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Editorial

Outubro de 2012: Este mês, em JoVE

doi: 10.3791/5025 Published: October 1, 2012
1Department of Ophthalmology, Massachusetts Eye and Ear, 2JoVE Content Production

Summary

Aqui estão alguns destaques da edição de outubro de 2012 Jornal de Experimentos visualizado (JoVE).

Abstract

Aqui estão alguns destaques da edição de outubro de 2012 Jornal de Experimentos visualizado (JoVE).

Grönlund et al. Demonstrar como isolar e analisar os tipos de células específicas em folhas de plantas que expressam a proteína fluorescente verde (GFP) usando fluorescência de separação de células activada (FACS). Este método supera a interferência de fluorescência da clorofila encontrado nas folhas, e distingue-GFP expressando GFP-protoplastos a partir de protoplastos não.

Em JoVE Neuroscience, Babona-Pilipos et al. demonstrar como a construção de uma câmara de medição, ou galvanotaxis migração de células dentro de um campo eléctrico. Através de lapso de tempo de imagem e análise de imagem, os autores podem estudar o comportamento migratório das células precursoras neuronais de um campo eléctrico, o que pode conduzir à utilização da estimulação eléctrica directa precursores neurais para locais de lesão ou doença.

Artigos envolvendo microfluIDIC plataformas têm uma história significativa na publicação Jove. Harris et al . lançaram três artigos, que envolvem um dispositivo micro para separar os axônios de corpos celulares neuronais. Este mês na JoVE Neuroscience, Higashimori et al. usar esta plataforma microfluídica para investigar as interações entre os axónios neuronais e células gliais, que são críticas para a função fisiológica do sistema nervoso.

Em Bioengineering JoVE, dois grupos de pesquisa demonstraram as propriedades bio-aderentes novas de quitosana de um polímero derivado da quitina, que é encontrado nas paredes celulares de fungos ou nos exoesqueletos de crustáceos e insectos. A quitosana é usada em muitas aplicações industriais e agrícolas, e bioengenheiros também estão encontrando usos para ele em aplicações cirúrgicas. Foster et al. desenvolveram um laser activadapelícula cirúrgica chamada Surgilux, que combina com a quitosana indocianina verde ICG), um corante fotossensível. Este filme cirúrgico liga-se fortemente ao tecido, tais como o músculo, após irradiação do laser. L AUTO et al. desenvolveu um filme cirúrgico que combina o corante com o quitosano fotoactivo, rosa de Bengala. Este filme novel também se liga fortemente aos tecidos, tais como o intestino, após ter sido irradiado. Estas películas adesivas são biocompatíveis e que podem eventualmente ser utilizados em vários procedimentos cirúrgicos em lugar de suturas.

Em Medicina Clínica e Translacional JoVE, Fiema et al. demonstrar uma técnica de alto rendimento para a validação de biomarcadores em enxerto contra doença de anfitrião, uma complicação comum e risco de vida da célula ou transplante de tecido. Os autores utilizam testes ELISA comercialmente disponíveis para análise de proteínas múltiplas em modo sequencial.

Em JoVE Imunologia e Infecção, Keyel et al. Demonstrar como medir a cinética em tempo real do imMUNE respostas de células para toxinas bacterianas, utilizando alta velocidade da microscopia de células vivas. Este método pode ser usado para mostrar como as células imunológicas que respondem às toxinas bacterianas. Combinado com alta velocidade de microscopia confocal 3D, esta técnica pode também visualizar a resposta de reparação celular.

Em JoVE Física Aplicada, Borisenko et al. determinar a estrutura eletrônica de materiais complexos usando ângulo resolvido espectroscopia de fotoelétrons em uma instalação de radiação synchotron. Ao combinar os recentes avanços na synchotron radiação, ciência de superfície, e criogenia, este método pode obter uma imagem precisa da energia e do momento dos elétrons dentro de um sólido, e tratar de questões fundamentais no campo da física da matéria condensada.

Esta pré-visualização resume apenas alguns dos notáveis ​​vídeo-artigos disponíveis na edição de outubro de 2012 Jove. Para vídeos adicionais, visite www.jove.com .

Protocol

A base de quitosana, Laser Activated adesiva Thin Film cirúrgica ", SurgiLux ': Preparação e demonstração.

