Мы представляем принципы кислорода измерения фосфоресценции закалки и анализа проекта порфирина основе дендритных наносенсоров для кислорода изображений в биологических системах.
Abstract
Кислород измерение фосфоресценции закалки [1, 2] состоит из следующих этапов: 1) датчик поставляется в среду интерес (например, крови или тканевой жидкости), 2) объект освещается светом соответствующей длины волны для возбуждения Расследование его триплетного состояния, 3) испускается фосфоресценции собирается, и его время курса анализируется для выхода фосфоресценции жизни, которая превращается в концентрации кислорода (или парциальное давление, PO<sub> 2</sub>). Датчик не должен взаимодействовать с биологической среды и в некоторых случаях быть 4) выделяется из среды при измерении завершения. Каждый из этих шагов накладывает требования на молекулярный дизайн фосфоресцирующих зондов, которые представляют собой инвазивные только компонент протокола измерений. Здесь мы рассмотрим дизайн дендритных фосфоресцирующих наносенсоров для измерения кислорода в биологических системах. Зонды состоят из Pt или Pd порфирина основе polyarylglycine (АГ) дендримеров, изменение периферического с полиэтиленгликоля (ПЭГ в) остатки. Для эффективного двухфотонного возбуждения, концы дендримеров могут быть изменены с двухфотонным хромофоров антенны, которые захватывают энергию возбуждения и направить его в триплетное ядра зондов через внутримолекулярной FRET (Ферстер Резонансная переноса энергии). Мы опишем ключевые фотофизических свойств зондов и представить подробные протоколы калибровки.
Protocol
1. Общая характеристика кислорода протокол измерений (Этот раздел не имеет каких-либо действий, но имеет решающее значение для понимания остальной части газеты. Это может быть снят, например, как последовательность нескольких слайдов в формате Power Point, сопровождаемый голо…
Acknowledgements
Поддержка гранты EB007279 и HL081273 от НИЗ США с благодарностью.
Sinks, L. E., Roussakis, E., Esipova, T. V., Vinogradov, S. A. Synthesis and Calibration of Phosphorescent Nanoprobes for Oxygen Imaging in Biological Systems. J. Vis. Exp. (37), e1731, doi:10.3791/1731 (2010).