אוקטובר 2012: החודש הזה ביופיטר

Summary

להלן כמה נקודות עיקריות מ2012 גיליון אוקטובר של כתב העת של ניסויים דמיינו (יופיטר).

Abstract

Here are some highlights from the October 2012 issue of Journal of Visualized Experiments (JoVE).

Grønlund et al. demonstrate how to isolate and analyze specific cell types in plant leaves expressing green fluorescent protein (GFP) using fluorescence-activated cell sorting (FACS). This method overcomes the interfering fluorescence of the chlorophyll found in leaves, and distinguishes GFP-expressing protoplasts from non-GFP protoplasts.

In JoVE Neuroscience, Babona-Pilipos et al. demonstrate how to construct a chamber for measuring galvanotaxis, or cell migration within an electric field. Through time-lapse imaging and image analysis, the authors can study the migratory behavior of neural precursor cells in an electric field, which may lead to the use of electrical stimulation to direct neural precursors to sites of injury or disease.

Articles involving microfluidic platforms have a significant publication history in JoVE. Harris et al. have released three articles, which involve a microfluidic device for separating axons from neuronal cell bodies. This month in JoVE Neuroscience, Higashimori et al. use this microfluidic platform to investigate the interactions between neuronal axons and glial cells, which are critical for the physiological function of the nervous system.

In JoVE Bioengineering, two research groups demonstrate the novel bioadhesive properties of chitosan-a polymer derived from chitin, which is found in fungal cell walls or in the exoskeletons of crustaceans and insects. Chitosan is used in many industrial and agricultural applications, and bioengineers are also finding uses for it in surgical applications. Foster et al. have developed a laser-activated surgical film called Surgilux, which combines chitosan with indocyanine green ICG), a photosensitive dye. This surgical film binds strongly to tissue, such as muscle, after laser irradiation. Lauto et al. developed a surgical film that combines chitosan with the photoactive dye, rose Bengal. This novel film also binds strongly to tissues, such as intestine, after it is irradiated. These adhesive films are biocompatible and may potentially be used in various surgical procedures in place of sutures.

In JoVE Clinical and Translational Medicine, Fiema et al. demonstrate a high-throughput technique for validating biomarkers in graft vs. host disease, a common and life-threatening complication of cell or tissue transplantation. The authors use commercially available ELISAs to analyze multiple proteins in sequential fashion.

In JoVE Immunology and Infection, Keyel et al. demonstrate how to measure the real-time kinetics of immune cell responses to bacterial toxins using high-speed live cell microscopy. This method can be used to show how immune cells respond to bacterial toxins. Combined with high-speed 3D confocal microscopy, this technique can also visualize the cellular repair response.

In JoVE Applied Physics, Borisenko et al. determine the electronic structure of complex materials using angle-resolved photoemission spectroscopy in a synchotron radiation facility. By combining recent advances in synchotron radiation, surface science, and cryogenics, this method can gain a precise picture of the energy and momentum of electrons inside a solid, and address key questions in the field of condensed matter physics.

This preview summarizes just a few of the notable video-articles available in the October 2012 issue of JoVE. For additional videos, please visit www.jove.com.

