Här beskriver vi ett detaljerat protokoll för granskning av samvaro i möss med hjälp av Crawley är sällskaplighet och preferens för sociala nyhetsgranskning. Vi beskriver fördelarna och möjliga tillämpningar för detta förfarande, inklusive kritiska detaljer viktigt för korrekt tolkning av resultaten.
Sociala interaktioner är en grundläggande och adaptiv del av biologin av många arter. Socialt erkännande är avgörande för struktur och stabilitet i de nätverk och relationer som definierar samhällen. För djur, t.ex. möss, får erkännande för artfränder vara viktigt för att upprätthålla sociala hierarkin och partnerval 1.
En mängd olika neuropsykiatriska sjukdomar kännetecknas av störningar i socialt beteende och socialt erkännande, inklusive depression, autism, bipolär sjukdom, tvångssyndrom sjukdomar och schizofreni. Studier av människor och djurmodeller (t.ex. Drosophila melanogaster, Caenorhabditis elegans, Mus musculus, Rattus norvegicus) har identifierat gener som är involverade i regleringen av sociala beteende 2. För att bedöma sociala biten i djurmodeller, flera beteendetester har utvecklats (över 3). Integrativ forskning med djurmodeller och lämpliga provningar för socialt beteende kan leda till utveckling av förbättrade behandlingar för social psychopathologies.
De tre kammare paradigm testa känd som Crawley är sällskaplighet och preferens för sociala nyhet protokollet har framgångsrikt används för att studera social tillhörighet och socialt minne i flera inavlade och muterade mus linjer (t.ex. 4-7). Huvudprincipen för detta test är baserat på det fria valet av ett ämne musen att tillbringa tid i någon av tre lådans miljön vid två experimentella sessioner, inklusive indirekta kontakt med en eller två möss som den är obekant. För att kvantifiera sociala tendenser av den experimentella musen, huvudsakliga uppgifter är att mäta en) tiden med ett nytt conspecific och b) preferens för en roman kontra en bekant conspecific. Således kan den experimentella utformningen av detta test utvärdering av två kritiska men urskiljbara aspekter av socialt beteende, såsom social tillhörighet / motivation, såväl som socialt minne och nyhet. "Sociala" i detta fall definieras som benägenheten att spendera tid med en annan mus, jämfört med tiden ensam i en identisk men tom kammare 7. "Preferens för sociala nyhet" definieras som benägenheten att spendera tid med en tidigare unencountered mus i stället för med en bekant musen 7. Detta test ger robusta resultat, som sedan måste noggrant analyseras, tolkas och stöds / bekräftas genom alternativa sociala kompetens tester. Förutom att vissa program kan Crawley är sällskaplighet testa ingå som en viktig del av allmänna beteende skärm av muterade möss.
Mus musculus är en social art som bedriver höga nivåer av ömsesidig social interaktion, kommunala kapsling, sexuell och föräldraskap beteenden, territoriella doft märkning och aggressiva beteenden 8-10. Flera tester har utvecklats för att undersöka sociala beteendestörningar hos möss (över 3). Här presenterar vi ett allmänt används test för att utvärdera samvaro hos möss. Crawley är sällskaplighet och preferens för sociala nyhetsgranskning utvecklades ursprungligen av Crawley och kollegor 7, 11. Det finns flera fördelar till de tre-kammare paradigm, som förbättrar uppgifternas tillförlitlighet för prövning av samvaro, social tillhörighet, socialt minne och önskemål, med liknande förfaranden. De viktigaste specificitet detta test är design som en mus, som tidigare unencountered av ämnet djur, är placerad under en tråd kopp och oförmögen att röra sig fritt. Detta förhindrar direkt fysisk kontakt, eliminera slåss och / eller aggressivt beteende men tillåter sensoriska interaktioner (lukt, syn, hörsel, smak). Under dessa förhållanden, initierar den experimentella musen och avslutar alla interaktioner, alltid ha ett val mellan obekanta mus vs tomma behållare (i session 1), eller mellan bekanta musen (Stranger 1) vs romanen musen (Stranger 2). Till exempel, i en kammare social interaktion tester är föremål musen utsätts för en främling i samma kammare, och eftersom både möss har möjlighet att röra sig fritt ovan nämnda aktiva fysisk kontakt tenderar att vara dominant och kan inte elimineras. De tre kammare apparaten är mycket större än en typisk enda kammare enhet, vilket gör att motivet musen för att stanna kvar i närheten av eller flytta långt bort från Stranger musen. Således är stressnivå i Crawley är sällskaplighet testa låga och mestadels orsakad genom att placera den experimentella musen till en ny miljö, som möjliggör upprepning av detta test över tid, till exempel vid olika åldrar i samma musen kohort: unga vs vuxen. Genom att jämföra en ung grupp djur med samma men äldre kohort, är det möjligt att följa upp och skilja mellan försämring av socialt erkännande vs socialt minne och / eller kognitiva funktionsnedsättningar, som kan observeras i Session 2, och vara relaterat till ålder- beroende fysiologi.
