Infarctus du myocarde et d'évaluation fonctionnelle de résultats chez le porc

Summary

Ce protocole décrit le modèle d'infarctus du myocarde (MI) à l'aide d'un porc de 90 min à thorax fermé ballonnet coronarien occlusion de l'artère descendante antérieure gauche (LAD), suivie d'une reperfusion. En outre, le protocole pour plusieurs paramètres de résultats, tels que la fonction cardiaque, hémodynamique, résistance microvasculaire, et la taille de l'infarctus, sont également présentés.

Abstract

Présentation de la thérapeutique cardiovasculaire nouvellement découvertes dans les essais premier-dans-homme dépend d'une feuille de route éthique et juridique strictement réglementé. Une condition importante est une bonne compréhension de tous les aspects de sécurité et d'efficacité obtenus dans un modèle de grand animal qui reflètent valablement le scénario humaine d'infarctus du myocarde (IM). Les porcs sont largement utilisés à cet égard, car leur taille cardiaque, hémodynamique, et l'anatomie coronaire sont proches de celle de l'homme. Ici, nous présentons un protocole efficace en utilisant le modèle MI porcine en utilisant un thorax fermé ballon coronaire occlusion de l'artère interventriculaire antérieure (AIA), suivie d'une reperfusion. Cette approche est basée sur 90 min d'ischémie myocardique, induisant grand ventricule gauche du myocarde de la partie antérieure, septale et murs inféroseptal. En outre, nous présentons des protocoles pour diverses mesures de résultats qui offrent un large éventail d'informations sur le cœur, comme systolique cardiaque et la fonction diastolique, hemodynamics, de la vitesse d'écoulement coronaire, la résistance microvasculaire, et la taille de l'infarctus. Ce protocole peut être facilement adapté pour répondre étudier exigences spécifiques pour la validation de nouveaux produits biologiques cardioregenerative à différents stades (c'est à dire directement après l'accident ischémique aigu, dans le cadre subaiguë ou même dans le MI chronique une fois la formation de cicatrices a été complété). Ce modèle fournit donc un outil utile pour étudier translation MI, le remodelage négatif ultérieur, et le potentiel de nouveaux agents cardioregenerative.

Introduction

Infarctus aigu du myocarde (IAM) et de ses séquelles à long terme telles que l'insuffisance cardiaque chronique (ICC) un impact profondément pronostic et la qualité de vie des patients, sans parler des contraintes de coûts élevés imposés sur nos ressources disponibles en santé ^1. La prévalence de CHF dans le monde occidental est estimée à 1-2%, dont environ 60% des cas sont la conséquence de l'AMI en tant que cause primaire ^2. Aux États-Unis seulement, environ 5,7 millions de patients souffrent de CHF soit environ 30 milliards de dollars les coûts annuels des soins de santé en 2008, avec un triple prédit dans la hausse des coûts à 97 milliards de dollars annuellement en 2030 ^1. Pris ensemble, ces chiffres font un argument fort pour la développement de nouveaux traitements cardioregenerative que, pour la traduction rapide, s'appuient sur un grand modèle reproductible et fiable des animaux d'infarctus du myocarde qui imite avec précision le scénario humaine.

Porcs (Sus scrofa) sont de plus en plus utilisés dans les maladies cardiola recherche de lar pour les essais pharmacologiques et toxicologiques ^3. Un des traits les responsables de ce succès comme un outil de recherche translationnelle est leur similitude de la fonction cardiaque et l'anatomie avec le coeur humain de ^4,5. Par exemple, porc rapport cœur-à-corps poids, la taille et la distribution cardiaque de l'anatomie coronarienne ont tous montré remarquablement semblable à l'homme ^4. En outre, le métabolisme des cardiomyocytes, les propriétés électrophysiologiques et la réponse à une insulte ischémique comme AMI ont été signalés à montrer des niveaux élevés d'entente avec le ^6,7 de la situation humaine. En fin de compte, à remplir les critères décrits ci-dessus, un MI-protocole standardisé qui produit MI robuste et durable pour les tests de nouveaux médicaments de recherche (DNR) est nécessaire. Ici, nous présentons un modèle standardisé qui utilise un 90 min à thorax fermé ballon coronaire occlusion de l'artère interventriculaire antérieure gauche (LAD) suivie d'une reperfusion, créant ainsi un infarctus reproductible dansfarction couvrant la anteroapical, septal et des parois inféroseptal du ventricule gauche.

