Den pluss-labyrint tiltak angst-lignende oppførsel hos gnagere. Det er to motsatte lukket og to motsatte åpne armer; engstelige gnagere unngå åpne armer. Det sentrale området er verken helt åpen eller lukket, slik at tid brukt her er tvetydig og vanskelig å tolke. Her er en modifikasjon av pluss-labyrint protokoll eliminere dette område, er beskrevet.
Pluss-labyrinten var avledet fra det tidlige arbeidet med Montgomery. Han observerte at rotter tendens til å unngå åpne armer av en labyrint, og foretrakk vedlagte seg. Handley, Mithani og File<em> Et al.</em> Utført de første studiene på pluss-labyrinten utforming vi bruker i dag, og i 1987 Lister publisert et design for bruk med mus. Tid brukt på, og oppføringer i de åpne armene er en indeks av angst, jo lavere disse indeksene, er mer engstelig musen. Alternativt er en mus som tilbringer mesteparten av sin tid i de lukkede armene klassifisert som engstelig. Ett av problemene med den pluss-labyrint er at, mens tiden som brukes på, og inn i oppføringer, er de åpne armer en ganske entydig mål på angst, er tid i det sentrale området vanskeligere å tolke, selv om tiden som brukes her har blitt klassifisert som "beslutningsprosesser". I mange tester sentrale området er en betydelig del av den totale testtiden. Shepherd<em> Et al.</em> Produsert en genial design for å eliminere det sentrale området, som de kalte "null labyrint". Men selv om brukes av flere grupper, har det aldri vært så omfattende bruk som pluss-labyrinten. I denne artikkel beskriver jeg en modifikasjon av pluss-labyrint design som eliminerer ikke bare det sentrale området, men også inneholder elementer fra andre angst tester, for eksempel lys-mørke boksen og tilsynekomst tester. Det er en lineær serie på fire smug, som hver har økende angstskapende egenskaper. Den har gitt lignende resultater til pluss-labyrint i sin alminnelighet. Selv om det ikke kan være mer følsomme enn pluss-labyrinten (mer data er nødvendig før en fast konklusjon kan nås på dette punktet), gir det en nyttig bekreftelse på pluss-labyrinten resultater som ville være nyttig når du for eksempel bare en enkelt eksempel på en mutant mus var tilgjengelig, som for eksempel i ENU-basert mutagenese programmer.
Den forhøyede pluss-labyrinten var avledet fra det tidlige arbeidet til Montgomery. 27. Han observerte at rotter tendens til å unngå åpne armer av en labyrint, og foretrakk vedlagte seg. Handley og Mithani, og File et al. 22,29 utført de første studiene på pluss-labyrinten utforming vi bruker i dag, og i 1987 Lister publisert et design for bruk med mus 25. Det er nå en standard analyse for angstdempende behandlinger 23, og flere protokoller har blitt publisert 36,24 http://www.jove.com/video/1088 ; http://currentprotocols.com/protocol/ph0538 .
Den forhøyede pluss-labyrint består av to motstående åpne og to motstående lukkede armer som skjærer et sentralt område, i form av en + i plan. Prosentvis tid brukt på, og prosentpoeng oppføringer i de åpne armene er en indeksav angst-lignende oppførsel, jo lavere disse indeksene, jo mer engstelig musen er. Alternativt er en mus som tilbringer mesteparten av sin tid i de lukkede armene klassifisert som engstelig.
