Oktober 2012: Diesen Monat in JoVE

Summary

Hier sind einige Highlights aus der Oktober 2012 Ausgabe des Journal of Visualized Experiments (Jupiter).

Abstract

Hier sind einige Highlights aus dem Oktober 2012 Ausgabe des Journal of Visualized Experiments (Jupiter).

Grønlund et al. Demonstrieren, wie die Isolierung und Aufarbeitung von spezifischen Zelltypen in Pflanzenblätter exprimieren grün fluoreszierendes Protein (GFP) unter Verwendung der Fluoreszenz-aktivierten Zellsortierung (FACS). Dieses Verfahren überwindet die störende Fluoreszenz des Chlorophyll in den Blättern gefunden, und unterscheidet GFP-exprimierenden Protoplasten aus Nicht-GFP Protoplasten.

In JoVE Neuroscience, Babona-Pilipos et al. zeigen, wie man eine Kammer zur Messung Galvanotaxis oder Zellmigration in einem elektrischen Feld zu konstruieren. Durch Zeitraffer-Bildgebung und Bildanalyse können die Autoren zu studieren das Zugverhalten von neuralen Vorläuferzellen in einem elektrischen Feld, das die Verwendung der elektrischen Stimulation direkten neuralen Vorläuferzellen zu Websites von Verletzungen oder Krankheit führen kann.

Artikel mit microFluidic Plattformen haben einen bedeutenden Publikation Geschichte JoVE. Harris et al . veröffentlicht drei Artikel, die einen mikrofluidischen Vorrichtung beinhalten zum Trennen Axone von Nervenzellen Körper haben. In diesem Monat in JoVE Neuroscience, Higashimori et al. Mit diesem mikrofluidischen Plattform, um die Interaktionen zwischen neuronalen Axonen und Gliazellen, die entscheidend für die physiologische Funktion des Nervensystems sind, untersuchen.

In JoVE Bioengineering zeigen zwei Arbeitsgruppen der erfindungsgemäßen bioadhäsiven Eigenschaften eines Polymers Chitosan aus Chitin ableitet, die in Pilzzellwänden oder in den Exoskelett von Krustentieren und Insekten gefunden wird. Chitosan wird in vielen industriellen und landwirtschaftlichen Anwendungen verwendet, und bioengineers finden auch Anwendungen für sie in chirurgischen Anwendungen. Foster et al. entwickelten ein laseraktiviertenChirurgisches Film genannt Surgilux, die kombiniert mit Chitosan Indocyaningrün ICG), einem lichtempfindlichen Farbstoff enthält. Dieser chirurgische Folie bindet stark an Gewebe wie Muskel, nach der Laserbestrahlung. Lauto et al. entwickelte eine chirurgische Film, Chitosan verbindet sich mit der photoaktive Farbstoff, stieg Bengal. Diese neuartige Folie auch bindet stark an Gewebe wie Darm, nachdem es bestrahlt wird. Diese Klebefolien sind biokompatibel und kann möglicherweise in verschiedenen chirurgischen Verfahren, die von Nähten verwendet werden.

In JoVE Clinical and Translational Medicine, Fiema et al. zeigen High-Throughput-Technik für die Validierung von Biomarkern in Graft-versus-host-Krankheit, eine gemeinsame und lebensbedrohliche Komplikation von Zellen oder Geweben Transplantation. Die Autoren verwenden kommerziell erhältlichen ELISAs mehrere Proteine ​​in sequentieller Weise zu analysieren.

In JoVE Immunologie und Infektionsbiologie zeigen Keyel et al., Wie die Echtzeit-Kinetik im messenmune Zell-Reaktionen auf bakterielle Toxine mit High-Speed ​​Live Cell Mikroskopie. Diese Methode kann verwendet werden, um zu zeigen, wie Immunzellen bakterielle Toxine reagieren. Kombiniert mit Hochgeschwindigkeits-3D-konfokale Mikroskopie kann diese Technik auch visualisieren die zelluläre Reparatur Reaktion.

In JoVE Applied Physics, Borisenko et al. Bestimmung der elektronischen Struktur von komplexen Materialien mit Winkel-Photoemissionsspektroskopie in einem Synchrotron Radiation Facility. Durch die Kombination jüngsten Fortschritte in der Synchrotron-Strahlung, Oberflächenphysik und Kryotechnik, kann diese Methode gewinnen ein genaues Bild von der Energie und Dynamik von Elektronen in einem festen und entscheidende Fragen auf dem Gebiet der Physik der kondensierten Materie.