Protocol

Toutes les expériences in vivo ont été menées en conformité avec le Guide pour le soin et l'utilisation des animaux de laboratoire préparés par l'Institut de Laboratory Animal Resources. Des expériences ont été approuvées par le Comité expérimentation animale locale.

1. Médicaments, anesthésie, accès veineux, et intubation

1. Médicaments et anesthésie
   1. Prémédication
      1. Lancer amiodarone 150 mg / kg 10 jours avant une intervention chirurgicale pour éviter des arythmies. Continuer amiodarone à une dose de 100 mg / kg à partir du jour de la procédure jusqu'à ce jour 28. Réduire la dose de 50 mg / kg au jour 29 et continuer jusqu'à la fin de l'étude.
      2. Commencer un traitement anti-plaquettaire, 1 mg / kg de clopidogrel à partir de 3 jours avant la chirurgie et de 4,5 mg / kg d'acide acétylsalicylique 1 jour avant la chirurgie. Continuer clopidogrel 1 mg / kg par jour et de l'acide acétylsalicylique 80 mg / jour.
      3. Médicaments contre la douleur commencer 1 journée avant la chirurgie par le patch de fentanyl, 25ug / h pour ~ 70 kg porcs. Continuer l'utilisation de timbres de fentanyl pendant 24 heures après l'opération afin de s'assurer médicament adéquat de la douleur. En outre, le moniteur quotidiennement aux signes d'inconfort putatif (c.-à-comportement, la respiration, la marche, la mobilité, etc) pour augmenter médicaments contre la douleur.
      4. Jeûner l'animal pendant 12 heures, maintenir un accès illimité à l'eau.
   2. Anesthésie
      1. Pour éviter le stress et l'inconfort inutile, endormir le cochon dans son écurie par injection intramusculaire d'un mélange de midazolam 0,4 mg / kg, la kétamine 10 mg / kg, et de l'atropine 0.014 mg / kg.
      2. Obtenir un accès veineux par canulation de la veine de l'oreille avec un 18 G iv canule. Induire une anesthésie par administration intraveineuse de 5 mg / kg sodiumthiopental, et donner 1000/100 mg d'amoxicilline / acide clavulanique à prévenir les infections. Le cochon recevra amoxicilline acide 1000/100 mg / acide clavulanique le jour après la chirurgie comme traitement antibiotique.
      3. Intuber le cochon en utilisant un endotrachTube eal (taille 8.5 pour les porcs d'un poids ~ 70 kg). Si nécessaire effectuer un ballon de ventilation avec une fréquence de 12/min et transporter le cochon à la salle d'opération.
      4. A l'arrivée sur le théâtre d'opération, commencer immédiatement la ventilation mécanique à pression positive avec _FiO2 0,50, 10 ml / kg volume courant, et une fréquence de 12/min sous capnographie continue.
      5. Lancer anesthésie équilibrée par perfusion intraveineuse continue d'une combinaison de midazolam 0,5 mg / kg / h, le sufentanil 2,5 microg / kg / h et le pancuronium bromure de 0,1 mg / kg / h. Pendant toute l'opération, surveiller en permanence ECG, pression artérielle, la température et la capnographie pour mesurer la profondeur de l'anesthésie. Par exemple, si une tachycardie sinusale est présent, vérifier si le médicament et / ou anesthésie la douleur sont adéquates.
      6. Infuser 4,3 mg / kg d'amiodarone dans 500 ml venofundin 6% par voie intraveineuse.
      7. Surveillance du rythme cardiaque par un 5 conduit ECG.
      8. Raser et nettoyer le cou et derrière limb zone.
      9. Insérer un cathéter de Foley.

