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15.3:

์žฌ์กฐํ•ฉ DNA

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Recombinant DNA

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15.3:

์žฌ์กฐํ•ฉ DNA

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๊ณผํ•™์ž๋“ค์€ ์‹คํ—˜์‹ค์—์„œ ๋‹ค๋ฅธ ์ถœ์ฒ˜, ๋‹ค๋ฅธ ์ข…์˜ DNA๋ฅผ ๊ฒฐํ•ฉํ•˜์—ฌ ์žฌ์กฐํ•ฉ DNA(recombinant DNA)๋ฅผ ๋งŒ๋“ญ๋‹ˆ๋‹ค. DNA ํด๋กœ๋‹(DNA cloning)์€ ๊ณผํ•™์ž๋“ค์ด ๋ฐ•ํ…Œ๋ฆฌ์•„์™€ ๊ฐ™์ด ์‰ฝ๊ฒŒ ์กฐ์ž‘ํ•  ์ˆ˜ ์žˆ๋Š” ์„ธํฌ์— ์œ ์ „์ž๋ฅผ ์‚ฝ์ž…ํ•ด ํŠน์ •ํ•œ ์œ ์ „์ž๋ฅผ ์—ฐ๊ตฌํ•  ์ˆ˜ ์žˆ๊ฒŒ ํ•ด์ค๋‹ˆ๋‹ค. ์žฌ์กฐํ•ฉ DNA๋ฅผ ํฌํ•จํ•˜๋Š” ์œ ๊ธฐ์ฒด๋Š” ์œ ์ „์ž ๋ณ€ํ˜• ์œ ๊ธฐ์ฒด๋กœ ์•Œ๋ ค์ ธ ์žˆ์Šต๋‹ˆ๋‹ค. ์žฌ์กฐํ•ฉ DNA ๊ธฐ์ˆ ์€ ๊ณผํ•™, ์˜ํ•™, ๊ทธ๋ฆฌ๊ณ  ๋†์—…์— ๋„์›€์ด ๋  ์ˆ˜ ์žˆ๋Š” ์ƒˆ๋กœ์šด ์œ ์ „์ž๋ฅผ ๊ฐ€์ง„ ์œ ๊ธฐ์ฒด๋ฅผ ์ƒ์‚ฐํ•ฉ๋‹ˆ๋‹ค.

๊ณผํ•™์ž๋“ค์€ ์–ด๋–ป๊ฒŒ ์žฌ์กฐํ•ฉ DNA๋ฅผ ๋งŒ๋“ค ์ˆ˜ ์žˆ์Šต๋‹ˆ๊นŒ?

์žฌ์กฐํ•ฉ DNA์˜ ์ƒ์„ฑ์€ DNA ๋ณต์ œ์™€ ๋‹จ๋ฐฑ์งˆ ๋ฐœํ˜„์„ ์œ„ํ•ด ์™ธ๋ž˜ DNA๋ฅผ ์ˆ™์ฃผ ์„ธํฌ๋กœ ์šด๋ฐ˜ํ•˜๋Š” ๋งค๊ฐœ์ฒด์ธ ๋ฒกํ„ฐ(vector)์— ๊ด€์‹ฌ ์œ ์ „์ž(gene of interest)๋ฅผ ์‚ฝ์ž…ํ•ด ์ด๋ฃจ์–ด์ง‘๋‹ˆ๋‹ค. ๊ฐ€์žฅ ์ผ๋ฐ˜์ ์œผ๋กœ ์‚ฌ์šฉ๋˜๋Š” ํด๋กœ๋‹ ๋ฒกํ„ฐ๋Š” ์ˆ™์ฃผ์˜ ์—ผ์ƒ‰์ฒด DNA์™€ ๋…๋ฆฝ์ ์œผ๋กœ ๋ณต์ œ๋˜๋Š” ์ž‘์€ ์›ํ˜• DNA ์กฐ๊ฐ์ธ ํ”Œ๋ผ์Šค๋ฏธ๋“œ์ž…๋‹ˆ๋‹ค.