Diese Vorschau fasst nur einige der bemerkenswerten Video-Artikel in der Oktober 2012 Ausgabe von JoVE. Für zusätzliche Videos, besuchen Sie bitte www.jove.com .

Protocol

A Chitosan Based, Laser Activated Thin Film Surgical Adhesive "SurgiLux ': Vorbereitung und Demonstration. L. John R. Foster, Elizabeth Karsten Bio / Polymer Research Group, University of New South Wales Die Herstellung einer erfindungsgemäßen, flexiblen Dünnfilm chirurgischen Klebstoff aus FDA zugelassenen Inhaltsstoffen, Chitosan und Indocyaningrün beschrieben. Bonden dieser Klebstoff auf Kollagengewebe durch eine einfache Aktivierung mit einer Low-Power-Infrarotlaser nachgewiesen wird. Herstellung und Anwendung von Rose Bengal-Chitosan-Films in Laser Tissue Repair Antonio lauto 1, Marcus Stoodley 2, Matthew Barton 1, John W. Morley 1, David A. Mahns 1, Leonardo Longo 3, Damia Mawad <sup> 1 1 Bioelektronik und Neuroscience (BENS) Forschungsgruppe der University of Western Sydney, NSW Australien, 2 Australian School of Advanced Medicine, Macquarie University, NSW Australien, 3 School of Medicine, University of Siena, Italien Die Fäden werden in der Regel erforderlich, um Gewebe während chirurgischer Eingriffe zu reparieren. Jedoch kann ihre Anwendung als problematisch, da sie invasiv sind und kann Gewebe beschädigen. Die Herstellung und Anwendung Methoden einer neuartigen Gewebekleber werden hier berichtet. Diese Klebefolie wird lasersensitiven aktiviert und erfordert nicht die Verwendung von Nähten. A Galvanotaxis Assay für die Analyse von neuralen Vorläuferzellen Cell Migration Kinetics in einem von außen angelegten Direct Current Electric Field Robart Babona-Pilipos 1, Milos R. Popovic 2, Cindi M. Morshead 3 1Institut für Biomaterialien und Biomedical Engineering, University of Toronto, 2 Lyndhurst Centre, Toronto Rehabilitation Institute, 3 Department of Surgery, University of Toronto In diesem Protokoll zeigen wir, wie Sie benutzerdefinierte Kammern, die die Anwendung eines Gleichstrom elektrisches Feld an Zeitraffer-Aufnahmen von erwachsenen Gehirn abgeleitete neurale Vorläuferzellen Translokation während Galvanotaxis ermöglichen ermöglichen konstruieren. Zelle spezifische Analyse von Arabidopsis Blätter mit fluoreszenzaktivierten Zellsortierung Jesper T. Grønlund 1, Alison Eyres 1, Sanjeev Kumar 1, Vicky Buchanan-Wollaston 1, 2, Miriam L. Gifford 1, 2 1 School of Life Sciences, University of Warwick, 2 Warwick Systems Biology, University of Warwick AVerfahren zur Herstellung von Arabidopsis Blattprotoplasten, die kompatibel mit der fluoreszenzaktivierten Zellsortierung (FACS) sind, so dass für Studien spezifischer Zellpopulationen. Dieses Verfahren ist kompatibel mit jeder Zeile, die Arabidopsis GFP exprimiert in einer Untergruppe von Zellen. Visualisierung der bakteriellen Toxin induzierten Reaktionen mit Live Cell Fluoreszenzmikroskopie Peter A. Keyel 1, Michelle E. Heid 1, Simon C. Watkins 2, Russell D. Salter 1 1 Department of Immunology, University of Pittsburgh School of Medicine, 2 Department of Cell Biology and Physiology, University of Pittsburgh School of Medicine Methoden zur Reinigung des Cholesterin-Bindung Toxin Streptolysin O von rekombinantem E. coli und Visualisierung von Toxin Bindung an eukaryotischen Zellen leben, sind zu beschreibend. Lokalisierte Abgabe von Toxin induziert eine schnelle und komplexe Veränderungen in Zielzellen enthüllen neue Aspekte des Toxins Biologie. High Throughput Sequential ELISA zur Validierung von Biomarkern des akuten Graft-Versus-Host Disease Bryan Fiema *, Andrew C. Harris *, Aurelie Gomez, Praechompoo Pongtornpipat, Kelly Lamiman, Mark T. Vander Lugt, Sophie