ΠΠΊΡΠΈΠ²Π½Ρ ΠΈΠ»ΠΈ Π²ΡΡΠ°ΠΆΠ΅Π½Ρ ΡΠΎΠ»ΡΠΊΠΎ Π³Π΅Π½Ρ, ΡΡΠ°Π½ΡΠΊΡΠΈΠ±ΠΈΡΠΎΠ²Π°Π½Π½ΡΠ΅ Π² Π ΠΠ-ΠΌΠ΅ΡΡΠ΅Π½Π΄ΠΆΠ΅Ρ (ΠΌΠ ΠΠ). Π’Π°ΠΊΠΈΠΌ ΠΎΠ±ΡΠ°Π·ΠΎΠΌ, ΡΡΠ΅Π½ΡΠ΅ ΠΌΠΎΠ³ΡΡ ΠΈΠ·Π²Π»Π΅ΠΊΠ°ΡΡ ΠΌΠ ΠΠ ΠΈΠ· ΠΊΠ»Π΅ΡΠΎΠΊ Π΄Π»Ρ ΠΈΠ·ΡΡΠ΅Π½ΠΈΡ ΡΠΊΡΠΏΡΠ΅ΡΡΠΈΠΈ Π³Π΅Π½ΠΎΠ² Π² ΡΠ°Π·Π»ΠΈΡΠ½ΡΡ ΠΊΠ»Π΅ΡΠΊΠ°Ρ ΠΈ ΡΠΊΠ°Π½ΡΡ . Π£ΡΠ΅Π½ΡΠΉ ΠΏΡΠ΅ΠΎΠ±ΡΠ°Π·ΡΠ΅Ρ ΠΌΠ ΠΠ Π² ΠΊΠΎΠΌΠΏΠ»Π΅ΠΌΠ΅Π½ΡΠ°ΡΠ½ΡΡ ΠΠΠ (ΠΊΠΠΠ) Ρ ΠΏΠΎΠΌΠΎΡΡΡ ΠΎΠ±ΡΠ°ΡΠ½ΠΎΠΉ ΡΡΠ°Π½ΡΠΊΡΠΈΠΏΡΠΈΠΈ. ΠΠΎΡΠΊΠΎΠ»ΡΠΊΡ ΠΌΠ ΠΠ Π½Π΅ ΡΠΎΠ΄Π΅ΡΠΆΠΈΡ ΠΈΠ½ΡΡΠΎΠ½ΠΎΠ² (Π½Π΅ΠΊΠΎΠ΄ΠΈΡΡΡΡΠΈΡ ΡΠ΅Π³ΠΈΠΎΠ½ΠΎΠ²) ΠΈ Π΄ΡΡΠ³ΠΈΡ Π½ΠΎΡΠΌΠ°ΡΠΈΠ²Π½ΡΡ ΠΏΠΎΡΠ»Π΅Π΄ΠΎΠ²Π°ΡΠ΅Π»ΡΠ½ΠΎΡΡΠ΅ΠΉ, ΠΊΠΠΠ, Π² ΠΎΡΠ»ΠΈΡΠΈΠ΅ ΠΎΡ Π³Π΅Π½ΠΎΠΌΠ½ΠΎΠΉ ΠΠΠ, ΡΠ°ΠΊΠΆΠ΅ ΠΏΠΎΠ·Π²ΠΎΠ»ΡΠ΅Ρ ΠΈΡΡΠ»Π΅Π΄ΠΎΠ²Π°ΡΠ΅Π»ΡΠΌ Π½Π°ΠΏΡΡΠΌΡΡ ΠΎΠΏΡΠ΅Π΄Π΅Π»ΡΡΡ Π°ΠΌΠΈΠ½ΠΎΠΊΠΈΡΠ»ΠΎΡΠ½ΡΡ ΠΏΠΎΡΠ»Π΅Π΄ΠΎΠ²Π°ΡΠ΅Π»ΡΠ½ΠΎΡΡΡ ΠΏΠ΅ΠΏΡΠΈΠ΄Π°, ΠΊΠΎΠ΄ΠΈΡΡΠ΅ΠΌΠΎΠ³ΠΎ Π³Π΅Π½ΠΎΠΌ.
