Waiting
Login processing...

Trial ends in Request Full Access Tell Your Colleague About Jove
Click here for the English version

Biology

تنقية DNA البلازميد من المستعمرات البكتيرية باستخدام Miniprep Qiagen كيت

doi: 10.3791/247 Published: July 29, 2007

Summary

Abstract

تنقية البلازميد الحمض النووي من كولاي هو تقنية أساسية لالاستنساخ الجزيئي. تنقية صغيرة الحجم (miniprep) من أقل من 5 مل من ثقافة الجرثومي هو وسيلة سريعة للتحقق منها استنساخ الحمض النووي أو العزلة ، تليها ردود الفعل الأنزيمية أخرى (بوليميريز سلسلة من ردود الفعل وتقييد انزيم الهضم). هنا ، ونحن الفيديو المسجلة الإجراءات العامة من خلال miniprep QIAGEN في QIAprep كيت Miniprep 8 ، التي تهدف إلى إدخال هذه التقنية عالية الكفاءة للمبتدئين العامة لتقنيات البيولوجيا الجزيئية. ويستند هذا الإجراء كله على تحلل الخلايا القلوية كولاي تليها الامتزاز من الحمض النووي على السيليكا في وجود الملح العالية. وتتكون من ثلاث خطوات : 1) إعداد وتبادل المعلومات من lysate البكتيرية ، 2) الامتزاز من الحمض النووي على الغشاء QIAprep ، 3) الغسيل وشطف من الحمض النووي البلازميد. يتم تنفيذ كافة الخطوات دون استخدام الكلوروفورم ، والفينول ، CSCL ، إيثيديوم بروميد ، ودون هطول الأمطار الكحول. وعادة ما يستغرق أقل من 2 ساعة لإنهاء الإجراء بأكمله.

تنقية DNA البلازميد من المستعمرات البكتيرية باستخدام Miniprep Qiagen كيت
Play Video
PDF DOI

Cite this Article

Zhang, S., Cahalan, M. D. Purifying Plasmid DNA from Bacterial Colonies Using the Qiagen Miniprep Kit. J. Vis. Exp. (6), e247, doi:10.3791/247 (2007).More

Zhang, S., Cahalan, M. D. Purifying Plasmid DNA from Bacterial Colonies Using the Qiagen Miniprep Kit. J. Vis. Exp. (6), e247, doi:10.3791/247 (2007).

Less
Copy Citation Download Citation Reprints and Permissions
View Video

Get cutting-edge science videos from JoVE sent straight to your inbox every month.

Waiting X
Simple Hit Counter