Na célula, a replicação de DNA sempre se inicia em locais específicos no DNA chamado a origem da replicação. No início da replicação, a enzima DNA helicase liga e se move ao longo da fita de DNA, desenrolando e separando o DNA. A estrutura resultante em forma de Y formada pelas vertentes separadas do DNA parece uma bifurcação de dois fios e torna-se um local de replicação do DNA.Portanto, esta estrutura é conhecida como o garfo de replicação. Estas moléculas separadas únicas do DNA de encapsulado são propensas a formar laços duplos de hairpin trançado ou para rebobinar com a outra vertente. Para evitar que isto aconteça, as proteínas de ligação de DNA de uma vertente, ou SSB, ligam a um DNA isolado e inibem o enrolamento.Agora as únicas vertentes expostas do DNA podem agir como modelos para a síntese de vertentes complementares da filha.