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16.6:

Transformación bacteriana

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Molecular Biology
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JoVE Core Molecular Biology
Bacterial Transformation

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– [Instructor] La transformación bacteriana es un proceso por el cual las bacterias recolectan ADN exógeno. O ADN que viene de fuentes fuera de la célula. Algunas bacterias pueden sufrir transformación naturalmente. También puede ser inducida en entornos de laboratorio como parte del proceso de clonación de ADN. Un peldaño importante para estudiar la secuencia y funciones de genes y las proteínas que codifican. Para que ocurra la transformación las bacteria deben ser competentes. Lo que significa que ya sea que posean la maquinaria molecular para transportar fragmentos de ADN a través de la pared celular y la membrana celular, o han sido tratadas químicamente para hacer sus paredes celulares permeables al ADN. En el laboratorio la secuencia de ADN de interés se inserta en un plásmido que es una pieza circular de ADN. El plásmido típicamente también contiene una secuencia como un gen de resistencia antibiótica que le permite a los científicos examinar para transformación, la bacteria que recolectó el plásmido. Muchas copias del plásmido se agregan a bacterias competentes en un medio líquido. Y un choque de calor fuerza a la bacteria a recolectar el ADN Entonces las bacterias son crecidas en medio de seleción que está hecho de componentes que promueven el crecimiento de algunas bacterias, e inhibe el crecimiento de otras. Solo las bacterias que hicieron copias del plásmido sobrevivirán en el medio de selección, y se multiplican en colonias, puntos visibles de crecimiento bacterial que se derivan de una solo célula.

16.6:

Transformación bacteriana

En 1928, el bacteriólogo Frederick Griffith trabajó en una vacuna contra la neumonía, que es causada por la bacteria Streptococcus pneumoniae. Griffith estudió dos cepas de neumonía en ratones: una patógena y otra no patógena. Sólo la cepa patógena mató a los ratones hospedadores.

Griffith hizo un descubrimiento inesperado cuando mató la cepa patógena y mezcló sus restos con la cepa viva, no patógena. La mezcla no sólo mató a los ratones hospedadores, sino que también contenía bacterias patógenas vivas que producían descendencia patógena. Griffith concluyó que la cepa no patógena recibió algo de la cepa patógena muerta que la transformó en la cepa patógena; él llamó a esto el principio transformador.

En el momento de los estudios de Griffith, había un acalorado debate en torno a la identidad del material genético. Mucha evidencia temprana implicaba proteínas como las moléculas hereditarias. Los experimentos de Griffith sobre la transformación bacteriana proporcionaron algunos de los primeros datos que demuestran que el ADN es el material genético.

Las bacterias incorporan ADN externo a través de la transformación. La transformación ocurre naturalmente, pero también se induce en los laboratorios, a menudo para clonar ADN. Para clonar un gen específico, los científicos pueden insertar el gen en un plásmido, una molécula circular de ADN que puede replicarse de forma independiente. El plásmido a menudo contiene un gen de resistencia a los antibióticos. Las bacterias toman el plásmido a través de la transformación. Los científicos luego exponen las bacterias a antibióticos. Las colonias bacterianas supervivientes deben contener el plásmido porque el plásmido contiene un gen de resistencia a los antibióticos. El análisis de ADN puede confirmar la presencia del gen en el plásmido. Las colonias bacterianas con el gen deseado se propagan y se pueden utilizar para fabricar más plásmidos o proteínas.

¿Por qué las bacterias tomarían ADN extraño? A diferencia de los organismos que se reproducen sexualmente, las bacterias esencialmente se clonan a sí mismas. Este método reproductivo, llamado fisión binaria, ofrece pocas oportunidades para la variación genética. Aunque las mutaciones introducen cierta diversidad, muchas mutaciones son dañinas. Compartir genes a través de la transformación, así como la conjugación y la transducción, permite evolucionar a los procariotas.

Suggested Reading

Lerminiaux, Nicole A., and Andrew D.s. Cameron. 2019. “Horizontal Transfer of Antibiotic Resistance Genes in Clinical Environments.” Canadian Journal of Microbiology 65 (1): 34–44. [Source]

Sieber, Karsten B., Robin E. Bromley, and Julie C. Dunning Hotopp. 2017. “Lateral Gene Transfer between Prokaryotes and Eukaryotes.” Experimental Cell Research 358 (2): 421–26. [Source]