Summary

Bruke Farmakologisk Manipulasjon og høy presisjon Radio Telemetri å studere Spatial Cognition i frittgående dyr

Published: November 06, 2016
doi:

Summary

Dette notatet beskriver en roman protokoll som kombinerer farmakologisk manipulasjon av hukommelse og radiotelemetri å dokumentere og kvantifisere rolle kognisjon i navigasjon.

Abstract

Et dyrs evne til å oppfatte og lære om miljøet spiller en sentral rolle i mange atferdsmessige prosesser, herunder navigasjon, migrasjon, spredning og beite. Imidlertid er forståelsen av hvilken rolle erkjennelse i utviklingen av navigasjons strategier og mekanismene bak disse strategiene begrenset av de metodiske vanskelighetene involvert i overvåking, manipulere erkjennelse av, og sporing ville dyr. Denne studien beskriver en protokoll for å ta rollen som kognisjon i navigasjon som kombinerer farmakologisk manipulering av atferd med høy presisjon radiotelemetri. Tilnærmingen benytter skopolamin, en muskarinisk acetylcholin reseptor-antagonist, for å manipulere kognitive romlige evner. Behandlede dyr blir deretter overvåket med høy frekvens og høy romlig oppløsning via fjern triangulering. Denne protokollen ble brukt i en befolkning på Eastern malt skilpadder (Chrysemys picta) som har beboddsesong flyktige vannkilder for ~ 100 år, flytting mellom far-off kilder ved hjelp av presise (± 3,5 m), kompleks (dvs. ikke-lineær med høy tortuosity som krysser flere habitater), og forutsigbare ruter lært før 4 års alder. Denne studien viste at prosessene som brukes av disse skilpaddene er konsistente med romlig minne dannelse og tilbakekalling. Sammen utgjør disse resultatene er konsistent med en rolle romlig erkjennelse i komplekse navigasjon og markere integrering av økologiske og farmakologiske teknikker i studiet av kognisjon og navigasjon.

Introduction

Cognition (her definert som "alle prosesser som er involvert i å anskaffe, lagring og bruk av informasjon fra omgivelsene" 1) er sentral i en rekke komplekse navigasjon oppgaver 2. For eksempel, et kraner (Grus canadensis) viser en markert bedring i trekkfugl presisjon med erfaring 3, og havskilpadde arter forlaget på sine fødsels strender som hatchlings og tilbake som voksne 4-6. Tilsvarende til vellykket migrering, spredning, og beite hengsel på et dyrs evne til å samle informasjon om deres romlige omgivelser 7,8. Noen dyr ser ut til å lære navigasjons ruter i forhold til konkrete landskapet funksjoner 9 og kan bruke romlig erkjennelse når du flytter mellom hekke og furasjeringsområder 10. Nyere arbeider på Eastern gullskilpadde (Chrysemys picta) antyder en kritisk periode i navigasjon, hvor vellykket navigering i høyereliggende habitat som voksne hengsler på juvenile erfaring innenfor et smalt aldersgruppe (<4 år gammel 11-13). Selv sammen disse studiene viser den fremgangen som har blitt gjort for å forstå rollen som læring i navigasjons 4-6, 14-16, hvilke mekanismer som ligger bak slik atferd og full rolle kognisjon i navigasjon forblir gåtefulle, spesielt i virveldyr 8, 17 18.

Feltundersøkelser i rollen som erkjennelse i navigasjons er sjeldne 2, 8, 18, skyldes i stor grad de metodiske vanskeligheter involvert i overvåking, manipulere, og sporing av ville dyr. For eksempel, de store romlige og tidsmessige skalaer som mange dyr navigerer ofte til hinder for å undersøke både type informasjon som disse dyrene potensielt lære og hvordan denne informasjonen er ervervet. Forskere ofte møter de logistiske vanskeligheter med å oppdage og finne dyr når overvåking atferd over så store områder og tidsrammer, og dermed begrense den typeav data som kan samles og de konklusjoner som kan trekkes. Selv om bruken av dyr montert Global Positioning System (GPS) opptakere kan forbedre sannsynligheten for påvisning av allment spenner dyr, romlige data innsamlet av disse midlene er generelt av svært grov oppløsning og mangler en detaljert atferdsmessige komponenten. Følgelig, de data som kan samles under slike omstendigheter er av begrenset verdi for å undersøke subtil variasjon i adferd mellom ulike grupper eller utprøvende behandling. Tilsvarende er det direkte og kontrollert manipulering av målet atferd ofte forbudt av de romlige og tidsmessige skalaer typisk for navigasjon atferd, samt av iboende logistiske begrensninger av feltstudier. Finne dyr i deres naturlige habitat, fange og manipulere dem, og deretter samle atferdsdata uten utilsiktet å produsere falske atferd er store utfordringer med å jobbe med dyr i feltet. Derfor utforming av eksperimenter på free rekk dyr er ofte begrenset og evnen til å gjennomføre strenge, kontrollerte feltforsøk på seg rollen som kognisjon i navigasjon er begrenset.