cDNA ΠΌΠΎΠΆΠ΅Ρ Π±ΡΡΡ ΡΠ³Π΅Π½Π΅ΡΠΈΡΠΎΠ²Π°Π½ Π½Π΅ΡΠΊΠΎΠ»ΡΠΊΠΈΠΌΠΈ ΠΌΠ΅ΡΠΎΠ΄Π°ΠΌΠΈ, Π½ΠΎ ΠΎΠ±ΡΠΈΠΉ ΡΠΏΠΎΡΠΎΠ± Π·Π°ΠΊΠ»ΡΡΠ°Π΅ΡΡΡ Π² ΡΠΎΠΌ, ΡΡΠΎΠ±Ρ ΡΠ½Π°ΡΠ°Π»Π° ΠΈΠ·Π²Π»Π΅ΡΡ ΠΎΠ±ΡΡΡ Π ΠΠ ΠΈΠ· ΠΊΠ»Π΅ΡΠΎΠΊ, Π° Π·Π°ΡΠ΅ΠΌ ΠΈΠ·ΠΎΠ»ΠΈΡΠΎΠ²Π°ΡΡ ΠΌΠ ΠΠ ΠΎΡ Π±ΠΎΠ»Π΅Π΅ ΠΏΡΠ΅ΠΎΠ±Π»Π°Π΄Π°ΡΡΠΈΡ ΡΠΈΠΏΠΎΠ²- ΠΏΠ΅ΡΠ΅Π΄Π°ΡΠΈ Π ΠΠ (ΡΠ ΠΠ) ΠΈ ΡΠΈΠ±ΠΎΡΠΎΠΌΠ½ΠΎΠΉ (ΡΠ ΠΠ). ΠΡΠ΅Π»Π°Ρ ΡΡΠΊΠ°ΡΠΈΠΎΡΠΈΡΠ΅ΡΠΊΠ°Ρ ΠΌΠ ΠΠ ΠΈΠΌΠ΅Π΅Ρ ΠΏΠΎΠ»ΠΈ(Π) Ρ Π²ΠΎΡΡ β Π²Π΅ΡΠ΅Π½ΠΈΡΡ Π½ΡΠΊΠ»Π΅ΠΎΡΠΈΠ΄ΠΎΠ² Π°Π΄Π΅Π½ΠΈΠ½Π° β Π΄ΠΎΠ±Π°Π²Π»Π΅Π½Π½ΡΡ ΠΊ Π΅Π΅ 3′ ΠΊΠΎΠ½ΡΡ, Π² ΡΠΎ Π²ΡΠ΅ΠΌΡ ΠΊΠ°ΠΊ Π΄ΡΡΠ³ΠΈΠ΅ ΡΠΈΠΏΡ Π ΠΠ ΡΡΠΎΠ³ΠΎ Π½Π΅ Π΄Π΅Π»Π°ΡΡ. Π’Π°ΠΊΠΈΠΌ ΠΎΠ±ΡΠ°Π·ΠΎΠΌ, ΡΡΡΠΎΠΊΠ° Π½ΡΠΊΠ»Π΅ΠΎΡΠΈΠ΄ΠΎΠ² ΡΠΈΠΌΠΈΠ½Π° (ΠΎΠ»ΠΈΠ³ΠΎ-Π΄Ρ) ΠΌΠΎΠΆΠ΅Ρ Π±ΡΡΡ ΠΏΡΠΈΠΊΡΠ΅ΠΏΠ»Π΅Π½Π° ΠΊ ΡΡΠ±ΡΡΡΠ°ΡΡ, ΡΠ°ΠΊΠΎΠΌΡ ΠΊΠ°ΠΊ ΠΊΠΎΠ»ΠΎΠ½ΠΊΠ° ΠΈΠ»ΠΈ ΠΌΠ°Π³Π½ΠΈΡΠ½ΡΠ΅ Π±ΡΡΡ, ΠΊ ΡΠΏΠ΅ΡΠΈΠ°Π»ΡΠ½ΠΎ Π±Π°Π·ΠΎΠ²ΠΎΠΉ ΠΏΠ°ΡΠ΅ Ρ ΠΏΠΎΠ»ΠΈ(Π) Ρ Π²ΠΎΡΡΠ°ΠΌΠΈ ΠΌΠ ΠΠ. Π ΡΠΎ Π²ΡΠ΅ΠΌΡ ΠΊΠ°ΠΊ ΠΌΠ ΠΠ Ρ ΠΏΠΎΠ»ΠΈ(Π) Ρ Π²ΠΎΡΡ Π·Π°Ρ Π²Π°ΡΠ΅Π½, Π΄ΡΡΠ³ΠΈΠ΅ ΡΠΈΠΏΡ Π ΠΠ ΡΠΌΡΠ²Π°ΡΡΡΡ.