Detta test är relativt tidskrävande (~ 40 minuter per mus), vilket är en nackdel. Däremot kan flera repertoar av specifika parametrar övervakas och omkodas (manuellt och / eller video), som möjliggör robust analys. Till exempel kan en del av ytterligare parametrar, såsom frysning och / eller själv-grooming beteende, visar på ökad oro och minskad motivation för socialt beteende. Genom att använda samma protokoll, kan möss testas i nästa dag med samma Stranger 1 musen för att utesluta en effekt av social ångest. Ytterligare parametrar (såsom svans skrammel, bita av kabeln cup där Stranger 1 ligger) kan vara till hjälp för att skilja aggressiva mot ovanliga vänlighet beteende mot romanen djuret. Observerade ångest kan bero på olämpliga anpassning av möss att den experimentella rummet, för stark rumsbelysning, dålig mus hälsa, eller som ett resultat av genetisk modifiering och / eller neofobi (i vissa KO modeller). Dessutom kan nedsatt tillvänjning tolkas som en kognitiv störning, och kan påverka resultatet av andra sessionen. Innan utsätta möss till detta test är det viktigt att utsätta djur för allmän hälsa och neurologiska undersökningar, inklusive kroppstemperatur och vikt, päls undersökning och serien av följande reflex undersökningar: Whisker, Rätande, Öron-Twitch och nå och Key klingande ( beskrivs i 12-15). Ytterligare beteendevetenskaplig tester kan vara till hjälp för att diskriminera specifika svar. Ett ökat antal kontakter och / eller en ökning av den totala varaktigheten av aktiva kontakter kanske förknippas med hyperaktiva beteende specifika mus fläckar, som kan bekräftas genom att använda ett öppet fält test (för att mäta rörelseaktivitet). Minskad längd och / eller antal kontakter kan förknippas med depressiva och / eller ångest-liknande beteende, som kan utvärderas med hjälp av FST, TST eller EPM, noll-labyrint, ljus / mörker tester, respektive (som beskrivs i 6, 13 , 15).
När lämpliga villkor tillämpas och betydande observerade skillnaderna, finns det ett krav att utföra uppföljande prov, för att bekräfta resultaten. Luktsinnet spelar en viktig roll i socialt erkännande hos gnagare, eftersom varken kemiskt inducerad luktsinne eller borttagande av vomeronasala orgeln blocken enskilda erkännande 16, 17. Möss har en tendens att sniffa en roman lukt och sedan snabbt vänja sina nyhet. Luktbulben testet kan användas för detta ändamål (som beskrivs i 6, 7).
Det finns även modifieringar och alternativ användning av tre-kompartment kammare sällskaplighet test, såsom uppskattning av moderns beteende, genom att undersöka den tidutnyttjats av ett ämne kvinnlig proximalt en kopp med sina valpar (som avspeglar moderns motivation), samt sexuell motivation, genom att mäta effekten av en testad man / kvinna till en kvinnlig / manlig i kopp istället för Stranger 1 i session 1 7, 11.
Ytterligare tester kan användas för att undersöka samvaro i möss med användning av alternativa metoder / paradigm, t.ex. social interaktion i buren och / eller i en roman miljö (en kammare social interaktion test), bosatt inkräktare, partition test, socialt synsätt testa , ömsesidig social interaktion, etc (som beskrivs i 3, 18). Vocalizations i ultraljud och Sonic intervall, visuella, smak och taktila modaliteter kan också bidra till förmedling av information och sociala bindning (över 19).
Nedsatt sällskaplighet och oreglerad socialt beteende har varit inblandad som ett kännetecken för många psykiatriska sjukdomar. Till exempel är autism och schizofreni båda kännetecknas av markant underskott i social kognition och socialt beteende 20, och störningar i sociala relationer leder till en ökad risk för depression 21. Således kan de beskrivna här test användas i djurmodeller av ovannämnda villkor. Dessutom är detta test tillämpas för att bedöma eventuella effekter av farmakologiska föreningar på sällskaplighet (över 3, 22-24).
The authors have nothing to disclose.
OKB och JRW skrev manus. Detta arbete stöddes av CIHR bevilja MOP 74.711 (till JRW).
Material Name | Type | Company | Catalogue Number | Comment |
---|---|---|---|---|
Ethanol 70% (commercial Alcohols) | MSH | 19901 | ||
Clidox 1:5:1 Base Activator |
Pharmacal | 96130F 95130F |
1 part Base to 5 parts water to 1 part Activator |