De plus-labyrint foranstaltninger angst-lignende adfærd hos gnavere. Der er to modstående lukkede og to modstående åbne arme, ængstelige gnavere undgå de åbne arme. Det centrale område er hverken helt åben eller lukket, så tid brugt her er tvetydig og vanskelig at fortolke. Her er en modifikation af plus-labyrinten protokol eliminere dette område er beskrevet.
Plus-labyrinten blev afledt fra den tidlige arbejde Montgomery. Han bemærkede, at rotter havde tendens til at undgå de åbne arme af en labyrint, foretrækker de medfølgende dem. Handley, Mithani og File<em> Et al.</em> Udførte de første undersøgelser på plus-labyrint-design, vi bruger i dag, og i 1987 Lister offentliggjorde et design til brug med mus. Tidsforbrug på og poster i de åbne arme er et indeks for angst, lavere disse indeks, jo mere ængstelig musen er. Alternativt er en mus, der tilbringer det meste af sin tid i de lukkede arme klassificeret som ængstelige. Et af problemerne i den plus-labyrint er, at mens tiden brugt på, og tilgangen til de åbne arme er en forholdsvis entydig måling af angst, tid i det centrale område er mere vanskelige at fortolke, selvom tid brugt her er klassificeret som "beslutningstagning". I mange tests centrale område tid er en betydelig del af den samlede testtid. Shepherd<em> Et al.</em> Producerede et genialt design til at fjerne det centrale område, som de kaldte "nul labyrint". Men selv om der anvendes af flere grupper, har det aldrig været så udbredt som plus-labyrint. I denne artikel beskriver jeg en modifikation af plus-labyrinten design, der ikke kun fjerner det centrale område, men også indeholder elementer fra andre angst tests, såsom lys-mørke kasse og fremspiringstestene. Det er en lineær serie af fire baner, som hver har stigende anxiogene egenskaber. Det har givet lignende resultater til plus-labyrinten i almindelighed. Selv om det ikke kan være mere følsomme end plus-labyrint (flere data er nødvendige, før en endelig konklusion kan nås på dette punkt), det giver en nyttig bekræftelse af plus-labyrint resultater, som ville være nyttig, når for eksempel, kun enkelt eksempel på en mutant mus var tilgængelig, som for eksempel i ENU-baserede mutagenese programmer.
Den forhøjede plus-labyrint blev afledt fra den tidlige arbejde Montgomery. 27. Han bemærkede, at rotter tendens til at undgå de åbne arme af en labyrint, foretrækker de medfølgende dem. Handley og Mithani, og File et al. 22,29 udførte de første undersøgelser på plus-labyrint-design, vi bruger i dag, og i 1987 Lister offentliggjorde et design til brug med mus 25. Det er nu en standard assay for angstdæmpende behandlinger 23, og flere protokoller er blevet offentliggjort 36,24 http://www.jove.com/video/1088 ; http://currentprotocols.com/protocol/ph0538 .
Den forhøjede plus-labyrint består af to modstående åbne og to modstående lukkede arme skærer hinanden i et centralt område, i form af en + i planen. Procentvise tid brugt på, og procentvise angivelser i de åbne arme er et indeksangst-lignende adfærd, lavere disse indeks, jo mere ængstelig musen er. Alternativt er en mus, der tilbringer det meste af sin tid i de lukkede arme klassificeret som ængstelige.