์žฌ์กฐํ•ฉ DNA๋ฅผ ๋งŒ๋“ค๊ธฐ ์œ„ํ•ด ๊ด€์‹ฌ ์œ ์ „์ž๋ฅผ ํฌํ•จํ•œ ๊ณต์—ฌ DNA(donor DNA)์™€ ๋ฒกํ„ฐ๋ฅผ ์ œํ•œ ํšจ์†Œ(restriction enzyme)๋ฅผ ์‚ฌ์šฉํ•˜์—ฌ ์ œํ•œ ๋ถ€์œ„(restriction site)๋ผ๋Š” ํŠน์ • ๋‰ดํด๋ ˆ์˜คํƒ€์ด๋“œ ์„œ์—ด(nucleotide sequence)์—์„œ ์ ˆ๋‹จํ•ฉ๋‹ˆ๋‹ค. ์ด์–ด์„œ DNA ์—ฐ๊ฒฐํšจ์†Œ(DNA ligase)๋ฅผ ์‚ฌ์šฉํ•ด ๊ด€์‹ฌ ์žˆ๋Š” ์œ ์ „์ž์™€ ํ”Œ๋ผ์Šค๋ฏธ๋“œ๊ฐ€ ์—ฐ๊ฒฐ๋˜๋Š” ๋‹น-์ธ์‚ฐ ๋ผˆ๋Œ€๋ฅผ ๋ด‰ํ•ฉํ•ฉ๋‹ˆ๋‹ค.

๊ทธ ๊ฒฐ๊ณผ, ์žฌ์กฐํ•ฉ DNA ๋ถ„์ž๋Š” ์‚ฝ์ž…์ฒด(insert; ์ธ์„œํŠธ)๋ผ๊ณ  ๋ถˆ๋ฆฌ๋Š” ๊ณต์—ฌ DNA ์กฐ๊ฐ์ด ๊ฒฐํ•ฉํ•œ ๋ฒกํ„ฐ๋กœ ๊ตฌ์„ฑ๋ฉ๋‹ˆ๋‹ค. ๊ทธ๋Ÿฐ ๋‹ค์Œ ๊ณผํ•™์ž๋“ค์€ ์ด ํ˜ผํ•ฉ DNA ๋ถ„์ž๋ฅผ ์ˆ™์ฃผ ์œ ๊ธฐ์ฒด(์ผ๋ฐ˜์ ์œผ๋กœ ๋ฐ•ํ…Œ๋ฆฌ์•„๋‚˜ ํšจ๋ชจ)์— ๋„์ž…ํ•˜์—ฌ ์‰ฝ๊ณ  ๋น ๋ฅด๊ฒŒ ๋ณต์ œํ•  ์ˆ˜ ์žˆ์Šต๋‹ˆ๋‹ค. ์ด๊ฒƒ์€ ๊ณผํ•™ ์—ฐ๊ตฌ์™€ ๋‹ค๋ฅธ ์‘์šฉ ๋ถ„์•ผ์— ํ•„์š”ํ•œ ๊ด€์‹ฌ ์œ ์ „์ž์˜ ๋งŽ์€ ์‚ฌ๋ณธ์„ ๋งŒ๋“ญ๋‹ˆ๋‹ค. ๋˜ํ•œ ์ˆ™์ฃผ๋ฅผ ์ด์šฉํ•ด ์ด ์œ ์ „์ž๋ฅผ ์ธ๊ฐ„์˜ ์ธ์Š๋ฆฐ๊ณผ ๊ฐ™์€ ์›ํ•˜๋Š” ๋‹จ๋ฐฑ์งˆ๋กœ ์ „์‚ฌ(transcription)ํ•˜๊ณ  ๋ฒˆ์—ญ(translation)ํ•  ์ˆ˜ ์žˆ์Šต๋‹ˆ๋‹ค.