Protocol

Chitosan מבוסס, דבק הליזר הופעל סרט דק כירורגים, 'SurgiLux': הכנה והפגנה. ל 'ג'ון ר פוסטר, אליזבת קרסטן יו / חקר פולימרי קבוצה, אוניברסיטת ניו סאות' וויילס הייצור של רומן, הדבק גמיש סרט דק כירורגית ממרכיבי ה-FDA אשרו, chitosan וירוק indocyanine מתואר. מליטה של ​​דבק זה לרקמת collagenous באמצעות תהליך הפעלה פשוט עם ליזר נמוך מופעל אינפרא אדום הפגינה. ייצור ויישום של רוז בנגל-chitosan סרטים בתיקון רקמות ליזר אנטוניו 1 Lauto, מרקוס Stoodley 2, 1 מתיו בריטון, ג'ון וו 1 מוראלי, דוד א 1 Mahns, ליאונרדו 3 לונגו, דאמיה Mawad <sup> 1 קבוצת מדעי המוח (Bens) מחקר, אוניברסיטת המערב סידני, NSW אוסטרליה, בית הספר אוסטרלי 2 מתוך מתקדמת רפואה, אוניברסיטת Macquarie, NSW אוסטרליה, 3 בבית הספר לרפואה, אוניברסיטת סיינה, איטליה 1 הביו ו תפרים בדרך כלל יש צורך בתיקון רקמות במהלך ניתוחים. עם זאת, היישום שלהם יכול להיות בעייתי כמו שהם פולשנית ועלולים לגרום ניזק לרקמות. את שיטות הייצור ויישום של דבק רקמות רומן נמצאים כאן דיווח. סרט דבק זה ליזר מופעל ואינו דורש שימוש בתפרים. Assay Galvanotaxis לניתוח של קינטיקס נדידת תאים העצביים המבשר בשדה חשמלי נוכחי לשימוש חיצוני ישיר Robart Babona-Pilipos 1, מילוש ר פופוביץ' 2, סינדי מ '3 Morshead 1מכון לביו חומרים ולהנדסה ביו רפואית, אוניברסיטת טורונטו, 2 Lyndhurst מרכז, טורונטו מכון לשיקום, 3 מחלקה לכירורגיה, אוניברסיטת טורונטו בפרוטוקול זה אנו מדגימים כיצד לבנות תאים מותאמים אישית המאפשרים יישום של שדה חשמלי בזרם ישר כדי לאפשר הדמית זמן לשגות של המוח מבוגר נגזר טרנסלוקציה תא מבשר העצבית במהלך galvanotaxis. ניתוח ספציפי של תאים של עלי ארבידופסיס באמצעות מיון תא הופעל פלואורסצנטי Jesper ט 1 Grønlund, אליסון 1 אייריס, סנג'יב קומאר 1, ויקי ביוקנן-ולאסטון 1, 2, מרים ל 1 גיפורד, 2 בית הספר 1 למדעי חיים, האוניברסיטה וורוויק, 2 ורוויק מערכות ביולוגיה, האוניברסיטה וורוויק שיטה להפקת protoplasts העלה ארבידופסיס התואמים את מיון תא הופעל פלואורסצנטי (FACS), המאפשר ללימודים של אוכלוסיות תאים ספציפיות. שיטה זו תואמת לכל קו ארבידופסיס שמבטא GFP בתת קבוצה של תאים. ויזואליזציה של תגובות מושרות רעלן של חיידקים באמצעות מיקרוסקופ פלואורסצנטי תא החי פיטר א 1 Keyel, מישל א 1 Heid, סיימון ג וטקינס 2, ראסל ד 1 סולטר 1 מחלקה לאימונולוגיה, אוניברסיטת פיטסבורג ספר לרפואה, 2 מחלקה לביולוגיה של תא ופיזיולוגיה, אוניברסיטת פיטסבורג ספר לרפואה שיטות לטיהור הכולסטרול המחייב הרעל streptolysin O מרקומביננטי E. coli ויזואליזציה של הרעלן המחייב לחיות תאים האיקריוטים הם לתארד. אספקה ​​מקומית של הרעלן גורמת לשינויים מהירים ומורכבים בתאים ממוקדים חושפים היבטים חדשניים של ביולוגית רעל. תפוקה גבוהה ELISA סדרתית עבור אימות של סמנים ביולוגיים של מחלות אקוטיות שתל נגד מארח בריאן Fiema *, אנדרו ס אריס *, אורלי גומז, Praechompoo Pongtornpipat, קלי Lamiman, מארק ט הנדר Lugt, הסופי Paczesny דם ילדים ותכנית השתלת מח, אוניברסיטת מישיגן * מחברים אלה תרמו במידה שווה אימות תפוקה גבוהה של סמנים ביולוגיים מועמדים מרובים יכולה להתבצע על