L. John R. Foster, Elizabeth Karsten
Bio / Polymer Research Group, da Universidade de Nova Gales do Sul

A fabricação de uma novela, filme flexível fino adesivo cirúrgico a partir de ingredientes aprovados pela FDA, a quitosana e indocianina verde é descrito. Bonding deste adesivo para tecido colagenoso através de um processo de activação com um simples de baixa potência de laser infra-vermelho é demonstrada.

Fabricação e Aplicação de Rosa Bengala-quitosana Films em Reparo de Tecidos Laser

Antonio L AUTO 1, Marcus Stoodley 2, Mateus Barton 1, John W. Morley 1, David A. Mahns 1, Leonardo Longo 3, Damia Mawad 1 Bioelectrónica e Neurociência grupo de pesquisa (BENS), University of Western Sydney, NSW Austrália, 2 Escola Australiana de Medicina Avançada, da Universidade Macquarie, NSW Austrália, 3 da Faculdade de Medicina da Universidade de Siena, Itália

Suturas são normalmente necessários para reparar o tecido durante procedimentos cirúrgicos. No entanto, a sua aplicação pode ser problemática uma vez que são invasivos e pode danificar o tecido. Os métodos de fabricação e aplicação de um adesivo de tecido romance são aqui relatados. Esta película adesiva é activada por laser e não requer o uso de suturas.

Um Ensaio Galvanotaxis para Análise de Precursores Neurais Cinética migração celular em um campo aplicado externamente Corrente Contínua Elétrica

Robart Babona-Pilipos 1, Milos R. Popovic 2, Cindi M. Morshead 3
1Instituto de Biomateriais e Engenharia Biomédica, da Universidade de Toronto, 2 Lyndhurst Centre, Toronto Rehabilitation Institute, 3 Departamento de Cirurgia da Universidade de Toronto

Neste protocolo demonstramos como construir câmaras personalizados que permitem a aplicação de um campo elétrico de corrente contínua para permitir lapso de tempo de imagem do cérebro adulto derivado translocação de células neurais precursor durante galvanotaxis.

A análise de célula específico de folhas de Arabidopsis usando classificação de células activadas por fluorescência

Jesper T. Gronlund 1, Alison Eyres 1, Sanjeev Kumar 1, Vicky Buchanan-Wollaston 1, 2, Miriam L. Gifford 1, 2
1 Escola de Ciências da Vida, da Universidade de Warwick, 2 Warwick Biologia de Sistemas, da Universidade de Warwick

AMétodo para a produção de protoplastos de folha de Arabidopsis que são compatíveis com a classificação de células activadas por fluorescência (FACS), permitindo estudos de populações de células específicas. Este método é compatível com qualquer linha de Arabidopsis que expressam GFP em um subconjunto de células.

Visualização das respostas toxina bacteriana induzida por microscopia de fluorescência de células vivas

Peter A. Keyel 1, Michelle E. Heid 1, Simon C. Watkins 2, Russell D. Salter 1
1 Departamento de Imunologia da Universidade de Pittsburgh School of Medicine, 2 Departamento de Biologia Celular e Fisiologia, da Universidade de Pittsburgh School of Medicine

Os métodos para a purificação do colesterol de ligação da toxina a partir de estreptolisina O recombinante E. coli e visualização de toxina de ligação para viver células eucarióticas são descreverd. Entrega localizada de toxina induz a mudanças rápidas e complexas em células-alvo, revelando novos aspectos da biologia toxina.

High Throughput ELISA sequencial para a validação dos biomarcadores da doença enxerto-versus-hospedeiro aguda

Bryan Fiema *, Andrew C. Harris *, Aurelie Gomez, Praechompoo Pongtornpipat, Kelly Lamiman, Mark T. Vander Lugt, Sophie Paczesny
Sangue Pediátrica e do Programa de Transplante de Medula, da Universidade de Michigan
* Estes autores contribuíram igualmente

Validação com rendimento elevado de candidatos a biomarcadores múltiplos pode ser realizada por meio de ELISA sequencial de modo a minimizar de congelamento / descongelamento e utilização de amostras de plasma preciosos. Aqui, é mostrado como para executar sequencialmente ELISAs para seis diferentes biomarcadores plasmáticos validados 1-3 de enxerto-versus-hospedeiro (GVHD) 4 no mesmo plamostra de asma.

