نحن تصف تقنية البحوث للتنظير القصبات الالياف البصرية وغسل القصبات باستخدام منخفضة شفط الضغط. يتم استخدام تقنية لحصاد الخلايا المناعية من السطوح القصبات الرئة. يتم استخدام مخدر موضعي والتخدير الواعي المعتدل (ميدازولام). مواضيع تتسامح البئر الداخلي والخبرة آثار جانبية أقل.
نحن تصف تقنية البحوث للتنظير القصبات الالياف البصرية مع غسل القصبات (BAL) باستخدام اليد دليل عقد شفط لإزالة الخلايا غير ملتصق الرئة والسوائل بطانة من سطح المخاطية. في بيئات البحوث، وأخذ عينات من BAL يسمح الفطرية (بلعم الرئة) الخلوية (B-T والخلايا)، والخلطية (الغلوبولين المناعي) ردود داخل الرئة.
يتم قبول BAL دوليا لأغراض البحث ومنذ عام 1999 وقد تم تنفيذ هذه التقنية في> 1،000 الموضوعات في المملكة المتحدة وملاوي من قبل مجموعتنا.
يستخدم تقنية شفط لدينا لطيف باليد من السائل ذي جذور؛ تم تصميم هذا لتعظيم حجم BAL عاد وتطبيق الحد الأدنى من القوة القص على ظهائر مهدبة من أجل الحفاظ على بنية ووظيفة الخلايا داخل السائل BAL والحفاظ على سلامة لتسهيل النمو من الخلايا في الجسم الحي السابقين الثقافة. لذا يستخدم تقنية البحث أكبر حجم الإضافيةtillate (عادة في ترتيب 200 مل) ويعمل الشفط اليدوي للحد من الأضرار الخلية.
يتم إعطاء المرضى مخدر موضعي، وعرضت التخدير الواعي (ميدازولام)، وتحمل الإجراء بشكل جيد مع آثار جانبية أقل. معلومات الموضوع شفهية وخطية يحسن التسامح والموافقة المستنيرة المكتوبة هي إلزامية. سلامة هذا الموضوع هو الهدف الأسمى. ويتم اختيار الموضوعات بعناية باستخدام الإدماج والإقصاء معايير واضحة.
ويشمل هذا البروتوكول وصفا للمخاطر المحتملة، والخطوات المتخذة للتخفيف منها، وقائمة موانع، قبل والشيكات بعد العملية، وكذلك القصبات ومختبر تقنيات دقيقة.
خلفية
وقد وضعت القصبات الالياف البصرية للممارسة السريرية، ويستخدم على نطاق واسع سواء في التشخيص وعلاجيا 1،2. غسل القصبات (BAL) يزيل خلايا الرئة غير ملتصق والسوائل بطانة من سطح المخاطية، ويستخدم لأخذ عينات الخزعة الأنسجة المخاطية وتحت المخاطية. في بيئات البحوث، BAL يسمح استجابات عينة من الفطرية (الضامة الرئة 3-5) الخلوية (B-T والخلايا 6)، والخلطية (الغلوبولين المناعي 7) داخل الرئة.
يتم قبول BAL دوليا لأغراض البحث و8 منذ عام 1999 وقد تم تنفيذ هذه التقنية في> 1،000 الموضوعات في المملكة المتحدة وملاوي من قبل مجموعتنا. ونحن نستخدم هذه التقنية في دراسة الاستجابات المناعية الفطرية، الخلوي، والخلطية لمستضد المكورات الرئوية بما في ذلك النقل تجريبية الإنسان المكورات الرئوية 9،17، والكتلة الحيوية الدخان 5، فيروس نقص المناعة البشرية والتطعيم، والعلاج ستو مساعديموت في الشفاء من الالتهاب الرئوي. يستخدم تقنية شفط لدينا لطيف باليد من السائل ذي جذور؛ تم تصميم هذا لتعظيم حجم BAL عاد وتطبيق الحد الأدنى من القوة القص على ظهائر مهدبة من أجل الحفاظ على بنية ووظيفة الخلايا داخل السائل BAL.
في سياق البحوث BAL يستخدم تقنية مختلفة عن تلك التي تمارس من قبل الأطباء والرعاية التنفسية المركزة (غالبا ما يطلق غسل القصبي، الغسيل، غسيل، أو BAL) الذين يهدفون إلى كسب فائدة تشخيصية أو علاجية. تم تصميم تقنية البحوث لحصاد الخلايا والحفاظ على سلامة لتسهيل نمو الخلايا في الجسم الحي السابقين الثقافة. لهذه الأسباب تقنية البحوث يستخدم instillate حجم أكبر (عادة في ترتيب 200 مل) ويعمل الشفط اليدوي للحد من تلف الخلايا. يتم إعطاء المرضى مخدر موضعي، وعرضت التخدير الواعي (ميدازولام)، وتحمل الإجراء بشكل جيد مع آثار جانبية أقل. subjec اللفظي والكتابيالمعلومات ر يحسن التسامح والموافقة المستنيرة المكتوبة هي إلزامية 1.
هدف
الهدف العام هو أن هذا الإجراء ينبغي أن تكون آمنة وفعالة. يجب أن المواضيع لا تواجه أي اضطراب الفسيولوجية وينبغي أن مشغلي جمع باستمرار في أكثر من 100 مل من BAL من الموضوعات. بعد العملية، يجب الموضوعات تجربة آثار جانبية أقل.