2. Échocardiographie transthoracique

1. Placez l'animal dans la position latérale droite. Chez les porcs Landrace tels que les porcs Dalland que des vues parasternales (long et court axe) peuvent être obtenus. En raison de la forme du thorax, de l'acquisition de la vue apicale n'est pas réalisable.
2. Orient et obtenir vue de grand axe parasternale en 2D (mode B). Déterminer les dimensions LV à fin de diastole et systole fin en mode M.
3. Tourner la sonde d'écho de 90 ° vers la droite tout en maintenant sa position parasternale d'acquérir les vues LV petit axe au niveau de la valve mitrale, muscle papillaire et le sommet. Le point de vue de l'axe court du muscle papillaire et de sommet peut nécessiter le placement de la sonde d'écho d'un ou deux espaces intercostaux inférieurs par rapport à la position de l'axe court du point de vue de la valve mitrale.

3. Accès Préparation et vasculaire chirurgicale

1. Disinfect les domaines chirurgicaux avec de l'iode 2% et utiliser des champs opératoires stériles pour couvrir les parties non stériles du porc.
2. Faire une incision médiane dans le cou. Passer la ligne blanche pour minimiser les dommages musculaires et carrément aborder l'artère carotide et la veine jugulaire interne à côté de la trachée.
3. Isoler soigneusement l'artère carotide et la veine jugulaire interne. Assurez-vous que le nerf vagal est en bon état. Placez sutures Vicryl 2-0 autour des deux navires de prendre le contrôle du navire. Réaliser l'accès artériel par canulation de l'artère carotide interne avec une gaine 8F en utilisant la technique de Seldinger. Fixer la gaine de l'artère, assurez-vous que l'artère n'est pas entièrement fermé par la suture. Accès veineux peut être acquise par canulation de la veine jugulaire avec une gaine de 9F également en utilisant la technique de Seldinger. Avant de fixer la gaine assurez-vous que la veine est ligaturé. En variante, l'artère fémorale peut également être utilisé pour l'accès artériel.
4. Administrer 100 IE / kg d'héparine immédiatement après l'insertion de la gainehs pour inhiber la formation de thrombus.
5. Pour une mesure de la pression artérielle stable et constante, cathétériser une des plus petites artères dans l'une des pattes arrière par une petite incision au-dessus de l'artère. L'artère se trouve juste sous la peau, pulsations peuvent être ressentis à travers la peau. Isoler l'artère de son tissu environnant. Placez 2 sutures Vicryl 2-0 dans le navire, une proximale et distale 1. Ligaturer le côté distal et insérer une canule 18 G iv et bien serrer connecter la pression.

4. Pression invasive Analyse volume de la boucle

1. Insérer un cathéter Swann-Ganz (SG) par l'intermédiaire de la gaine préalablement placé dans la veine jugulaire interne.
2. Connectez un périphérique de sortie cardiaque à la partie de la SG, qui culmine dans la lumière proximale.
3. Injecter 5 ml de solution saline à 0,9% dans la lumière proximale de la SG et de mesurer le débit cardiaque; répéter ce trois fois et la moyenne des indices.
4. Calibrer le système de PV à l'aide précédemmentdébit cardiaque déterminé.
5. Insérez la conductance cathéter 7F via l'artère carotide dans le ventricule gauche sous guidage fluoroscopique.
6. Sélectionnez le segment le plus présent dans le LV pour les mesures de volume et d'effectuer un balayage de référence sous apnée.
7. Après le calibrage de volume est complété, record 10-15 bat sous apnée.
8. Retirez le SG et placer un cathéter à ballonnet dans la veine cave inférieure au niveau de la membrane sous guidage fluoroscopique.
9. Effectuer la réduction de la précharge en gonflant le ballon sous apnée et enregistrer les PV-boucles correspondantes.