Paczesny Pediatric Blood and Marrow Transplant Program, University of Michigan * Diese Autoren trugen gleichermaßen Hoher Durchsatz Validierung mehrerer Biomarker-Kandidaten können durch sequentielle ELISA durchgeführt werden, um Einfrieren / Auftauen zu minimieren und die Nutzung von wertvollen Plasmaproben. Hier zeigen wir, wie man nacheinander durchführen ELISAs für sechs verschiedene validierte Plasma-Biomarker 1-3 von Graft-versus-Host-Krankheit (GVHD) 4 auf der gleichen plasma Probe. Imaging Analyse von Neuron zu Glia Interaktionen in Microfluidic Kultur Platform (MCP)-Based Neuronale Axon und Glia Co-Kultur-System Haruki Higashimori 1, Yongjie Yang 1, 2 1 Department of Neuroscience, Tufts University, 2 Neuroscience Program, Tufts Sackler School of Graduate Biomedical Sciences Diese Studie beschreibt die Verfahren für die Einrichtung einer neuartigen neuronalen Axon und (astro) Glia Co-Kultur-Plattform. Auf diese Co-Kultur-System wird Manipulation direkte Wechselwirkung zwischen einem einzelnen Axon (und einzigen Gliazelle) durchführbar ist, so dass mechanistischen Analyse des gegenseitigen Neuron zu glialen Signalisierung. Angle-Photoemissionsspektroskopie Bei extrem niedrigen Temperaturen Sergey V. Borisenko 1, Volodymyr B. Zabolotnyy 1, Alexander A. Kordyuk 1, 2, Danil V. Evtushinsky 1, Timur K. Kim 1, 3, Emanuela Carleschi 4, Bryan P. Doyle 4, Rosalba Fittipaldi 5, Mario Cuoco 5, Antonio Vecchione 5, Helmut Berger 6 1 Institut für Festkörperforschung, IFW-Dresden, 2 Institut für Metallphysik der Nationalen Akademie der Wissenschaften der Ukraine, 3 Diamond Light Source LTD, 4 Department of Physics, University of Johannesburg, 5 CNR-SPIN und Dipartimento di Fisica "ER Caianiello ", Università di Salerno, 6 Institut für Physik komplexer Materie, École Polytechnique Fédérale de Lausanne Das übergeordnete Ziel dieser Methode ist es, die Niedrig-Energie-elektronischen Struktur von Festkörpern bei extrem niedrigen Temperaturen mit Angle-Photoemission Spectrosc bestimmenopy mit Synchrotronstrahlung. Herstellung einer mikrofluidischen Vorrichtung für die Kompartimentierung von Neuron Soma und Axone Joseph Harris 1, Hyuna Lee 1, Behrad Vahidi 1, Christina Tu 2, David Cribbs 3, Noo Li Jeon 1, Carl Cotman 3 1 Department of Biomedical Engineering, University of California, Irvine, 2 Stem Cell Research Center, University of California, Irvine, 3 Institut für Hirnforschung Altern und Demenz, University of California, Irvine In diesem Video zeigen wir die Technik der weichen Lithographie mit Polydimethylsiloxan (PDMS), die wir verwenden, um einen mikrofluidischen Vorrichtung zum Kultivieren von Neuronen farbricate. Vorbereiten E18 Kortikale Rattenneuronen für Kompartimentierung in einem Microfluidic Geräte Joseph Harris 1, Hyuna Lee 1, Christina Tu Tu 2, David Cribbs 3, Carl Cotman 3, Noo Li Jeon 1 1 Department of Biomedical Engineering, University of California, Irvine, 2 Stem Cell Research Center, University of California, Irvine, 3 Institut für Hirnforschung Altern und Demenz, University of California, Irvine In diesem Video zeigen wir die Herstellung von E18 Kortikale Rattenneuronen. Nicht-Plasma-Bonding von PDMS für kostengünstige Herstellung von mikrofluidischen Bauteilen Joseph Harris 1, Hyuna Lee 1, Behrad Vahidi 1, Cristina Tu 2, David Cribbs 3, Carl Cotman 3, Noo Li Jeon 1 1 Department of Biomedical Engineering, University of California, Irvine, 2 Stem Cell Research Center, University of California, Irvine, 3 Institut für Hirnforschung Altern und Demenz, University of California, Irvine In diesem Video zeigen wir, wie die Neuronen mikrofluidischen Vorrichtung ohne Plasma Bindung verwenden.