使用Qiagen公司的小量制备试剂盒的细菌菌落纯化质粒DNA
Abstract
大肠杆菌质粒DNA纯化是分子克隆的核心技术。小规模小于5毫升细菌培养纯化（小量）为进一步酶促反应（聚合酶链反应和限制性内切酶消化），克隆验证或DNA分离的快捷方式。在这里，我们录像通过QIAGEN的QIAprep 8小量制备试剂盒小量的一般程序，旨在引进这种高效的技术，分子生物学技术的一般初学者。整个过程是基于碱裂解大肠杆菌细胞，在高盐存在的DNA吸附到硅。它包括三个步骤：）1，编制和结算的一种细菌裂解液，2）的DNA吸附到QIAprep膜，3）洗涤和质粒DNA洗脱。所有步骤都没有使用苯酚，氯仿，氯化铯，溴化乙锭，无酒精沉淀。它通常需要不到2个小时，以完成整个过程。
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Cite This Article
Zhang, S., Cahalan, M. D. Purifying Plasmid DNA from Bacterial Colonies Using the Qiagen Miniprep Kit. J. Vis. Exp. (6), e247, doi:10.3791/247 (2007).