5. Pression intracoronaire et les mesures de débit

1. Diluer la nitroglycérine en une concentration de 100 pg / ml et diluer l'adénosine à une concentration de 30 pg / ml.
2. Positionner un cathéter de guidage 8F dans l'ostium de l'artère coronaire gauche.
3. Placez le fil combinée pression / débit dans la partie proximale de la coronaire gauche Artery.
4. Administrer 200 mg de nitroglycérine intracoronaire et normaliser la pression distale (Pd), mesuré par le fil, de la pression artérielle.
5. Placez le fil dans la partie médiane de la descendante antérieure gauche artère (LAD).
6. Commencer à mesurer la pression de référence et le débit. Provoquer hyperémie en administrant 60 mg de intracoronaire d'adénosine, rincer avec 2 ml de solution saline et de mesurer la pression et le débit d'hyperémie. Attendez que le flux de restaurer aux valeurs de base. Répéter deux fois la mesure.
7. Infuser une autre nitroglycérine intracoronaire 200 ug et répétez les étapes 1.6 et 1.7 pour l'artère coronaire circonflexe gauche.

6. L'induction de MI

1. Placer le cathéter intracardiaque de défibrillation dans le ventricule droit en utilisant la gaine veineuse. Les électrodes distales doivent être dans l'apex du ventricule, les électrodes proximales dans l'oreillette et / ou de la veine cave supérieure. Branchez le cathéter au défibrillateur et réglez-le sur 50J.
2. Mesurer le diamètre de l'extrémité distale de la DAL de la deuxième diagonale (D2) en AP et AJO 30 ° vue.
3. Choisir un ballonnet d'angioplastie ayant un diamètre suivant le diamètre de la partie distale de la LAD D2 (figure 1).
4. Placez un fil de guidage à travers le cathéter de guidage distale de la DAL.
5. Avancer le cathéter à ballonnet sur le guide. Placer le ballon distal de l'D2.
6. Administrer 30 IE / kg d'héparine.
7. Gonflez le ballon jusqu'à ce que la pression correspond à la droite diamètre de la LAD.
8. Vérifier l'occlusion totale de l'artère interventriculaire antérieure par angiographie (figure 1).
9. Couvrir le champ de travail stérile et la blessure dans le cou avec des tissus de rideaux stériles. Libérez la poitrine de toute couverture de la rendre disponible pour les compressions thoraciques ou transthoracique défibrillation.
10. Vérifier la pression dans le ballon au cours de la prochaine 90 min et de rétablir la pression si nécessaire.
11. En cas de fibrillation ventriculaire:
    1. Commencer immédiatement les compressions thoraciques avec une fréquence de 100/min.
    2. Administrer 300 mg d'amiodarone par voie intraveineuse en bolus rapide (~ 1 min).
    3. Lancer défibrillation intracardiaque, donner des chocs de 50 J.
    4. Après 5 chocs infructueuses, redémarrez compressions thoraciques. Changer défibrillation intracardiaque à la défibrillation transthoracique et choc 150 J. En cas de choc échec, passer à 200 J.
    5. Si nécessaire, administrer une autre dose de 150 mg Amiodaron et / ou 1 mg d'adrénaline. Répétez l'adrénaline deux fois avec des intervalles de 3-5 minutes, lorsque cela est nécessaire.
    6. Continuer les compressions thoraciques, entrecoupées de défibrillation transthoracique

Fin de l'intervention chirurgicale (pour suivi à long terme)

1. Après 90 min chèque par angiographie si la DAL est encore totalement occulté.
2. Administrer un autre 30 IE / kg d'héparine et dégonfler le ballon. Vérifiez la reperfusion. Retirer le ballon dégonflé avec le GUIDtion cathéter de la gaine de la carotide.
3. Retirez délicatement la gaine artérielle et bloquer l'artère carotide immédiatement avec une pince à anastomose (figure 1). Utilisez toujours des points (6-0) prolène à fermer l'artère carotide. Retirez la pince et contrôler les fuites.
4. Retirer le cathéter de défibrillation interne et retirer la gaine de la veine jugulaire interne. Proximale de ligation de l'entrée de la gaine.
5. Fermez le tissu sous-cutané et la peau du cou en deux couches en utilisant 2-0 Vicryl.