Faktor analyse har vist at mens indekser av åpen arm aktivitet belastning tungt på en faktor utpekt som angst-lignende oppførsel, og lukkede arm oppføringer i stor grad gjenspeiler motorisk aktivitet, grensene mellom faktorene er ikke entydige, også andre faktorer som for eksempel leting, risikovurdering og beslutningsprosesser omfatter profilen til oppførsel på pluss-labyrinten, 12,32. Tid i det sentrale området er mer problematisk å tolke, selv om tidsbruk her har blitt klassifisert som "beslutningsprosesser" 32. Selv mus tilbringer mesteparten av sin tid i vedlagte armene, og relativt lite tid på de åpne armer, i mange studier mye tid er brukt i det sentrale området hvor armene delta. Selv om dette kan representere beslutningstaking 32, er det tvetydig i terms av angst-lignende oppførsel, selv om svært urolige mus kan forventes å unngå det sentrale området, så vel som de åpne armer. Et tidlig forsøk på å eliminere dette tvetydige sentrale området var å konstruere en sirkulær labyrint med to lukkede kvadranter som alternerer med to åpne seg 33. I denne "zero-labyrint" et dyr er entydig i et åpent (angstskapende) eller lukket (nonanxiogenic) sone. Men selv om brukes av flere grupper, har det aldri vært så omfattende bruk som pluss-labyrinten. I vårt laboratorium fant vi at mens pluss-labyrinten (og påfølgende smug) viste angstdempende effekter i hippocampus lesioned rotter, ble disse ikke sett på en null labyrint bygget akkurat sånn av Shepherd et al. 13.
Den påfølgende smug apparat ble derfor utviklet med det primære målet om å eliminere det sentrale området av pluss-labyrinten. Sekundært, var elementene i andre tester av angst-lignende oppførsel innarbeidet. Ved å startedyr i vedlagte smug 1, ble en fremvekst komponent innført, lik som i Stones "stovepipe" test 34. Fargen av alleer endringer fra svart (smug 1) gjennom grå (smug 2) til hvit (smug 3 og 4). Dette stammer fra observasjoner at mus foretrekker mørkere områder, som eksemplifisert i lys-mørke boksen test 11. Veggene i de påfølgende smugene også sakte nedgang i høyden, i motsetning til i pluss-labyrint hvor det er en brå overgang mellom høye murer og ingen vegger. Bredden av alleer avtar gradvis å gradvis øke eksponeringen av musen til den høye plasseringen av labyrinten, i konsert med gradvis reduksjon i høyden på veggen. Alle disse faktorer ble innlemmet i et forsøk på å øke følsomheten av testen og strekke seg over et bredere spekter av angst-lignende oppførsel enn pluss-labyrint gjør. Den suksessive smug apparat var et forsøk på å feste et bredere spekter av angst-lignende oppførsel grunnlinjene i samme way at de fire baseline betingelsene for sosial interaksjon test som opprinnelig utført av File 17 tillatelse påvisning av subtile modifikasjoner av angst-lignende oppførsel. Fil, i en studie av effekten av nikotin, så bare forskjeller i de to mellomliggende angst-lignende oppførsel forhold, ikke den høyeste eller laveste 20.
Samt pluss-labyrinten, en annen mye brukt test av angst-lignende oppførsel er lys-mørk boks 11. Resultater fra lys-mørke boksen og pluss-labyrinten ikke alltid korrelerer med hverandre 35. Det regnes nå som angst-lignende oppførsel er ikke et enhetlig fenomen 19. Den suksessive smug Testen kan derfor gi godt resultat forskjellig fra de som oppnås ved hjelp av lys-mørke boksen, og tenkes også fra pluss-labyrint, siden det er litt forskjellig fra den sistnevnte, men ville resultatene mellom den førstnevnte og den sistnevnte kan forventes å være stort sett det samme.
<p class="Jove_content"> Det har vist seg at gjentatt testing på pluss-labyrint endrer type angst observert. 8,21 Det kan være at utsette et dyr til pluss-labyrint etterfulgt av suksessive smug eliminerer endring i typen angst-lignende oppførsel måles dersom pluss-labyrint testen gjentas. Et eksempel på dette ble sett når pluss-labyrinten og påfølgende smug ble brukt til å teste medial prefrontal cortex-lesioned og kontroll mus i en timelig motvektstrucker måte. De lesioned mus viste betydelig lavere angst-lignende oppførsel i begge typer anordning, uavhengig av om testing fant sted med de suksessive smug eller pluss-labyrint første 15. Det er også mulig at sekvensiell bruk av pluss-labyrinten og påfølgende smugene kan bevare følsomheten til angstdempende legemidler sett når pluss-labyrinten testen gjentas. 18.Rotter kan også testes på en større versjon av de påfølgende smugene. Prosedyren er nøyaktig than samme som for mus.