์žฌ์กฐํ•ฉ DNA๋ฅผ ๋งŒ๋“œ๋Š” ๊ฒƒ์€ ๋ถˆ์™„์ „ํ•œ ๊ณผ์ •์ด๋ฉฐ ์ข…์ข… ์˜ค๋ฅ˜๊ฐ€ ๋ฐœ์ƒํ•ฉ๋‹ˆ๋‹ค. ์˜ˆ๋ฅผ ๋“ค์–ด, ์‚ฝ์ž…์ฒด ์—†์ด ๋ฒกํ„ฐ๊ฐ€ ๋‹ซํžˆ๊ฑฐ๋‚˜ ์‚ฝ์ž…์ฒด๊ฐ€ ์ •ํ™•ํ•˜์ง€ ์•Š์„ ์ˆ˜ ์žˆ์Šต๋‹ˆ๋‹ค(์˜ˆ: ๊ฑฐ๊พธ๋กœ ์‚ฝ์ž…). ๋”ฐ๋ผ์„œ ์ถ”๊ฐ€์ ์ธ ์—ฐ๊ตฌ๋ฅผ ์œ„ํ•ด ์žฌ์กฐํ•ฉ DNA๋ฅผ ์‚ฌ์šฉํ•˜๊ธฐ ์ „์— ์˜ค๋ฅ˜๋ฅผ ํ™•์ธํ•ด์•ผ ํ•ฉ๋‹ˆ๋‹ค. ๋‰ดํด๋ ˆ์˜คํƒ€์ด๋“œ ์„œ์—ด๋ถ„์„(nucleotide sequencing)์€ ์˜ฌ๋ฐ”๋ฅธ ์‚ฝ์ž…์ฒด๋ฅผ ๊ฐ€์ง„ ํ”Œ๋ผ์Šค๋ฏธ๋“œ๋ฅผ ํฌํ•จํ•˜๋Š” ๋ฐ•ํ…Œ๋ฆฌ์•„ ์ง‘๋ฝ(colony)์„ ์‹๋ณ„ํ•˜๋Š” ๋ฐ ๋„์›€์ด ๋  ์ˆ˜ ์žˆ์Šต๋‹ˆ๋‹ค.

๊ณผํ•™์ž๋“ค์€ ์œ ์ „์ž์™€ ๋‹จ๋ฐฑ์งˆ์„ ์—ฐ๊ตฌํ•˜๊ธฐ ์œ„ํ•ด ์žฌ์กฐํ•ฉ DNA๋ฅผ ์‚ฌ์šฉํ•ฉ๋‹ˆ๋‹ค

์žฌ์กฐํ•ฉ DNA ๊ธฐ์ˆ ์€ ๊ด€์‹ฌ ์žˆ๋Š” ์œ ์ „์ž๋‚˜ ๋‹จ๋ฐฑ์งˆ ์ƒ์„ฑ๋ฌผ์˜ ๋งŽ์€ ์‚ฌ๋ณธ์ด ํ•„์š”ํ•  ๋•Œ ํŠนํžˆ ์œ ์šฉํ•ฉ๋‹ˆ๋‹ค. ๊ทธ๋Ÿฌ๋‚˜ ์–ด๋–ค ์—ฐ๊ตฌ์—๋Š” ์›ํ•˜๋Š” ๋‹จ๋ฐฑ์งˆ์˜ ๊ฒ€์ถœ์ด๋‚˜ ์ •์ œ(purification) ๊ฐ™์€ ๋ณด๋‹ค ๋ณต์žกํ•œ ์‹คํ—˜์„ ์ถ”๊ฐ€ํ•ด์•ผํ•  ์ˆ˜๋„ ์žˆ์Šต๋‹ˆ๋‹ค. ์ด๋ฅผ ์œ„ํ•ด์„œ ์œ ์ „์ž ์ƒ์„ฑ๋ฌผ์„ ์‹๋ณ„ํ•˜๋Š” ๋ฐ ์‚ฌ์šฉ๋˜๋Š” ๋‹จ๋ฐฑ์งˆ์ธ ํ‘œ์ง€ ๋‹จ๋ฐฑ์งˆ(protein tag)์ด๋‚˜ ๋ฆฌํฌํ„ฐ(reporter)๋ฅผ ์›ํ•˜๋Š” ๋‹จ๋ฐฑ์งˆ์— ๋ถ€์ฐฉํ•˜์—ฌ ์œตํ•ฉ ์œ ์ „์ž(fusion gene) ๋˜๋Š” ํ‚ค๋ฉ”๋ฆญ ์œ ์ „์ž(chimeric gene)๋ฅผ ๋งŒ๋“ค ์ˆ˜ ์žˆ์Šต๋‹ˆ๋‹ค.