7. Cardiaque imagerie par résonance magnétique

1. Placez l'animal sur la tête de la table IRM premier en position couchée sous anesthésie continue.
2. Placez une bobine cardiaque à balayage électronique dédiée sur la poitrine de l'animal.
3. Pour la planification de l'image obtenir des images de scouts dans l'axe court et deux chambres grand axe de vues.
4. Acquérir l'état d'équilibre précession libre ECG-gated (SSFP) cine de l'axe court (de sommet à la base de LV) et deux chamber vues de grand axe.
5. Gadolinium tardif (LGE) peut être obtenu à l'aide d'une reprise d'inversion 3D-turbo-gradient-écho-technique 15 min après avoir double-dose par injection intraveineuse en bolus d'un agent de contraste à base de gadolinium base.
6. Effectuer une analyse hors-ligne avec le logiciel validé des paramètres fonctionnels. Évaluer ventriculaire gauche fraction d'éjection (FEVG), la masse ventriculaire gauche, le volume télédiastolique, le volume systolique de fin, le volume systolique, le débit cardiaque, et la masse de la cicatrice.

8. Fin d'étude et taille de l'infarctus

1. A la fin de l'étude, respecter les protocoles de 1-5 et 7 pour acquérir de suivi des mesures.
2. Faire une incision médiane 30-40 cm de juste en dessous de la fourchette sternale à un point juste en dessous de l'appendice xiphoïde. Avancez dans la ligne blanche jusqu'au sternum. Diviser la pointe du sternum et utiliser des ciseaux Klinkenberg pour séparer le sternum postérieure du péricarde avec prudence. Après avoir utilisé les ciseaux carrément continuer séparation supplémentaire. Effectuez une sternotomie by par exemple à l'aide d'un marteau et couteau Lebsch. Saignement de la moelle osseuse est réduite au minimum par le frottement de la cire osseuse sur la moelle osseuse. Ouvrez le thorax avec un enrouleur de sternum.
3. Entrez le 3ème espace pleural et de localiser la veine cave inférieure dans le médiastin.
4. Humainement euthanasier l'animal en coupant la veine cave inférieure sous anesthésie profonde. Éliminer le sang avec un dispositif d'aspiration. Placez une pile de 9 V sur le sommet d'induire une fibrillation ventriculaire.
5. Après excision du coeur, couper la droite et ventricule gauche en cinq tranches de la base au sommet et incubées dans 1% de chlorure de triphényl-tétrazolium dissous dans une solution saline à 0,9% à 37 ° C pendant 15 min. Ensuite, laver les tranches dans une solution saline à 0,9% et de photographier les tranches des deux côtés.

Representative Results

La mortalité et la taille de l'infarctus

Dans notre centre, sur 32 porcs (Femme Dalland Landrace, âgé de 6 mois, ~ 70 kg) qui ont été soumis à ce protocole MI, cinq (15,6%) sont morts en raison de réfractaire fibrillation ventriculaire pendant l'ischémie. Ce protocole crée un infarctus couvrant approximativement 10 à 15% du ventricule gauche, située dans le antéroseptale, septal et des parois inféroseptal (Figure 2A). Si l'évaluation non invasive de série de taille de l'infarctus est justifiée, la fin de gadolinium (LGE) sur CMR peut être utilisé pour suivre la zone de l'infarctus non viable dans le temps (figure 2B).

La fonction cardiaque et le remodelage

Quatre semaines après MI, paramètres globaux et régionaux reflétant la fonction cardiaque doit être diminué par rapport aux valeurs de base sains. Plus précisément, la fraction d'éjection du VG (FEVG) devrait diminuer à environ ~ 35-45%, quatre semaines après la MI. Outre la fonction globale systolique,plusieurs paramètres reflétant post-IM remodelage négatif peuvent également être mesurés, comme LV morphologie et diamètres en utilisant CMR et l'échocardiographie (figures 3A et 3B). Quatre semaines après MI, une augmentation de volume télédiastolique (EDV) comme un signe de remodelage négatif peut être prévu (figures 3A et 3B).