سلامة
سلامة هذا الموضوع هو الهدف الأسمى. ويتم اختيار الموضوعات بعناية باستخدام الإدماج والإقصاء معايير واضحة. ويشمل هذا البروتوكول وصفا للمخاطر المحتملة والخطوات المتخذة للتخفيف منها.
ويمكن التعبير عن موانع لتنظير القصبات البحوث على النحو المطلق أو النسبي، ويتم تضمينها في البروتوكول دراستنا كمعايير الإقصاء والإدماج. يتم فحص جميع المواد الدراسية لدينا لضمان صحة كاملة.
موانع مطلقةوتشمل العمود الفقري العنقي غير مستقرة، نقص الأكسجة لا تستجيب، والذبحة الصدرية غير المستقرة، والنزيف أهبة، وعدم انتظام ضربات القلب الخبيثة.
موانع نسبية، بما في ذلك تلك الظروف المرتبطة مع زيادة معدلات المضاعفات، وتشمل:
العام: سوء التعاونية الموضوع (1)، أي مشكلة طبية عامة مثل الصرع كبيرة، السابقة القصبات سيئة التسامح، والمعروفة ردود الفعل السلبية على يدوكائين أو ميدازولام، والحمل، وسوء التغذية.
الجهاز التنفسي: [تشبع (تكبدتها الشركة) على الهواء <94٪] نقص الأكسجة، hypercapnia، والربو غير مستقرة 1، ضعاف بشكل ملحوظ وظيفة الجهاز التنفسي 1 (FEV 1 <1 L) وارتفاع ضغط الدم الرئوي.
القلب والأوعية الدموية: يوريمية، على بعد 6 أسابيع من احتشاء عضلة القلب 1، متفوقة انسداد الوريد الأجوف.
الأخرى: كبت المناعة (مجموعتنا يؤدي بانتظام هذه اإلجراءاتملعرفة في مواضيع بفيروس نقص المناعة البشرية).
انظر الجدول 1 – المخاطر المرتبطة بال للبحوث.
من أجل تحقيق نتائج جيدة فيما يلي مفيدة:
The authors have nothing to disclose.
شكرا لكم لايلينا Mitsi (مساعد للبحوث) والأب كارول هانكوك (ممرضة للبحوث) وموظفي المسرح لمساهمتهم في التصوير، وديفيد شو (ممرضة البحوث) لدعمه مع bronchoscopies أبحاثنا. وذلك بفضل المتطوعين لدينا أيضا ريبيكا دنفي لسماحها هذا الإجراء ليتم تصويره.
Material |
Company |
Catalogue Number |
Comments |
Fibreoptic bronchoscope, light and suction source |
unspecified |
||
Surgical gown, sterile gloves |
unspecified |
||
Sphygnomanometer |
unspecified |
For continuous patient monitoring |
|
Pulse oximeter |
unspecified |
For continuous patient monitoring |
|
3 lead ECG monitor |
unspecified |
For continuous patient monitoring |
|
Nasal oxygen delivery 2-4l/min |
unspecified |
||
Lidocaine 10% spray (Xylocaine) |
AstraZeneca |
For topical anaesthesia |
|
Lidocaine hydrochloride 2% |
unspecified |
For topical anaesthesia |
|
Lidocaine gel (Instillagel) |
Farco-Pharma, Germany |
Alternative products available from other suppliers |
|
Normal saline, sterile 200ml |
unspecified |
Warm to 30oC |
|
10ml taper-end syringe (x10) |
unspecified |
For administration of lidocaine |
|
Intravenous cannula 18G |
unspecified |
For administration of midazolam |
|
Midazolam |
unspecified |
For sedation |
|
Flumazenil |
unspecified |
Reversal of benzodiazepine sedation (emergency use only) |
|
60ml taper-end syringes (x4) |
unspecified |
For normal saline injection and BAL fluid withdrawal. May require connector to attach to the injection port of the bronchoscope |
|
Sterile gauze swab |
Vernaid, UK |
Alternative products available from other suppliers |
|
Sterile container for BAL fluid |
See text and comments |
Siliconised glass bottles reduce macrophage adherence. Alternatively, 50ml centrifuge tubes may be used (total capacity 200ml) |
|
Sigmacote |
Sigma, UK |
SL2 |
Only if siliconised glass bottles used. NB: Harmful and flammable. If used, follow precautions detailed in manufacturer’s MSDS |
Centrifuge |
unspecified |
At least 4x50ml tube capacity. Refrigeration to 4oC preferred. |
|
Shandon Cytospin centrifuge |
Thermo Scientific, UK |
For differential count only |
|
RPMI 1640 medium with L-glutamine |
Sigma, UK |
R8758 |
Alternative products available from other suppliers |
Fetal bovine serum |
Sigma, UK |
F6178 |
Alternative products available from other suppliers |
Penicillin-Streptomycin |
Sigma, UK |
P4333 |
Alternative products available from other suppliers |
Amphotericin B |
Sigma, UK |
A2942 |
Alternative products available from other suppliers |
Tissue culture plates |
Greiner Bio-One, UK |
662160 |
Alternative products available from other suppliers |
Glass microscope slides |
unspecified |
For differential count only |
|
Shandon cytofunnel |
Thermo Scientific, UK |
A78710003 |
For differential count only |
Shandon cytoclip |
Thermo Scientific, UK |
59910052 |
For differential count only |
Hemacolor staining set (fixative, red and blue reagents) |
Merck, Germany |
111661 |
Use according to manufacturer’s instructions |