300-5 27-29
7-14 27 5-1025-27
14-28 25 10-14 25
Alter (Tage) Nadel Länge (mm) Alter (Tage) Nadel Länge (mm)
0-7 2 0-42-3
7-1434-7 3
14-21 4 7 10 4
21-285 10-14 5
Alter (Tage) Volumen (µL) Alter (Tage) Volumen (µL)
0-5 < 20 1-3 < 20
6-20 < 60 4-10 < 60
20-28 < 100 11-14 < 100

Tabelle 1. Gauge Nadel, Nadel Länge und maximale Lautstärke von intrakraniellen Verwaltung gemäß Alter von Mäusen und Ratten. 4

  1. Anlagen
    1. bestimmen die richtige Nadel Manometer und maximale Lautstärke der Verwaltung gemäß Tabelle 1.
    2. Bereiten einen Nadelschutz vor das Tier betäuben.
      Hinweis: Die Injektion Tiefe der Nadel wird durch den Einsatz einer Wache gesteuert, die mit die Nadelschutzkappe erstellt wird.
      1. Die Garde, eine Nadel zu erstellen ist gegen die Nadelschutzkappe gemessen und eine Marke befindet sich auf der Kappe um anzugeben, wo zu schneiden. Der Schnitt sollte gemacht werden, so dass 2 bis 5 mm der Nadel werden ausgesetzt, wenn die Kappe auf den Nadel ersetzt wird.
      2. Die Länge der freiliegenden Nadel muss so lang sein, dringen in die Haut und Schädel, und die gewünschte Tiefe in das Gehirn zu erreichen.
      3. Die Nadellängen benötigt für Mäuse und Ratten sind in Tabelle 1 aufgeführt.
    3. Eine Heizquelle ist erforderlich, um Unterkühlung in die Welpen zu verhindern. Es gibt verschiedene Arten: ein elektrisches Heizkissen gesetzt auf Low, eine zirkulierende Wasser Decke oder eine wiederverwendbare chemische Reaktion Wärme Beutel.
  2. Zurückhaltung
    1. Maus und Ratte Welpen 10 Tage erfordern keine Anästhesie für dieses Verfahren. Zügeln sie manuell durch sie nur hinter dem Kopf halten und ziehen die Haut kaudal, leichten Druck über die Schultern.
    2. Anesthetize Welpen mehr als 10 Tage alt mit Isofluran Inhalation. Legen Sie eine Induktion Kammer auf eine Präzision Vaporizer oder eine Glasglocke mit einem Wattebausch, getränkt mit Isofluran. Sobald der Welpe immobilisiert ist, die Narkose ist wirksam für ca. 40 Sekunden die bietet genügend Zeit für die Injektion.
  3. Injektionstechnik
    1. ziehen die Substanz in die Spritze und die Kappe/Nadelführung über die Nadel legen.
    2. Das Injektionsvolumen empfohlen, da das maximale Volumen pro Neugeborenen Maus oder Ratte 100 µL beträgt und das Absetzer oder ältere Mäuse für bis zu 300 µL ist.
    3. In der Hirnrinde des Neugeborenen zu injizieren, stechen Sie die Nadel 5 mm hinter dem Auge, ca. 3 mm von der Mittellinie des Schädels.
    4. Die Absetzer Maus Injektionsstelle ist etwa auf halbem Weg zwischen dem Auge und Ohr und direkt an der Mittellinie.

Figure 4
Abbildung 4. Intrakranielle Verwaltung in Maus Pup.

manchmal verschiedene experimentelle Ansätze erfordern den Einsatz von weniger verwendeten Darreichungsformen zusammengesetzte bei Nagetieren. Intradermale, intranasale und intrakranielle sind drei solcher alternativen Routen, dass heute die biomedizinische Forscher im Labor verwenden.

Wie der Name schon sagt, intradermale liefert Verbindungen in den äußeren Schichten der Dermis. Intranasale setzt die Lösung in das Tier ' s Nasenlöchern. Und intrakraniellen beinhaltet das Einfügen der Nadelöhrs direkt in das Nagetier ' Gehirn s.