Paramètres de débit et de pression coronaires

Angiogenèse et la formation de nouveaux capillaires sont souvent considérées comme des objectifs de traitement importants dans la cardiopathie ischémique ^8. Évaluation de la résistance microvasculaire peut reposer indirectement sur la mesure combinée de la pression intra-coronarienne et la vitesse d'écoulement. Pression représentant et la mesure de la vitesse d'écoulement dans des conditions et hyperémie maximale normale est montré dans la figure 4. Quatre semaines après MI, la résistance microvasculaire hyperémique devrait être augmenté dans l'artère coronaire de l'infarctus liés (DAL) par rapportà la situation de référence ^8.

. Figure 1 modèle MI (A) basé sur LAD ballon occlusion matériel chirurgical standard avec:. 1) pinces à serviettes; 2) les moustiques; 3) pince à disséquer; 4) récipient rond; 5) porte-aiguilles (fine et grossière); 6) Klinkenberg scissor; 7) disséquer des ciseaux (droites et courbes); 9) pince (De-Bakey, fine et grossière); 10) collier de serrage; 11) anastomose pince; 12) gazes; 13) crayon électro; 14) porte-scalpel; 15) Dreesman (aspiration); 16) enrouleur; 17) supports de lampe. (B) gauche antérieure vue fluoroscopique oblique de la LAD et la LCX. (C) Après la visualisation de la deuxième branche diagonale, placez les deux marqueurs radio-opaques (voir encadré, pointes de flèches noires) du ballon juste distale de la D2. Inflate et veiller à ce que le débit sanguin coronaire est bloqué avec succès par injection de contraste (voir l'astérisque). Intracardiaque défibrillateur plomb peut être vu dans le ventricule droit (voir flèche blanche). CONT dénote gauche artère interventriculaire antérieure; LCX dénote artère circonflexe gauche; AJO dénote antérieure gauche vue oblique; AP dénote antérieure vue postérieure; D1 représente la première branche diagonale; D2 dénote deuxième branche diagonale. Cliquez ici pour agrandir l'image.

Figure 2. Taille de l'infarctus après un IM. (A) Le 90 min ballon occlusion de la LAD conduit à des dommages du myocarde et la formation de cicatrices (de couleur blanche), visualisés par coloration TTC à 1 mois de suivi.(B) Schéma de la distribution de l'infarctus du myocarde montre que l'on trouve à la partie antérieure, et inféroseptal antéroseptale segments du cœur. (C, D) axe court et à long retard gadolinium images CMR améliorées montrent la vaste cicatrice de l'infarctus (blanc de signal, voir flèches noires) localisée dans la partie antérieure, segments antéroseptale et inféroseptal du cœur. LGE-CMR dénote fin gadolinium renforcée par résonance magnétique cardiaque. La barre d'échelle représente 3 cm. Cliquez ici pour agrandir l'image.

Figure 3. Évaluation de la fonction cardiaque dans des modèles MI ischémiques. (A) représentant CMR images ciné-boucle à la fin de diastole et systole fin montrant une déficience fonctionnelle de l'infsegments CRAT cicatrice. (B) l'image en mode M de 2D grand axe parasternale par échocardiographie, montrant dilatation du VG (augmentation LVIDd) 1 mois après un IM, ainsi que l'incapacité fonctionnelle (absence de septum épaississement). EDV dénote volume de fin de diastole; ESV dénote volume systolique de fin; LVIDd dénote diamètre interne du ventricule gauche à la diastole et LVIDs dénote diamètre interne du ventricule gauche à la systole. Cliquez ici pour agrandir l'image.