ΠΠ°Π»Π΅Π΅, ΠΎΠ±ΡΠ°ΡΠ½Π°Ρ ΡΡΠ°Π½ΡΠΊΡΠΈΠΏΡΠ°Π·Π° – ΡΠ΅ΡΠΌΠ΅Π½Ρ ΠΏΠΎΠ»ΠΈΠΌΠ΅ΡΠ°Π·Ρ ΠΠΠ ΠΈΠ· ΡΠ΅ΡΡΠΎΠ²ΠΈΡΡΡΠΎΠ² – ΠΈΡΠΏΠΎΠ»ΡΠ·ΡΠ΅ΡΡΡ Π΄Π»Ρ Π³Π΅Π½Π΅ΡΠ°ΡΠΈΠΈ ΠΊΠΠΠ ΠΈΠ· ΠΌΠ ΠΠ. Π’Π°ΠΊ ΠΊΠ°ΠΊ, ΠΊΠ°ΠΊ ΠΈ Π±ΠΎΠ»ΡΡΠΈΠ½ΡΡΠ²ΠΎ ΠΏΠΎΠ»ΠΈΠΌΠ΅ΡΠ°Π· ΠΠΠ, ΠΎΠ±ΡΠ°ΡΠ½Π°Ρ ΡΡΠ°Π½ΡΠΊΡΠΈΠΏΡΠ°Π·Π° ΠΌΠΎΠΆΠ΅Ρ Π΄ΠΎΠ±Π°Π²ΠΈΡΡ Π½ΡΠΊΠ»Π΅ΠΎΡΠΈΠ΄Ρ ΡΠΎΠ»ΡΠΊΠΎ ΠΊ 3 ‘ΠΊΠΎΠ½Π΅Ρ ΡΠ΅ΠΏΠΈ, ΠΏΠΎΠ»ΠΈ (T) Π³ΡΡΠ½ΡΠΎΠ²ΠΊΠ° Π΄ΠΎΠ±Π°Π²Π»ΡΠ΅ΡΡΡ, ΡΡΠΎΠ±Ρ ΡΠ²ΡΠ·Π°ΡΡ Ρ ΠΏΠΎΠ»ΠΈ (A) Ρ Π²ΠΎΡΡ, ΡΡΠΎΠ±Ρ ΠΎΠ±Π΅ΡΠΏΠ΅ΡΠΈΡΡ ΠΎΡΠΏΡΠ°Π²Π½ΡΡ ΡΠΎΡΠΊΡ Π΄Π»Ρ ΡΠΈΠ½ΡΠ΅Π·Π° ΠΊΠΠΠ. Π¦Π΅ΠΏΡ cDNA Π·Π°ΠΊΠ°Π½ΡΠΈΠ²Π°Π΅ΡΡΡ Π² ΠΏΠ΅ΡΠ»Π΅ ΡΠΏΠΈΠ»ΡΠΊΠΈ. Π ΠΠ Π·Π°ΡΠ΅ΠΌ Π΄Π΅Π³ΡΠ°Π΄ΠΈΡΡΠ΅Ρ, ΠΊΠ°ΠΊ ΠΏΡΠ°Π²ΠΈΠ»ΠΎ, ΠΏΡΠΈ ΡΠ΅Π»ΠΎΡΠ½ΠΎΠΉ ΠΎΠ±ΡΠ°Π±ΠΎΡΠΊΠ΅ ΠΈΠ»ΠΈ ΠΎΠ±ΡΠ°Π±ΠΎΠΊΠ΅ RNase ΡΠ΅ΡΠΌΠ΅Π½ΡΠΎΠ², ΠΎΡΡΠ°Π²Π»ΡΡ ΠΎΠ΄Π½ΠΎΡΠ΅ΠΏΠΎΡΠ΅ΡΠ½ΡΡ ΠΊΠΠΠ Π½Π΅ΡΡΠΎΠ½ΡΡΠΎΠΉ.
