在LookOut支原体PCR检测试剂盒采用聚合酶链反应(PCR),这是建立在培养的细胞和其他细胞培养派生生物制品的支原体,Acholeplasma,溶脲脲污染检测的灵敏度最高的首选方法。
维护无污染的细胞株的细胞为基础的研究是必不可少的。其中最大的污染物的关注是支原体污染。虽然支原体通常不杀死受污染的细胞,它们是难以察觉,并可能导致多种对体外培养的细胞,包括改变代谢的影响,减缓扩散和染色体畸变。总之,支原体污染损害这些细胞株的价值,为生命科学研究提供准确的数据。
在实验室中的支原体污染的来源是非常具有挑战性的完全控制。由于某些支原体种人的皮肤上发现,他们可以推出通过无菌操作技术差。此外,他们还可以来自污染的补充,如胎牛血清,最重要的是从其他污染的细胞培养。一旦支原体污染的文化,它可以迅速蔓延到其他地区的实验室污染。严格遵守良好实验室规范,如良好的无菌技术是关键,和常规支原体检测是非常成功的支原体污染的控制建议。
基于PCR检测支原体已成为一个非常流行的方法为例行的细胞株维护。基于PCR的检测方法是高度敏感,并能提供快速的结果,这使研究人员能够迅速做出反应,隔离和消除污染,一旦检测时间比较需要使用微生物技术。望风支原体PCR检测试剂盒是高度敏感的,用μL的基因组只有2%的检出限。非常具体的JumpStart的Taq DNA聚合酶和专有的引物设计的优势,大大降低了误报。方便的8管格式,带钢预涂与dNTPs,以及相关的引物有助于提高吞吐量,以满足客户的需求与细胞系的更大的集合。
鉴于该工具包的极端敏感性,必须采取非常谨慎,以防止不慎污染样品和试剂。一步一步的协议,我们将演示突出了可靠的支原体检测所需的预防措施和做法。我们还展示和讨论的典型成果和他们的解释。我们的目标是确保使用望风支原体PCR检测试剂盒的研究人员成功。
由于试剂盒的极端敏感性,当正确执行的套件应该会产生精确的结果,说明你的样品是否有支原体污染。该试剂盒已使用的JumpStart Taq DNA聚合酶的优化。其他taqs可能在准备样品时使用,但在481 bp的内部控制带应表明替代TAQ适当的灵敏度。为阳性条带很可能受污染的程度上表现出不同密度。它可以观察内部控制带的缺乏严重污染的样本。使用时的谨慎和适当的技术准备的样品,以防止污染是正确的关键。望风支原体PCR检测试剂盒检测时使用。
The authors have nothing to disclose.
由Sigma – Aldrich公司