Som i tilfellet av testing for hyponeophagia, antok man tidligere generell erfaring av dyrene, bortsett fra forhøyet labyrint angst-lignende oppførsel testing per se, kan påvirke resultatet. 1,16
I konklusjonen, produserer den påfølgende smug test generelt lignende resultater til pluss-labyrinten når lesjoner i hippocampus komplekse eller medial prefrontal cortex er gjort, men ytterligere arbeid er nødvendig for å vurdere virkningene av lesjoner i andre områder av hjernen antas å være relatert til angst -lignende oppførsel. Av og resultater på pluss-labyrinten skiller seg markant fra de i de påfølgende smug, et eksempel på dette er arbeidet med Kir6.2 KO mus 14. Da de ble testet på begge apparatene, det tillatt oss å vise at KO mus ikke viste en generell enveis endring i angst-lignende oppførsel, siden de brukte mer tid enn villtype mus på de åpne plus-labyrint armene (viser mindre angst -lignende atferd), men mer tid i smug en av de påfølgende smug (viser større angst-lignende oppførsel). Dermed kan kombineres bruk av pluss-labyrinten og påfølgende smug eliminere falske positive eller falske negative resultater, siden de to testene, selv omlignende, ikke er funksjonelt identiske.
Som i pluss-labyrint, betyr hyperaktivitet ikke føre til en ikke-selektiv økning i antall smug angitt. Studier har vist at organiseringen av atferd hos mus varierer uavhengig av aktivitet 28. Medial septal lesioned rotter, som ble vist å være markert hyperaktiv i en egen test i photobeam Activity Monitoring bur berre gav signifikant større oppføringer i smug 2 og 3;. Oppføringer i smug en og fire var ikke annerledes enn kontrollene 5 Så jo mindre engstelig septal lesioned rotter ble skytteltrafikk frem og tilbake mellom de to moderat angstskapende områder i de påfølgende smug, som viser hva apparatet er designet for å oppdage, dvs. deres posisjon på et spekter av angst. Hvis de hadde vært enda mindre engstelig, ville en økning i kryssinger mellom smugene 3 og 4 har blitt sett.
Andre bevis på at hyperaktivitet ikke fører til en falsk positiv i de påfølgende smugene testen er at rotter med dorsal hippocampus lesjoner er hyperaktiv, men viser ikke angstdempende effekter i de påfølgende smug 7. I en relatert test med lineær apparat, svart-hvitt smug test, GluRA KO hunnmus viser heller mer angst-lignende oppførsel enn kontrollene, mens menn er lik kontroller, men begge kjønn er markert hyperaktiv tre. Kir6.2 KO mus var mer aktive i sine hjem bur enn villtype mus, men viste les angst i de påfølgende smugene 14. Spesielt hoppet 8 KO mus eller falt av pluss-labyrinten, men ingen fra de påfølgende smug.
En begrensning av den påfølgende smugene test som i dag brukes er at, gitt varierende fargen på gulvet, ville video-sporingssystemer være vanskelig å bruke. Imidlertid kunne gulvet sannsynligvis males en ensartet farge som farge er bare en av faktorene ved den beskrevne anordningen som genererer angst.
nt "> Den påfølgende smug testen er lite sannsynlig, men ikke å lide av variabiliteten problemer forbundet med lignende ethologically baserte tester som pluss-labyrinten 10,23, men testing av en batch av dyr på begge oppgavene kan bidra til å avklare en mangelfulle pluss-labyrint test 30,31,37, en multippel-test tilnærming kan ha fordeler når du tester angst-lignende oppførsel.The authors have nothing to disclose.
The Wellcome Trust for å gi Open Access finansiering til Oxford University. Robert Deacon er medlem av Oxford OXION gruppen, finansiert av Wellcome Trust stipend WT084655MA.