Denne studien omgår mange av de tidligere vanskelighetene med å undersøke forholdet mellom kognisjon og navigasjon i felt ved hjelp av en ny kombinasjon av farmakologisk manipulasjon og høy oppløsning sporing av fritt navigere dyr under feltforhold. Scopolamin, et muskarin acetylcholin reseptor (mAChR) antagonist, har vist seg å blokkere romlig hukommelse dannelse og tilbakekalling ved å blokkere kolinerg aktivitet i hjernen til en rekke vertebrat taksa 18-24. Skopolamin kan brukes effektivt på frittgående dyr under feltforhold 11, 18 og har en markert, men midlertidig effekt (for eksempel 6-8 timer i reptiler). Metylskopolamin, en mAChR antagonist som ikke krysser blod-hjerne-barrieren 19-21, kan anvendes for å kontrollere formulige perifere effekter av skopolamin og for ikke-kognitive aspekter av atferd 11. Farmakologi gir mulighet for nøyaktig manipulering av kognisjon ved direkte påvirker reseptorer, og høy presisjon radiotelemetri tillater observasjon av de resulterende effekter på oppførsel. Målinger som er tatt gjennom triangulering fjern med både høy romlig (± 2,5 m) og tidsmessig (15 min) oppløsning gir mulighet for nøyaktig dokumentasjon og kvantifisering av dyrs atferd i forhold til den eksperimentelle manipulering av kognisjon.

Denne studien 11 ble gjennomført mellom mai og august 2013 og 2014 Chesapeake Farms, en 3300 acre viltforvaltning og landbruksforskningsområde i Kent Co, MD, USA (39,194 ° N, 76,187 ° W). Protokollen innebærer fem hovedtrinn: (1) å fange og håndtering dyr (2) anbringelse radiosendere (3) Utarbeidelse av farmakologiske midler (4) overvåking og manipulere dyr bevegelser, og (5) analyserende geodata. Studien beskrevet her fokusert på den østlige malt turtle (Chrysemys picta). Turtles i det sentrale befolkningen deltar i årlige overland bevegelser der de forlater sine hjem dammer og navigere til alternative akvatiske habitater hjelp av en av fire svært presis (± 3,5 m), komplekse og svært forutsigbare ruter 11, 12. Farmakologisk manipulering av dyr i dette systemet sammen med høy oppløsning radiotelemetri belyser rollen kognisjon i fritt navigere ville dyr.

Protocol

Alle prosedyrer som involverer dyr fag ble godkjent av Institutional Animal Care og bruk komiteer av Franklin og Marshall og Washington Høyskoler og fulgt alle lokale, statlige og føderale forskrifter. 1. Capture og håndtering Plasser bøyle feller i målet vannmasse som er kjent for å inneholde skilpadder. Identifisere vanndyp at 4 – 5 inches av fellen holder seg over vannet for å tillate fanget skilpadder til overflaten og puste. Vær sikker på å utvide og sikre hoop feller til sitt maksimale…

Representative Results

Ved hjelp av de ovennevnte protokollen, ble rollen som kognisjon i navigasjon vurdert i en befolkning på Eastern malt skilpadder (Chrysemys picta) som har opplevd sesong flyktige vannkilder for ~ 100 år. Dette befolkningen bor i en blanding av flyktig (drenert årlig og raskt – i flere timer) og permanente akvatiske habitater (figur 1). Tidligere studier tyder på at etter deres dammer er drenert, bosatt skilpadder navigere til alternative vannkilder med høy …