Figure 4. Intracoronaire vitesse de pression et le débit dérivé paramètres. Pression intracoronaire et enregistrements de vitesse d'écoulement à l'aide du Combowire montrant valeurs (A) de référence antérieures à MI avec de hauts response à l'hyperémie (tête de flèche noire). (B) 1 mois après un IM, l'infarctus liés artère (DAL) a une réponse hyperémique diminué la vitesse du flux coronaire (têtes de flèches noires). En conséquence, la pression et la vitesse d'écoulement des paramètres dérivés (HMR) ou écoulement réserve de vitesse (CFR) sont réduites par rapport à la ligne de base. BAPV dénote vitesse de pointe moyenne de base; pAPV dénote vitesse de pointe moyenne de pointe; CFR dénote la réserve coronaire; HMR dénote résistance microvasculaire hyperémique. Cliquez ici pour agrandir l'image.

Figure 5. Vue d'ensemble des différents plans d'étude. (A) Schéma de plusieurs conceptions possibles de l'étude afin de valider de nouveaux médicaments expérimentaux(DI) à différents stades de MI en utilisant ce modèle de porc CONT MI. En fonction de la phase choisie de MI qui est sous enquête, l'analyse fonctionnelle peut être réalisée juste avant la répartition des traitements comme la valeur de référence et l'évaluation de la zone à risque. Cliquez ici pour agrandir l'image.

Discussion

Intracoronaire ballon occlusion de la LAD fournit un modèle MI préclinique et reproductible chez le porc qui peut être utilisé pour étudier l'innocuité et l'efficacité de nouvelles thérapies cardiovasculaires qui imite de près la situation humaine. Comme le montre la figure 5, le modèle d'ischémie du myocarde / reperfusion présenté fournit la plate-forme qui peut être en outre adapté pour étudier différentes phases du MI et de post-MI tandis que le remodelage de la lésion d'ischémie / reperfusion initiale est identique pour les deux.

Le succès du protocole décrit décrite ici dépend de l'ischémie du myocarde en tant que phase la plus critique du protocole. Placement correct du ballonnet distal de la deuxième branche diagonale de la DAL est crucial pour atteindre une taille suffisante de l'infarctus tout en assurant un taux de survie élevé. Sur la base de ce modèle MI, a observé un taux de mortalité ~ 15%, tandis que vaste milieu et segments apical de la partie antérieure, septale et de moindre qualitéou murs étaient d'un infarctus comme on le voit sur ​​la CMR et la coloration TTC (Figures 2A et 2B). La durée de l'ischémie peut être adaptée en fonction de la taille de l'infarctus souhaitée. Bien que nous ayons utilisé des porcs Landrace dans ce protocole, les cochons nains (c.-à-minicochons Göttingen) nécessitent généralement de plus longues durées d'ischémie myocardique (par exemple, 150 min d'occlusion).

analyse des résultats des études précliniques et cliniques MI est souvent basée sur la FEVG. Bien que la FEVG inférieure a été fermement associée à un risque accru de mortalité cardiovasculaire, il reste dépendant de paramètres hémodynamiques tels que la précharge ^9. On peut dire que, étant donné que, en moyenne, seulement 10-15% de la LV est atteint d'un infarctus, plusieurs limites conceptuelles et pratiques sont liées à la FEVG est une mesure globale de la fonction systolique VG plutôt que de refléter l'amélioration locale ^10. Par conséquent, les mesures proposées de résultat utilisée dans ce modèle mettent en lumière différents aspects de MI et post-IM remodelage fournissant ainsi aux enquêteurs les moyens d'évaluer avec précision l'efficacité de nouveaux traitements sur plusieurs niveaux.

