Waiting
Login processing...

Trial ends in Request Full Access Tell Your Colleague About Jove
Click here for the English version

Biology

Очищающий плазмидной ДНК из бактериальных колоний Использование Qiagen Miniprep Kit

doi: 10.3791/247 Published: July 29, 2007

Summary

Abstract

Плазмиды очистки ДНК из E.coli, является одним из основных техника для молекулярного клонирования. Малый очистки шкале (miniprep) с менее чем 5 мл бактериальной культуры быстрый способ для проверки клона или выделения ДНК, после чего дальнейшее ферментативных реакций (полимеразной цепной реакции и пищеварение энзима ограничения). Здесь мы видеокассету общей процедуры miniprep через QIAprep QIAGEN в 8 Kit Miniprep, с целью введения этого высокоэффективный метод к общему для начинающих методов молекулярной биологии. Вся процедура основана на щелочных лизис клетки кишечной палочки последующей адсорбцией ДНК на кремнезема в присутствии высоких соли. Она состоит из трех этапов: 1) подготовка и очистка бактериальной лизат, 2) адсорбции ДНК на мембраны QIAprep, 3) мытье и элюирования плазмидной ДНК. Все действия выполняются без применения фенол, хлороформ, CsCl, бромистый этидий, и без алкоголя осадков. Обычно это занимает менее 2 часов, чтобы закончить всю процедуру.

Очищающий плазмидной ДНК из бактериальных колоний Использование Qiagen Miniprep Kit
Play Video
PDF DOI

Cite this Article

Zhang, S., Cahalan, M. D. Purifying Plasmid DNA from Bacterial Colonies Using the Qiagen Miniprep Kit. J. Vis. Exp. (6), e247, doi:10.3791/247 (2007).More

Zhang, S., Cahalan, M. D. Purifying Plasmid DNA from Bacterial Colonies Using the Qiagen Miniprep Kit. J. Vis. Exp. (6), e247, doi:10.3791/247 (2007).

Less
Copy Citation Download Citation Reprints and Permissions
View Video

Get cutting-edge science videos from JoVE sent straight to your inbox every month.

Waiting X
Simple Hit Counter