Faktor analyse har vist, at mens indeks for åben arm aktivitet belastning tungt på en faktor, der er udpeget som angst-lignende adfærd, og lukkede arm poster afspejler i høj grad motorisk aktivitet, grænserne mellem faktorer er ikke endelige, også andre faktorer såsom udforskning, risikovurdering og beslutningstagning omfatter profilen af adfærd på plus-labyrint, 12,32. Tid i det centrale område er mere problematisk at fortolke, men tid brugt her er blevet klassificeret som "beslutningsproces" 32. Selvom mus bruger det meste af deres tid i de lukkede arme, og relativt lidt tid på de åbne arme, i mange undersøgelser meget tid der bruges i det centrale område, hvor armene deltage. Selv om dette kan repræsentere beslutningsproces 32, det er tvetydigt i terms af angst-lignende opførsel. selvom meget ængstelige mus kan forventes at undgå det centrale område samt de åbne arme En tidlig forsøg på at eliminere denne tvetydige centrale område var at konstruere en cirkulær labyrint med to lukkede kvadranter vekslende med to åbne dem 33.. I denne "zero-maze" et dyr er entydigt i en åben (anxiogent) eller en lukket (nonanxiogenic) zone. Men selv om der anvendes af flere grupper, har det aldrig været så udbredt som plus-labyrint. I vores laboratorium har vi fundet, at mens plus-labyrint (og efterfølgende stræder) viste angstdæmpende virkning i hippocampus læderede rotter, disse blev ikke set på et nul labyrint opbygget præcis som den, Shepherd et al. 13.
Den successive gyder apparat blev derfor udtænkt med det primære formål at imødegå den centrale område af plus-labyrinten. Sekundært blev elementer af andre tests for angst-lignende adfærd indarbejdet. Ved at startedyr i vedlagte alley 1 blev en fremkomsten komponent indført, der ligner den i Stones "stovepipe" test 34.. Farven på stræder skifter fra sort (gyde 1) gennem grå (alley 2) til hvid (stræder 3 og 4). Det stammer fra observationer, at mus foretrækker mørkere områder, som eksemplificeret i det lys-mørke box test 11.. Væggene i successive baner også langsomt aftage i højden, i modsætning til i plus-labyrint, hvor der er en brat overgang mellem høje mure og ingen vægge. Bredden af stræder gradvist aftager gradvist at øge eksponeringen af musen til den høje placering af labyrinten, i samråd med den gradvise nedgang i væg højde. Alle disse faktorer blev inkorporeret i et forsøg på at øge testens følsomhed og spænder over en bredere vifte af angst-lignende adfærd end den plus-labyrinten gør. Den successive baner apparat var et forsøg på at beslaget en bredere vifte af angst-lignende adfærd basislinjer i samme WAy at de fire grundlæggende betingelser for den sociale interaktion test, som oprindeligt udført af File 17 tillader påvisning af subtile ændringer af angst-lignende adfærd. Filer, i en undersøgelse af virkningerne af nikotin, så kun forskelle i de to mellemliggende angst-lignende adfærd betingelser, ikke den højeste eller laveste 20.
Samt plus-labyrint, en anden meget anvendt test af angst-lignende adfærd er lys-mørk boks 11.. Resultater fra lys-mørke box og plus-labyrinten korrelerer ikke altid med hinanden 35.. Det anses nu for at angst-lignende adfærd ikke er en enhedsstat fænomen 19.. Den successive baner Testen kan derfor godt give resultater anderledes til dem, der opnås ved hjælp af lys-mørke-kasse, og tænkes selv fra plus-labyrint, da det er diskret forskellig fra sidstnævnte, men ville resultater mellem førstnævnte og sidstnævnte forventes at være stort set ens.
<p class="Jove_content"> Det er blevet påvist, at gentagne test på plus-labyrinten ændrer typen af angst observeret. 8,21 Det kan være at udsætte et dyr til plus-labyrint efterfulgt af successive baner eliminerer ændring af typen af angst-lignende adfærd måles, hvis plus-labyrint testen. Et eksempel på dette blev set, da plus-labyrint og successive stræder blev brugt til at teste mediale præfrontale cortex-læderede og kontrol mus i en tidsmæssigt opvejet måde. De læderede mus udviste signifikant lavere angst-lignende adfærd i begge typer apparater, uanset om testning forekom med de successive baner eller plus-labyrint 15 første. Det er også muligt, at sekventiel brug af plus-labyrint og successive stræder kunne bevare følsomheden over for angstdæmpende medicin ses, når plus-labyrint-testen. 18.Rotter kan også blive testet på en større version af de successive stræder. Proceduren er præcis than samme som for mus.
