Hücrede, DNA replikasyonu her zaman replikasyon başlangıç noktası olarak adlandırılan DNA’daki belirli konumlarda başlar. Replikasyon başlangıcında, DNA helikaz enzimi, DNA zinciri boyunca bağlanıp hareket ederek DNA’nın sarımını çözer ve ayırır. DNA’nın ayrı zincirlerinin oluşturduğu Y şeklindeki yapı, iki dişli bir çatala benzer ve bir DNA replikasyon yeri halini alır.Bu nedenle, bu yapı replikasyon çatalı olarak bilinir. Bu ayrı tek zincirli DNA molekülleri, çift zincirli saç tokası halkaları oluşturmaya veya diğer zincirle tekrar sarılmaya eğilimlidir. Bunun olmasını önlemek için, Tek Zincir DNA Bağlayıcı proteinler tek bir DNA zincirine bağlanır ve geri sarılmayı engeller.Bu sayede, DNA’nın açığa çıkan tek zincirleri, tamamlayıcı yavru zincirlerin sentezi için şablon görevi görebilir.