Fachausbildung ist wichtig, diese Verfahren erfolgreich durchführen. Hier, wir ' ll zeigen zunächst die Überlegungen für jede dieser Methoden und dann zeigen wir lernen die Techniken, die Ihnen hilft die Verfahren bei der Gewährleistung der Sicherheit des Tieres und Erfolg des Experiments.

lassen ' s beginnen mit der Diskussion über wenn diese Routen in der Regel beschäftigt sind und Dinge, die man sollten nicht vergessen bevor Sie beginnen, diese Techniken spezialisierte Verwaltung durchzuführen.

Die intradermale Injektionen werden verwendet, um einen Artikel zu liefern, in den Raum zwischen der Epidermis und der Dermis, die diese Route ist in der Regel für die Beurteilung der Entzündung, kutane Blut fließen Diagnostika oder allergische Reaktionen auf ein Antigen reserviert. Ähnlich wie bei anderen Strecken, sollten die intradermale Lösung auch vorbereitet werden mit Hilfe der sterilen Technik. Und es muss physiologisch gepuffert werden, um einen neutralen pH-Wert haben zur Vermeidung von Gewebsnekrosen an der Injektionsstelle. Ein Hub-Less System mit einem 25-30-Gauge-Nadel wird oft für diese Injektion verwendet. Dieses System hilft bei der Erhaltung der Volumen der Verwaltung, die im Bereich von 50-100 Mikroliter pro Injektionsstelle ist. Injektion von Überschuss kann dazu führen, Nekrose oder unerwünschte zusammengesetzte Leckage durch Druck.

Intranasale Route wird oft für lokale Übermittlung von Impfungen oder auch systemische abschwellende Spray und CNS Lieferung gewählt. Die Schleimhaut, die die Nasenhöhle Linien verfügt über ein reichhaltiges Angebot an Blutgefäßen und Nerven, die erlauben eine schnelle systemische Absorption und direkte Ausrichtung auf das ZNS. Dies ist eine nicht invasive Methode, die nur wenig Training und Geschick und einfache Ausstattung - ein kalibriertes Mikropipette und Einweg-Tips erfordert. Die Verwaltung Volumina für Ratten sollte 40-100 Mikroliter in 6-10 Mikroliter-Tropfen gegeben nicht überschreiten. Und bei Mäusen, die maximale Gesamtvolumen beträgt 24 Mikroliter in 3-4 Mikroliter-Tropfen gegeben.

Obwohl Anästhesie nicht für dieses Verfahren erforderlich ist, hat es einige Vorteile über intranasale Verabreichung in bewusste Tiere (1) erleichtert die richtige Platzierung der Verbindung in die Nasenlöcher, eine exakte Dosierung (2) verhindert, dass die Tier beißen die Dosierausrüstung 3) sorgt dafür, dass es keine Verletzungsgefahr für das Tier ' s Nasengewebe, Augen oder Haut durch Rucken des Kopfes und 4) Tier ist weniger wahrscheinlich, snort und sprühen Sie die Verbindung aus den Nasenlöchern bei Verabreichung.

Intrakranielle Injektionen bei Erwachsenen Mäusen und Ratten setzen den Gebrauch von stereotaktischen Ausrüstung, die in einem Video in beschrieben wird die " Essentials of Neuroscience " Sammlung. Die Ausrüstung sorgt für die richtige Positionierung und richtige Tiefe der Injektion. Hier konzentrieren wir uns auf intrakraniellen Lieferung bei neugeborenen Mäusen und Ratten, bei denen der Schädel ist dünn genug, um direkt durch sie injizieren, und möglicherweise zu empfindlich, um der stereotaktischen Gerät unterstützt. Die Hauptgründe für die Verwendung dieser Technik sind, CNS pharmakologische Wirkstoffe direkt in das ZNS zu liefern und die Auswirkungen, die über systemischen Weg begegnet zu vermeiden. Die Nadelstärke, Länge und Volumen der Verwaltung werden basierend auf die Art und das Alter der Welpen bestimmt. Beachten Sie, dass als das Tier ' s Alter erhöht, die Spurweite abnimmt, die erforderlichen Nadel Länge steigt, und die maximale empfohlene Verwaltung Volumen auch Erhöhungen.

mit diesen Hintergrundinformationen im Hinterkopf lassen ' s Tauchen Sie ein in die Verfahren der diese Injektionsmethoden. Zunächst ist die intradermale Verwaltung-Technik. Dieser Vorgang muss bei narkotisierten Tieren durchgeführt werden. Ein weiteres video in dieser Auflistung zu verstehen, die Verfahren zur Induktion der Anästhesie und Wartung zu überprüfen.