ΠΡΠΎΡΠ°Ρ ΡΠ΅ΠΏΡ ΠΠΠ Π΄ΠΎΠΏΠΎΠ»Π½ΡΠ΅Ρ cDNA Π·Π°ΡΠ΅ΠΌ ΡΠΈΠ½ΡΠ΅Π·ΠΈΡΡΠ΅ΡΡΡ ΠΏΠΎΠ»ΠΈΠΌΠ΅ΡΠ°Π·Ρ ΠΠΠ-ΡΠ°ΡΡΠΎ Ρ ΠΏΠΎΠΌΠΎΡΡΡ ΡΠΏΠΈΠ»ΡΠΊΠΈ ΠΏΠ΅ΡΠ»ΠΈ ΠΏΠ΅ΡΠ²ΠΎΠΉ ΡΠ΅ΠΏΠΈ cDNA ΠΈΠ»ΠΈ Π·Π°ΠΈΠΌΡΡΠ²ΠΎΠ²Π°Π½Π½ΡΠΌ ΡΡΠ°ΡΡΠΊΠΎΠΌ ΠΌΠ ΠΠ Π² ΠΊΠ°ΡΠ΅ΡΡΠ²Π΅ ΠΏΡΠ°ΠΉΠΌΠ΅ΡΠ°.
Π ΡΠ΅Π·ΡΠ»ΡΡΠ°ΡΠ΅ Π΄Π²ΡΡ ΠΌΠ΅ΡΡΠ½ΡΠΉ ΠΊΠΠΠ ΠΌΠΎΠΆΠ΅Ρ Π±ΡΡΡ Π²ΡΡΠ°Π²Π»Π΅Π½ Π² Π±Π°ΠΊΡΠ΅ΡΠΈΠ°Π»ΡΠ½ΡΠ΅ ΠΈΠ»ΠΈ Π²ΠΈΡΡΡΠ½ΡΠ΅ Π²Π΅ΠΊΡΠΎΡΡ ΠΈ ΠΊΠ»ΠΎΠ½ΠΈΡΠΎΠ²Π°Π½ Ρ ΠΈΡΠΏΠΎΠ»ΡΠ·ΠΎΠ²Π°Π½ΠΈΠ΅ΠΌ ΡΡΠ°Π½Π΄Π°ΡΡΠ½ΡΡ ΠΌΠ΅ΡΠΎΠ΄ΠΎΠ² ΠΌΠΎΠ»Π΅ΠΊΡΠ»ΡΡΠ½ΠΎΠΉ Π±ΠΈΠΎΠ»ΠΎΠ³ΠΈΠΈ. ΠΠΈΠ±Π»ΠΈΠΎΡΠ΅ΠΊΠ° cDNA, ΠΏΡΠ΅Π΄ΡΡΠ°Π²Π»ΡΡΡΠ°Ρ Π²ΡΠ΅ ΠΌΠ ΠΠ Π² ΠΊΠ»Π΅ΡΠΊΠ°Ρ ΠΈΠ»ΠΈ ΡΠΊΠ°Π½ΡΡ , ΠΏΡΠ΅Π΄ΡΡΠ°Π²Π»ΡΡΡΠΈΡ ΠΈΠ½ΡΠ΅ΡΠ΅Ρ, ΡΠ°ΠΊΠΆΠ΅ ΠΌΠΎΠΆΠ΅Ρ Π±ΡΡΡ ΠΏΠΎΡΡΡΠΎΠ΅Π½Π° Π΄Π»Ρ Π΄ΠΎΠΏΠΎΠ»Π½ΠΈΡΠ΅Π»ΡΠ½ΡΡ ΠΈΡΡΠ»Π΅Π΄ΠΎΠ²Π°Π½ΠΈΠΉ.
Pray, Leslie A. “The Biotechnology Revolution: PCR and the Use of Reverse Transcriptase to Clone Expressed Genes.” Nature Education 1, no. 1 (2008): 94. [Source]