ידי ELISA הרציף במטרה למזער מחזורי הקפאה / פשרה ושימוש בדגימות פלזמה יקרות. הנה, אנחנו מדגימים איך לבצע רצף ELISAs במשך שישה סמנים שונים תקפים פלזמה 1-3 מתוך מחלת שתל נגד מארח (GVHD) 4 באותו plמדגם יסמא. ניתוח הדמיה של תא עצב לאינטראקצית גליה בפלטפורמת תרבות Microfluidic (MCP)-Based אקסון העצבי ומערכת גליה שיתוף תרבות הרוקי 1 Higashimori, Yongjie 1 יאנג, 2 מחלקת 1 למדעי המוח, אוניברסיטת טאפטס, תכנית 2 Neuroscience, טאפטס סאקלר בית הספר למדעים ביו בוגר מחקר זה מתאר את ההליכים של הקמת אקסון עצבי רומן ופלטפורמה (אסטרו) גליה שיתוף תרבות. במערכת זו שיתוף התרבות, מניפולציה של אינטראקציה ישירה בין האקסון יחיד (ותאי גלייה יחידים) הופכת להיות ריאלית, המאפשרת ניתוח מכניסטית של נוירון ההדדי לאיתות גליה. Angle-resolved ספקטרוסקופיה Photoemission בטמפרטורות נמוכות במיוחד סרגיי נ 'פלוני1 orisenko, וולודימיר ב 1 Zabolotnyy, אלכסנדר א 1 Kordyuk, 2, 1 ו 'דניל Evtushinsky, טימור ק 1 קים, 3, עמנואלה Carleschi 4, בריאן פ דויל 4, Rosalba Fittipaldi 5, מריו Cuoco 5, אנטוניו Vecchione 5, הלמוט ברגר 6 מכון 1 לחקר Solid State, IFW-דרזדן, 2 מכון לפיזיקת מתכת של האקדמיה הלאומית למדעים של אוקראינה, 3 יהלומי מקור אור בע"מ, 4 מחלקה לפיסיקה, אוניברסיטת יוהנסבורג, 5 CNR-SPIN, וDipartimento די Fisica "ER Caianiello ", אנשי האוניברסיטה די סלרנו, 6 במכון לפיסיקה של חומר מורכב, אקול פוליטכניק הפדרלי דה לוזאן המטרה הכללית של שיטה זו היא לקבוע את המבנה האלקטרוני האנרגיה נמוכה של מוצקים בטמפרטורות נמוכות במיוחד באמצעות Spectrosc Photoemission angle-resolvedעתק עם קרינת סינכרוטרון. המצאה של מכשיר microfluidic עבור המידור של Neuron סומה והאקסונים יוסף 1 אריס, Hyuna 1 לי, 1 Behrad חידי, כריסטינה ט"ו 2, 3 Cribbs הדוד, נו לי 1 Jeon, קרל 3 קוטמאן מחלקת 1 הנדסה ביו רפואית באוניברסיטת קליפורניה, אירווין, 2 מרכז לתאי גזע מחקר, מאוניברסיטת קליפורניה, אירווין, 3 מכון להזדקנות המוח ודמנציה, אוניברסיטת קליפורניה, אירווין בסרטון הזה אנחנו מדגימים את הטכניקה של ליתוגרפיה הרכה עם polydimethyl siloxane (PDMS) בו אנו משתמשים כדי farbricate מכשיר microfluidic לנוירונים culturing. הכנת E18 נוירונים עכברוש קליפתיים למידור במיקרופוןהתקן rofluidic יוסף 1 אריס, Hyuna 1 לי, כריסטינה ט"ו ט"ו 2, הדוד 3 Cribbs, קרל 3 קוטמאן, נו לי 1 ג'און מחלקת 1 הנדסה ביו רפואית באוניברסיטת קליפורניה, אירווין, 2 מרכז לתאי גזע מחקר, מאוניברסיטת קליפורניה, אירווין, 3 מכון להזדקנות המוח ודמנציה, אוניברסיטת קליפורניה, אירווין בסרטון הזה אנחנו מדגימים הכנת E18 נוירונים עכברוש בקליפת מוח. Bonding ללא פלזמה של PDMS לייצור זול של מכשירי microfluidic יוסף 1 אריס, Hyuna 1 לי, 1 Behrad חידי, כריסטינה ט"ו 2, הדוד 3 Cribbs, קרל 3 קוטמאן, נו לי 1 ג'און מחלקת 1 של ביו Engineerinגרם, אוניברסיטת קליפורניה, אירווין, 2 תאי גזע במרכז מחקר, אוניברסיטת קליפורניה, אירווין, 3 מכון להזדקנות המוח ודמנציה, אוניברסיטת קליפורניה, אירווין בסרטון הזה אנחנו מדגימים איך להשתמש במכשיר microfluidic נוירון בלי מליטת פלזמה.