Discussion

Protokollen presenteres her gjør at eksperimentator å dokumentere og kvantifisere rolle kognisjon i navigasjon. Manipulere kognisjon i feltet har vist seg vanskelig, da de fleste tilnærminger la forskere klarer å vite hvilke spesifikke aspekter av dyrets atferd blir manipulert. Men protokollen presenteres her gjør at eksperimentator nøyaktig manipulere og dermed vurdere rollen til kognisjon i navigasjon. Teknikken tillater videre forskere å overvåke dyr navigasjon i sanntid med eksepsjonelt høy romlig og tidsme…

Disclosures

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

This research was funded by Washington College’s Provost’s Office, Middendorf Fund, Hodson Trust, and Franklin and Marshall’s Hackman Fund and College of Grants. We thank E. Counihan, S. Giordano, F. Rauh, and A. Roth for assistance in the field. We thank M. Conner, R. Fleegle, and D. Startt at Chesapeake Farms, and Chino Farms for permission and access. The Washington College GIS Program helped with the preparation of maps.

Materials

Scopolamine bromide Sigma S0929 USP
Scopolamine methylbromide Sigma S8502, 1421009 USP and non USP versions
Saline Hanna Pharmaceutical Supply Co., Inc. 409488850 USP, formulated as an injectable 
Syringe filter Fisher 09-720-004
Syringe Fisher 14-823-30
Hypodermic needle Fisher 14-823-13
Antenna Wildlife Materials 3 Element Folding Yagi Antennae with additional elements are available, but can be cumbersome in the field. 
Radio Receiver Wildlife Materials TRX-2000S Water resistant models are also available.
Compass Brunton  Truarc 15
Radio transmitters Holohil Inc. BD-2, PD-2, RI-2B Transmitter models vary in lifespan and signal output as a function of battery size and pulse rate settings, which can be customized based on the study question and organism.
GPS Garmin eTrex Venture
Coaxial cable newegg.com C2G 40026 BNC connections are necessary.
Hoop net Memphis Net and Twine  TN325 Net mesh size should be chosen based on the minimum size of the target animal. 