Pour optimiser la traduction de modèles précliniques pour la pratique clinique, nous choisissons l'aide de grands porcs au lieu de cochons nains. Mesures hémodynamiques, les doses de médicaments et d'instruments chirurgicaux peuvent facilement être échangés à la pratique clinique. Par rapport à cochons nains, cochons géants gagnent relativement beaucoup de poids. Cela peut poser un problème dans le long terme le suivi, en ce qui concerne la comparabilité des résultats de série. Femme porcs Landrace Dalland pèsent environ 70 kg à l'âge de 6 mois. Pour prévenir le gain de poids abondante pendant la période de suivi, les animaux sont gardés à un régime restreint. Les porcs reçoivent 750 g de fait sur les aliments basses calories (contenant: protéines 15,6%, lipides 2,0%, des fibres de 14,8%, cendres 8,8%, le calcium 0,9%, phosphore 0,57%, le magnésium de 0,29%, et de potassium 0,18%) deux fois par jour et gagner environ 10 kg de poids en 4 semaines.

e_content "> McCall et ses collègues ont déjà publié un protocole similaire pour l'infarctus du myocarde chez les porcs ^11. chevauchement considérable existe entre ce protocole et le leur, soulignant la préférence pour le LAD plutôt que l'artère circonflexe gauche (LCX) ou l'artère coronaire droite (RCA ). D'après notre expérience, il est dans une moindre mesure de la taille de l'infarctus du ventricule gauche total en utilisant le LCX alors que le myocarde RCA est accompagné avec de meilleures chances de troubles de la conduction indésirables (c'est à dire de la dysfonction du nœud sinusal, le dysfonctionnement AV-noeud). Une différence entre les deux protocoles se rapporte à l'utilisation de l'augmentation de l'inhibition plaquettaire pharmacologique dans ce protocole, comme nous l'avons observé des taux plus élevés de non-reperfusion sur la base de la formation de thrombus à la suite de 90 min de l'hémostase dans l'artère coronaire occluse. Cette observation est en accord avec hypercoagulabilité connue observé chez les porcs ^12. Bien que McCall a proposé d'utiliser un seul, à haute dose, bolus d'héparine, this protocole repose sur l'utilisation de l'héparine en faibles doses multiples réparties dans la chirurgie pour réduire au minimum les complications thrombotiques.

En résumé, nous présentons un modèle MI porcine qui permet aux chercheurs de faire usage d'une pratique grand modèle de la maladie humaine animale efficace, reproductible et surtout d'étudier de nouveaux traitements comme une étape essentielle vers une première chez l'homme essai clinique.

Materials

Name	Company	Catalog Number	Comments
0.9% Saline	Braun
6-0 Prolene	Ethicon
Acetylsalicylic acid	Ratiopharm		80 mg
Adenosine	Apotheek UMCU		3 mg/ml
AdVantage PV loop system	Transonic Science
Amiodarone	Cordarone I.V. (Sanofi)
Amiodaron HCl (PCH)
Amoxicilline/clavulaanzuur	Sandoz		500/50 mg
Atropinesulfate	PCH		0.5 mg/ml
Bone Marrow Wax	Syneture
Cardiac Defibrillator	Philips
Clopidogrel	Apothecon B.V.		Clopidrogel 75A
Contrast agent	Telebrix
Endotracheal tube	Covidien
Fentanyl patch	Durogesic (Janssen-Cilag)		25 μg/hr
Fogarty catheter	Edwards Life Sciences
Gadolinium	Gadovist
Guidewire	Abbott
Heparin	Leo
I.V. cannula	Abbocath (Hospira Venisystems)
Iodine	Jodiumtictuur 2% (Eurovet)
Ketamine	Narketan 10 Vétoquinol
Midazolam	Actavis		5 mg/ml
Nitroglycerin	Pohl Boskamp		1 mg/ml
Pancuronium bromide			2 mg/ml
Seldinger vascular sheath 8F	Arrow
Sufentanil	Sufentanil-Hameln		50 μg/ml
Swann-Ganz catheter	Criticath ref 680078 (Argon)
Synolux	Pfizer		250 mg
Tetra-polar catheter	Transonic Science
Thiopental	Inresa		0.5 g
Triphenyl-tetrazolium chloride	Merck
Venofundin	Braun
Vicryl 2-0	Ethicon
Volcano ComboMap system	Volcano