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13.13:

Trasformazione batterica

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Bacterial Transformation

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– [Istruttore] La trasformazione batterica è un fenomeno grazie al quale i batteri assorbono DNA esogeno o DNA proveniente da fonti esterni alla cellula. Alcuni tipi di batteri si trasformano in modo naturale. Può anche essere indotta in laboratorio come parte del processo di clonaggio di DNA. Un punto di partenza importante per studiare le sequenze e le funzioni dei geni e delle proteine che essi codificano. Affinché possa avvenire la trasformazione, i batteri devono essere adeguati. Ciò significa che devono avere il macchinario molecolare per trasportare frammenti di DNA nella loro parete e membrana cellulare o che siano stati trattati chimicamente per rendere le pareti cellulari permeabili al DNA. In laboratorio la sequenza di DNA di interesse è inserita in un plasmide, un filamento circolare di DNA. Il plasmide di solito contiene anche una sequenza come un gene di resistenza agli antibiotici che permette agli scienziati di schermare per la trasformazione i batteri che hanno ricevuto il plasmide. Ai batteri adeguati vengono aggiunte in un mezzo liquido molte copie del plasmide. Uno shock termico costringe i batteri a ricevere il DNA. I batteri vengono poi fatti crescere in mezzi di selezione concepiti per agevolare la crescita di alcuni tipi di batteri e l’inibizione alla crescita di altri. Nei mezzi di selezione sopravviveranno solo il batteri che producono copie del plasmide e che si moltiplicano fino a formare colonie, chiazze visibili di crescita batterica derivati da una singola cellula.

13.13:

Trasformazione batterica

Nel 1928, il batteriologo Frederick Griffith lavorò su un vaccino per la polmonite, che è causato dai batteri Streptococcus pneumoniae. Griffith ha studiato due ceppi di polmonite nei topi: uno patogeno e uno non patogeno. Solo il ceppo patogeno ha ucciso i topi ospiti.

Griffith fece una scoperta inaspettata quando uccise il ceppo patogeno e mischiò i suoi resti con il ceppo vivo e non patogeno. Non solo la miscela ha ucciso i topi ospiti, ma conteneva anche batteri patogeni viventi che producevano prole patogena. Griffith concluse che il ceppo non patogeno ricevette qualcosa dal ceppo patogeno morto che lo trasformò nel ceppo patogeno; lo ha definito il principio di trasformazione.

Al tempo degli studi di Griffith, c’era un acceso dibattito sull’identità del materiale genetico. Molte prime evidenze implicavano le proteine come molecole ereditarie. Gli esperimenti di Griffith sulla trasformazione batterica hanno fornito alcuni dei primi dati che dimostrano che il DNA è il materiale genetico.

I batteri incorporano il DNA esterno attraverso la trasformazione. La trasformazione avviene naturalmente, ma è anche indotta nei laboratori, spesso a clonare il DNA. Per clonare un gene specifico, gli scienziati possono inserire il gene in un plasmide, una molecola di DNA circolare in grado di replicarsi in modo indipendente. Il plasmide spesso contiene un gene di resistenza agli antibiotici. I batteri assumono il plasmide attraverso la trasformazione. Gli scienziati espongono quindi i batteri agli antibiotici. Le colonie batteriche sopravvissute dovrebbero contenere il plasmico perché il plasmide contiene un gene di resistenza agli antibiotici. L’analisi del DNA può confermare la presenza del gene nel plasmico. Le colonie batteriche con il gene desiderato si propagano e possono essere utilizzate per produrre più plasmidi o proteine.

Perché i batteri dovrebbero prendere nel DNA estraneo? A differenza degli organismi che riproducono sessualmente, i batteri essenzialmente si clonano. Questo metodo riproduttivo, chiamato fissione binaria, offre poche opportunità di variazione genetica. Sebbene le mutazioni introducano una certa diversità, molte mutazioni sono dannose. La condivisione dei geni attraverso la trasformazione, così come la coniugazione e la trasduzione, permette ai procarioti di evolversi.

Suggested Reading

Lerminiaux, Nicole A., and Andrew D.s. Cameron. 2019. “Horizontal Transfer of Antibiotic Resistance Genes in Clinical Environments.” Canadian Journal of Microbiology 65 (1): 34–44. [Source]

Sieber, Karsten B., Robin E. Bromley, and Julie C. Dunning Hotopp. 2017. “Lateral Gene Transfer between Prokaryotes and Eukaryotes.” Experimental Cell Research 358 (2): 421–26. [Source]