References

  1. Shettleworth, S. J. . Cognition, Evolution and Behavior. , (2010).
  2. Bingman, V. P., Cheng, K. Mechanisms of animal global navigation: comparative perspectives and enduring challenges. Ethol. Ecol. Evol. 17, 295-318 (2005).
  3. Mueller, T., O’Hara, R. B., Converse, S. J., Urbanek, R. P., Fagan, W. F. Social Learning of Migratory Performance. Science. 341, 999-1002 (2013).
  4. Putman, N. F., et al. An inherited magnetic map guides ocean navigation in juvenile Pacific salmon. Curr. Biol. 24, 446-450 (2014).
  5. Lohmann, K. J., Putman, N. F., Lohmann, C. M. F. Geomagnetic imprinting: a unifying hypothesis of natal homing in salmon and sea turtles. Proc. Natl. Acad. Sci., USA. 105, 19096-19101 (2008).
  6. Fuxjager, M. J., Davidoff, K. R., Mangiamele, L. A., Lohmann, K. J. The geomagnetic environment in which sea turtle eggs incubate affects subsequent magnetic navigation behaviour of hatchlings. Proc. R. Soc. B. 281, 1218-1225 (2014).
  7. Shettleworth, S. J. The evolution of comparative cognition: is the snark still a boojum. Behav. Processes. 80, 210-217 (2009).
  8. Fagan, W. F., et al. Spatial memory and animal movement. Ecol. Lett. 16, 1316-1329 (2013).
  9. Collett, T. S., Graham, P. Insect Navigation: Do Honeybees Learn to Follow Highways. Curr. Biol. 25, 240-242 (2015).
  10. Menzel, R., et al. Honey bees navigate according to a map-like spatial memory. Proc. Natl. Acad. Sci., USA. 102, 3040-3045 (2005).
  11. Roth, T. C., Krochmal, A. R. Pharmacological Evidence is Consistent with a Prominent Role of Spatial Memory in Complex Navigation. Proc. R. Soc. B. 283, 20152548 (2016).
  12. Roth, T. C., Krochmal, A. R. The role of age-specific learning and experience for turtles navigating a changing landscape. Curr. Biol. 25, 333-337 (2015).
  13. Krochmal, A. R., Roth, T. C., Rush, S., Wachter, K. Turtles outsmart rapid environmental change: the role of cognition in navigation. Comm. Integr. Biol. , (2015).
  14. Thorup, K., et al. Evidence for a navigational map stretching across the continental U.S. in a migratory songbird. Proc. Natl. Acad. Sci., USA. 104, 18115-18119 (2007).
  15. Lohmann, K. J., Lohmann, C. M. F., Putman, N. F. Magnetic maps in animals: nature’s GPS. J. Exp. Biol. 210, 3697-3705 (2007).
  16. Collett, M., Chittka, L., Collett, T. S. Spatial Memory in Insect Navigation. Curr. Biol. 23, 789-800 (2013).
  17. Foden, W., Vié, J. C., Hilton-Taylor, C., Stuart, S. N., et al. Species susceptibility to climate change impacts. The 2008 Review of The IUCN Red List of Threatened Species. , (2008).
  18. Kohler, E. C., Riters, L. V., Chaves, L., Bingman, V. P. The Muscarinic Acetylcholine Antagonist Scopolamine Impairs Short-Distance Homing Pigeon Navigation. Physiol. Behav. 60, 1057-1061 (1996).
  19. Powers, A. S., Hogue, P., Lynch, C., Gattuso, B., Lissek, S., Nayal, C. Role of Acetylcholine in negative patterning in turtles (Chrysemys picta). Behav. Neurosci. 123, 804-809 (2009).
  20. Petrillo, M., Ritter, C. A., Powers, A. S. A role for Acetylcholine in spatial memory in turtles. Physiol. Behav. 56, 135-141 (1994).
  21. Klinkenberg, I., Blokland, A. The validity of scopolamine as a pharmacological model for cognitive impairment: A review of animal behavioral studies. Neurosci. Biobehav. Rev. 34, 1307-1350 (2010).
  22. Pradhan, S. N., Roth, T. Comparative behavioral effects of several anticholinergic agents in rats. Psychopharm. (Berlin). 12, 358-366 (1968).
  23. Harvey, J. A., Gormezano, I., Cool-Hauser, V. A. Effects of scopolamine and methylscopolamine on classical conditioning of the rabbit nictitating membrane response. J. Pharmacol. Exp. Therap. 225, 42-49 (1983).
  24. Evans, H. L. Scopolamine effects on visual discrimination: modifications related to stimulus control. J. Pharmacol. Exp. Therap. 195, 105-113 (1975).
  25. Dreslik, M. J., Phillips, C. A. Turtle communities in the upper midwest, USA. J. Freshwater Ecol. 20, 149-164 (2005).
  26. Sexton, O. J. A method of estimating the age of painted turtles for use in demographic studies. Ecology. 40, 716-718 (1959).
  27. Wilson, D. S., Tracy, C. R., Tracy, C. R. Estimating age of turtles from growth rings: a critical evaluation of the technique. Herpetologica. 59, 178-194 (2003).
  28. Kenward, R. E. . A Manual for Wildlife Radio Tagging. , (2000).
  29. Jones, D. N. C., Higgins, G. A. Effect of scopolamine on visual attention in rats. Psychopharm. 120, 142-149 (1995).
  30. Araujo, J. A., Nobrega, J. N., Raymond, R., Milgram, N. W. Aged dogs demonstrate both increased sensitivity to scopolamine impairment and decreased muscarinic receptor density. Pharmacol. Biochem. Behav. 98, 203-209 (2011).
  31. Greggor, A. L., Clayton, N. S., Phalan, B., Thornton, A. Comparative cognition for conservationists. Trends Ecol. Evol. 29, 489-495 (2014).
  32. Roth, T. C., Krochmal, A. R. Cognition-centered conservation as a means of advancing integrative animal behavior. Curr. Opinion Behav. Sci. 6, 1-6 (2015).
  33. LaDage, L. D., Roth, T. C., Cerjanic, A. C., Sinervo, B., Pravosudov, V. V. Spatial memory: Are lizards really deficient. Biol. Lett. 8, 939-941 (2012).

Play Video

Cite This Article
Roth, T. C., Krochmal, A. R., Gerwig, IV, W. B., Rush, S., Simmons, N. T., Sullivan, J. D., Wachter, K. Using Pharmacological Manipulation and High-precision Radio Telemetry to Study the Spatial Cognition in Free-ranging Animals. J. Vis. Exp. (117), e54790, doi:10.3791/54790 (2016).

View Video