Análise de imagens de Neuron Glia para Interação em Plataforma Cultura microfluídicos (MCP) com base em Axon Neuronal e Sistema Glia co-cultura

Haruki Higashimori 1, Yongjie Yang 1, 2
1 Departamento de Neurociência, Tufts University, 2 Programa de Neurociência, Tufts Sackler School of Graduate Biomedical Sciences

Este estudo descreve os procedimentos de criação de um axônio neuronal e romance (astro) glia plataforma de co-cultura. Neste sistema de co-cultura, a manipulação da interacção directa entre um único axónio (e única célula glial) torna-se possível, permitindo a análise mecanicista do neurónio mútuo de sinalização gliais.

Ângulo resolvido espectroscopia de fotoelétrons em ultra-baixas temperaturas

Sergey V. Borisenko 1, Volodymyr B. Zabolotnyy 1, Alexander A. Kordyuk 1, 2, Danil V. Evtushinsky 1, Timur K. Kim 1, 3, 4 Emanuela Carleschi, Bryan P. Doyle 4, 5 Rosalba Fittipaldi, Mario Cuoco 5, Antonio Vecchione 5, Helmut Berger 6
Um Instituto de Pesquisa do Estado Sólido, IFW-Dresden, 2 Instituto de Física de metal da Academia Nacional de Ciências da Ucrânia, 3 Diamond Light Source LTD, 4 Departamento de Física da Universidade de Joanesburgo, 5 CNR-SPIN, e Dipartimento di Fisica "ER Caianiello ", Università di Salerno, 6 Instituto de Física da Matéria Complex, École Polytechnique Fédérale de Lausanne

O objetivo geral deste método é determinar a estrutura de baixo de energia eletrônica de sólidos em ultra-baixas temperaturas usando ângulo resolvido Spectrosc Photoemissionopiar com radiação síncrotron.

Fabricação de um dispositivo micro para a compartimentalização da Neuron Soma e Axônios

Joseph Harris 1, Hyuna Lee 1, Behrad Vahidi 1, 2 Christina Tu, David Cribbs 3, Noo Li Jeon 1, Carl Cotman 3
1 Departamento de Engenharia Biomédica da Universidade da Califórnia, Irvine, 2 Stem Cell Research Centro, Universidade da Califórnia, Irvine, 3 Instituto de Envelhecimento Cerebral e Demência, Universidade da Califórnia, Irvine

Neste vídeo mostramos a técnica de litografia suave com polidimetilsiloxano (PDMS), que usamos para farbricate um dispositivo micro para os neurônios de cultura.

Preparando E18 neurônios corticais de ratos para compartimentalização em um MicDispositivo rofluidic

Joseph Harris 1, Hyuna Lee 1, Christina Tu Tu 2, David Cribbs 3, Carl Cotman 3, Noo Li Jeon 1
1 Departamento de Engenharia Biomédica da Universidade da Califórnia, Irvine, 2 Stem Cell Research Centro, Universidade da Califórnia, Irvine, 3 Instituto de Envelhecimento Cerebral e Demência, Universidade da Califórnia, Irvine

Neste vídeo mostramos a preparação de E18 neurônios de rato cortical.

Não-plasma Colagem de PDMS para fabricação de dispositivos microfluídicos barato

Joseph Harris 1, Hyuna Lee 1, Behrad Vahidi 1, Cristina Tu 2, David Cribbs 3, Carl Cotman 3, Noo Li Jeon 1
1 Departamento de Biomédica Engineering, da Universidade da Califórnia, Irvine, 2 Stem Cell Research Center, da Universidade da Califórnia, Irvine, 3 Instituto de Envelhecimento Cerebral e Demência, Universidade da Califórnia, Irvine

Neste vídeo mostramos como usar o dispositivo neurônio microfluídicos sem ligação plasma.

Disclosures

Não há conflitos de interesse declarados.

Outubro de 2012: Este mês, em JoVE
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Chao, W., Kolski-Andreaco, A. October 2012: This Month in JoVE. J. Vis. Exp. (68), e5025, (2012).More

Chao, W., Kolski-Andreaco, A. October 2012: This Month in JoVE. J. Vis. Exp. (68), e5025, (2012).

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