Som i tilfælde af testning for hyponeophagia, forudgående generelle erfaring af dyrene, bortset fra forhøjet labyrint angst-lignende adfærd test per se, påvirker kan resultatet. 1,16
Som konklusion, de successive gyder testen giver generelt lignende resultater til plus-labyrint, når læsioner i hippocampus komplekse eller mediale præfrontale cortex er lavet, men yderligere arbejde er nødvendigt for at vurdere virkningerne af læsioner i andre hjerneområder menes at være relateret til angst -lignende adfærd. Indimellem resultater på plus-labyrinten adskiller sig markant fra dem i de forskellige stræder, et eksempel på dette er vores arbejde med Kir6.2 KO mus 14. Da de blev testet på begge apparater, det tilladt os at vise, at KO-mus ikke viste en generel ensrettet ændring i angst-lignende adfærd, da de har brugt mere tid end vildtype mus på de åbne plus-labyrint arme (viser mindre angst -lignende adfærd), men mere tid i gyde 1 af de successive stræder (viser en større angst-lignende adfærd). Således kan kombineret brug af plus-labyrint og successive stræder eliminere falsk positive eller falsk negative resultater, idet de to tests, selv omlignende, er ikke funktionelt identiske.
Som i plus-labyrint, ikke hyperaktivitet ikke fører til en ikke-selektiv stigning i antallet af indgåede baner. Undersøgelser har vist, at tilrettelæggelsen af adfærd i mus varierer uafhængigt af aktivitet 28.. Mediale septal læderede rotter, som viste sig at være markant hyperaktiv i en separat test i photobeam aktivitet overvågning bure viste kun signifikant større poster i stræder 2 og 3. Poster i stræder 1 og 4 var ikke anderledes til kontrolgruppen 5 Så mindre angst septal læderede rotter blev shuttling frem og tilbage mellem de to moderat anxiogene områder af de successive baner, der viser, hvad apparatet var designet til at detektere, dvs deres position på et spektrum af angst. Hvis de havde været endnu mindre ængstelig, ville en stigning i overfarter mellem stræder 3 og 4 er set.
Andre tegn på, at hyperaktivitet ikke fører til en falsk positiv i successive stræder testen er, at rotter med dorsal hippocampus læsioner er hyperaktive, men ikke viser angstdæmpende virkning i de successive stræder 7.. I en beslægtet test med lineær apparat, sort hvide gyde test viser GluRA KO hunmus lidt mere angst-lignende adfærd end kontrol, mens hannerne ligner kontrol, men begge køn er markant hyperaktive 3.. Kir6.2 KO mus var mere aktive i deres hjemlande bure end vildtypemus men viste les angst hos de successive stræder 14.. Især 8. KO mus sprang eller faldt fra plus-labyrint, men ingen fra de successive stræder.
En begrænsning ved den successive baner testen som i øjeblikket anvendes, er, at i betragtning af den varierende farven på gulvet, vil video-sporingssystemer være vanskeligt at bruge. Imidlertid kunne ordet sandsynligvis være malet en ensartet farve som farven er kun én af de faktorer i det apparat, der genererer angst.
nt "> Den successive stræder test er imidlertid usandsynligt, at ikke lider under de variabilitet problemer forbundet med lignende ethologically baserede tests såsom plus-maze 10,23, men teste et parti dyr på begge opgaver kan bidrage til at afklare et usikkert plus-labyrint test 30,31,37, en multiple-testtilgang kan have fordele ved afprøvning angst-lignende adfærd.The authors have nothing to disclose.
Wellcome Trust for at give Open Access midler til Oxford University. Robert Deacon er medlem af Oxford OXION gruppe, finansieret af Wellcome Trust tilskud WT084655MA.