์˜ํ•™ ๋ฐ ๋†์—… ๋ถ„์•ผ์—์„œ์˜ ์‘์šฉ

๊ณผํ•™์ž๋“ค์€ ์ฒ˜์Œ์— ๋ฐ•ํ…Œ๋ฆฌ์•„์—์„œ ์ธ์Š๋ฆฐ์„ ์ƒ์‚ฐํ•˜๊ธฐ ์œ„ํ•ด ์žฌ์กฐํ•ฉ DNA ๊ธฐ์ˆ ์„ ์‚ฌ์šฉํ–ˆ๊ณ , ๊ทธ ๊ฒฐ๊ณผ ๋‹น๋‡จ๋ณ‘์„ ์น˜๋ฃŒํ•  ์ˆ˜ ์žˆ์—ˆ์Šต๋‹ˆ๋‹ค. ์ด ์ตœ์ดˆ ๋ฐœ๊ฒฌ ์ดํ›„, ๊ณผํ•™์ž๋“ค์€ ์น˜๋ฃŒ ๋ชฉ์ ์œผ๋กœ ๋‹ค๋ฅธ ์žฌ์กฐํ•ฉ DNA๋ฅผ ๋งŒ๋“ค์–ด๋ƒˆ์Šต๋‹ˆ๋‹ค. ์žฌ์กฐํ•ฉ ๋ฐ•ํ…Œ๋ฆฌ์•„๋Š” ์„ฑ์žฅ ํ˜ธ๋ฅด๋ชฌ ๊ฒฐํ• ํ™˜์ž๋ฅผ ์น˜๋ฃŒํ•˜๊ธฐ ์œ„ํ•ด ์ •์ƒ์ ์ธ ์„ฑ์žฅ๊ณผ ๋ฐœ์œก์— ํ•„์š”ํ•œ ๋‹จ๋ฐฑ์งˆ์ธ ์ธ๊ฐ„ ์„ฑ์žฅ ํ˜ธ๋ฅด๋ชฌ์„ ๋งŒ๋“ญ๋‹ˆ๋‹ค. ์ธ๊ฐ„๊ณผ ํ–„์Šคํ„ฐ์—์„œ ํŒŒ์ƒ๋œ ์žฌ์กฐํ•ฉ ํฌ์œ ๋ฅ˜ ์„ธํฌ๋Š” ํ˜ˆ์šฐ๋ณ‘ ํ™˜์ž๋ฅผ ์น˜๋ฃŒํ•˜๋Š” ๋ฐ ํ•„์š”ํ•œ ๋‹จ๋ฐฑ์งˆ์ธ VIII์ธ์ž๋ฅผ ์ƒ์‚ฐํ•ฉ๋‹ˆ๋‹ค. ์žฌ์กฐํ•ฉ DNA ๊ธฐ์ˆ ์€ ํ•„์ˆ˜ ๋‹จ๋ฐฑ์งˆ์˜ ๋Œ€๊ทœ๋ชจ ์ƒ์‚ฐ์„ ์œ„ํ•œ ๊ฐ•๋ ฅํ•œ ๋„๊ตฌ์ž…๋‹ˆ๋‹ค.

