Waiting
Login processing...

Trial ends in Request Full Access Tell Your Colleague About Jove
Click here for the English version

Biology

Plazmid DNA Qiagen Miniprep Kit kullanarak Bakteri kolonileri Arındırıcı

doi: 10.3791/247 Published: July 29, 2007

Summary

Abstract

E. coli plazmid DNA arıtma moleküler klonlama için bir temel tekniktir. En az 5 ml bakteri kültürü Küçük ölçekli arıtma (miniprep) daha fazla enzimatik reaksiyonları (polimeraz zincir reaksiyonu ve restriksiyon enzimi sindirim) tarafından takip klon doğrulama ya da DNA izolasyonu, hızlı bir yoludur. Burada, moleküler biyoloji teknikleri için genel başlayanlar için bu son derece etkili bir tekniktir tanıtmak için amaçlayan QIAGEN QIAprep 8 Miniprep Kiti ile miniprep genel prosedürler, video kaydedildi. Tüm prosedürü yüksek tuz varlığı silika üzerine DNA adsorpsiyon takip E. coli hücrelerinin alkali lizis dayanır. 1) hazırlanması ve takas QIAprep membran, 3) yıkama ve plazmid DNA elüsyon üzerine DNA adsorpsiyon bakteriyel lizat, 2): Bu üç adımdan oluşur. Tüm adımlar, fenol, kloroform, CSCL, etidyum bromür, kullanmadan ve alkol yağış olmadan yapılmaktadır. Genellikle tüm prosedürü tamamlamak için en az 2 saat sürer.

Plazmid DNA Qiagen Miniprep Kit kullanarak Bakteri kolonileri Arındırıcı
Play Video
PDF DOI

Cite this Article

Zhang, S., Cahalan, M. D. Purifying Plasmid DNA from Bacterial Colonies Using the Qiagen Miniprep Kit. J. Vis. Exp. (6), e247, doi:10.3791/247 (2007).More

Zhang, S., Cahalan, M. D. Purifying Plasmid DNA from Bacterial Colonies Using the Qiagen Miniprep Kit. J. Vis. Exp. (6), e247, doi:10.3791/247 (2007).

Less
Copy Citation Download Citation Reprints and Permissions
View Video

Get cutting-edge science videos from JoVE sent straight to your inbox every month.

Waiting X
Simple Hit Counter