Sobald das Tier betäubt ist, Rasieren Sie die Injektionsstelle mit einen elektrischen Rasierapparat oder einer Enthaarungscreme. Entfernen Sie mit Wasser angefeuchtet Mull die verbleibende Haare gründlich von der Website. Dann, mit einem anderen Gaze-Pad, wenden Sie eine topische antiseptische Lösung auf den rasierten Bereich an. Für die Verwaltung zuerst stabilisieren Sie ter Haut an der Injektionsstelle durch zwischen Daumen und Zeigefinger dehnen.

Legen Sie nun die Nadel Fase oben auf der Haut und sanft gleich hinter der Abschrägung einsetzen, so dass die Öffnung zwischen der Epidermis und der Dermis-Schichten. Dann injizieren Sie langsam zu, und beachten Sie, dass es eine Blase in der Haut bildet. Wenn die Nadel zu tief eingeführt wird, werden keine Blase gebildet. Innehalten Sie nach der Injektion und lassen Sie die Haut zu dehnen und anzupassen, und dann zurückziehen Sie die Nadel langsam. Ziehen Sie nicht zurück auf den Kolben zu jeder Zeit, wie Sie Sie das Gewebe ziehen und Trauma an der Injektionsstelle verursachen. Auch nicht abwischen oder Beflecken der Injektionsstelle, wie dadurch die eingespritzte Substanz austreten kann. Wenn Sie mehrere Injektionen durchführen, achten Sie darauf, ihnen neben Raum breit genug, so dass die Blebs nicht mit einander überlappen.

als nächstes lassen Sie ' s lernen die intranasale Verabreichung Verfahren bei bewussten und narkotisierten Tieren.

Für wach Tiere bändigen sie durch scruffen die Haut an den Nacken und halten Sie dann das Tier in einer senkrechten Position mit dem Kopf immobilisiert. Achten Sie darauf, nicht die Brust verengen, dass das Tier behindern könnte ' s Fähigkeit, ausreichend tiefe Atemzüge, die Flüssigkeit in die Lunge zu ziehen. Mit einer Mikropipette, Teil der Lösung verwalten Sie indem Sie einen kleinen Tropfen der Flüssigkeit auf die nasale Öffnung. Das Tier wird das Tröpfchen einatmen. Wiederholen Sie diesen Vorgang, der Wechsel zwischen den beiden Nasenöffnungen bis das gesamte Volumen verabreicht werden gegeben hat. Erinnern - das Gesamtvolumen der Verwaltung sollte nicht mehr als 24 μl und 100 μl in Mäusen und Ratten, bzw..

Für narkotisierten Mäuse und Ratten, positionieren Sie das Tier dorsal liegen. Diese Position ist ideal für CNS-Lieferung, da es für eine bessere Aufnahme der Verbindung ermöglicht. Drehen Sie das Tier ' s den Kopf und die Hälfte der Verbindung direkt in eine Seite der nasalen Öffnung, timing es mit Inhalation zu verwalten. Dann drehen Sie das Tier ' Kopf, für die nächste Regierung zu positionieren. Verwalten Sie nach 2 Atemzüge oder so das restliche Volumen in die zweite nasale Öffnung. Nach komplette Verwaltung kehren die Tiere zurück zu seinen Käfig.

als nächstes lassen Sie ' s der intrakraniellen Verwaltung Überprüfungsverfahren für Neugeborene Mäuse und Ratten . Vor Beginn des Verfahrens, legen Sie den Käfig mit den Welpen und den Damm auf einer elektrischen Heizung Pad Set zu niedrig. Stellen Sie sicher, dass ein Teil des Käfigs aus das Heizkissen. Dies ist die Unterkühlung zu verhindern und zur gleichen Zeit erlauben den Damm vor der Hitze zu bewegen, wenn sie begehrt. Wählen Sie als nächstes eine Nadelstärke für das Alter des Tieres geeignet. Rückruf, der Nadelabstand; Nadel-Länge, die verwendet wird, um die Tiefe der Nadel während der intrakraniellen Injektion zu steuern; und das Volumen der Verwaltung... alle variieren mit Tier ' s Alter und Art.