์žฌ์กฐํ•ฉ DNA ๊ธฐ์ˆ ์„ ํ†ตํ•œ ๋†์—… ๋ฐœ์ „ ๋˜ํ•œ ์ธ๊ฐ„์˜ ์•ˆ๋…•์— ์˜ํ–ฅ์„ ๋ฏธ์นฉ๋‹ˆ๋‹ค. ์˜ˆ๋ฅผ ๋“ค์–ด, ์˜ฅ์ˆ˜์ˆ˜ ๋†๋ถ€๋“ค์€ ์œ ๋Ÿฝ์˜ฅ์ˆ˜์ˆ˜์ข€(European corn borer) ๋•Œ๋ฌธ์— ์ƒ๋‹นํ•œ ๋†์ž‘๋ฌผ ํ”ผํ•ด๋ฅผ ๋ณด์•˜์Šต๋‹ˆ๋‹ค. ์ด์— ๋Œ€์‘ํ•˜์—ฌ ๊ณผํ•™์ž๋“ค์€ ํ† ์–‘์— ์„œ์‹ํ•˜๋Š” ๋ฐ•ํ…Œ๋ฆฌ์•„ Bacillus thuringiensis (Bt)์—์„œ ์œ ์ „์ž๋ฅผ ๋ถ„๋ฆฌํ•ด ์˜ฅ์ˆ˜์ˆ˜์— ๋„์ž…ํ•ด ํ•ด์ถฉ์— ๊ฐ•ํ•œ ์˜ฅ์ˆ˜์ˆ˜๋ฅผ ๋งŒ๋“ค์—ˆ์Šต๋‹ˆ๋‹ค. Bacillus thuringiensis๋Š” ํŠน์ • ๊ณค์ถฉ์—๊ฒŒ๋Š” ๋…์„ฑ์ด ์žˆ๊ณ  ์ธ๊ฐ„, ์‹๋ฌผ, ๋˜๋Š” ๋‹ค๋ฅธ ๋™๋ฌผ์—๊ฒ ๋ฌดํ•ดํ•œ ๋‹จ๋ฐฑ์งˆ์„ ์ƒ์‚ฐํ•ฉ๋‹ˆ๋‹ค. ํ•ด์ถฉ์— ๊ฐ•ํ•œ Bt ์˜ฅ์ˆ˜์ˆ˜์˜ ๋„์ž…์€ ๋†์ž‘๋ฌผ์˜ ์ˆ˜ํ™•๋Ÿ‰์„ ๊ฐœ์„ ํ•˜๊ณ  ํ™”ํ•™ ๋†์•ฝ์˜ ์‚ฌ์šฉ์„ ์ค„์˜€์Šต๋‹ˆ๋‹ค. ์ด๋Ÿฌํ•œ ๋†์—…์—์„œ์˜ ์‘์šฉ์€ ์„ธ๊ณ„์ ์ธ ์‹๋Ÿ‰ ๊ณต๊ธ‰์˜ ์งˆ๊ณผ ์–‘์„ ํ–ฅ์ƒ์‹œํ‚ต๋‹ˆ๋‹ค.

Suggested Reading

Khan, Suliman, Muhammad Wajid Ullah, Rabeea Siddique, Ghulam Nabi, Sehrish Manan, Muhammad Yousaf, and Hongwei Hou. 2016. “Role of Recombinant DNA Technology to Improve Life.” International Journal of Genomics 2016. [Source]

Matsumura, Ichiro. 2015. “Why Johnny Can’t Clone: Common Pitfalls and Not so Common Solutions.” BioTechniques 59 (3): IV–XIII. [Source]