Die Länge passt sich mit einer Wache. Zur Vorbereitung dieser Wächter, messen die richtige Nadel mit Schutzkappe und machen Sie eine Markierung. Dann geben Sie eine zweite Markierung auf die Kappe, um anzugeben, wo es geschnitten wird. Der Abstand zwischen den beiden Markierungen ist die gewünschte Nadel Länge. Dann schneiden Sie die Kappe mit einer Rasierklinge. Verwenden Sie Schere nicht, da sie die Kappe zu vernichten und einen saubere Ebenen Schnitt nicht produzieren. Dies ist die " Nadel Wache. " entsorgen die Nadel für die Erstellung der Guard verwendet, da es nicht mehr steril ist und stattdessen eine neue Nadel in die Wache und sicherzustellen, dass die richtige Länge ausgesetzt ist. Als nächstes zeichnen Sie mit einer anderen Nadel befestigt an der geeigneten Spritze, die Injektion Substanz. Eine andere Nadel wird dazu verwendet, da Platzierung in den Stopfen ist nicht ideal für intrakranielle Verwaltung deutlich diese feine g-Nadeln, dull. Dann setzen Sie die gefüllte Spritze auf der Nadel mit der Wache. Jetzt ist das System bereit für eine Injektion.

Für Welpen über 10 Tage alt, Inhalation Narkose verabreichen. Jünger als 10 Tage alten Welpen brauchen nicht betäubt werden. Um die Injektion durchzuführen, suchen Sie zuerst die Website, die 5 mm hinter dem Auge und ca. 3 mm von der Mittellinie des Schädels. Als nächstes stechen Sie die Nadel in die Tiefe der Nadelschutz ermöglichte. Dann Spritzen Sie in einer langsamen stetigen Weise Trauma des Gehirns zu vermeiden. Entfernen Sie die Nadel sofort und mit großer Sorgfalt zum Schutz vor Verletzungen auf das Hirngewebe. Zu guter Letzt legen Sie Tier hinten in den Damm, um richtige Erholung zu ermöglichen.

nun ' s überprüfen einige Experimente in Laboren heute, die diese ungewöhnlichen Verabreichungsarten nutzen.

Eine intradermale Injektion wird oft verwendet, um entzündliche Reaktion der Haut zu studieren. In diesem Experiment verwendeten die Forscher diese Methode ein Allergen in einem Ohr und eine neutrale Substanz in das gegenüberliegende Ohr bereits sensibilisierten Mausklick zu injizieren. Als nächstes sie lieferten einen blauen Farbstoff in das Tier ' s Herz-Kreislauf-System, die Änderungen im vaskulären Permeabilität durch Allergen Injektion zu untersuchen.

, Wie bereits erwähnt, gehört zu den Anwendungen der intranasale Verabreichung, Impfstoffe zu verwalten. Hier Wissenschaftler diese Route verwendet, um eine gentechnisch veränderte, live abgeschwächten Grippe-Impfstoff in den Wildtyp und transgenen Mäusen und studierte Schleimhaut Immunität über die Produktion eines bestimmten Typs von T-Zellen zu liefern.

Verwendet schließlich diese biomedizinische Forschungen intrakraniellen Verwaltung, um Krebszellen bei immungeschwächten Mäusen zu implantieren, um ein menschliches Gehirn-Tumor-Modell zu schaffen. Die Wirksamkeit der Injektion wurde dann mit einer in-vivo imaging-System analysiert.

Sie haben Jus sah Jupiter ' s-video auf einige der speziellen Methoden der zusammengesetzten Verwaltung bei Mäusen und Ratten. Sie sollten jetzt verstehen, wenn diese Verfahren sind hilfreich, die Überlegungen sollten Sie nicht vergessen vor und während der Durchführung dieser Techniken und die wesentlichen Verfahrensschritte zu gewährleisten, dass die Verwaltung hat nur minimale Auswirkungen auf das Tier ' s Gesundheit und auf die experimentellen Daten gesammelt werden. Wie immer, vielen Dank für das Ansehen von!

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