Vi presenterar en ortotop aorta transplantation modell med ärm-tekniken hos möss. Det är en mycket snabb anastomos metod, som kan användas i studier av vaskulär sjukdom.
Ortotop aorta transplantation med ärm-tekniken minskar skador på aorta med Felfrekvens för bara 10-20%. Tid att anastomose aorta i möss med metoden sleeve var kort och enkelt genomsnitt 20 min, tillåter studier av iso/allo ympkvistar. Följande artikel beskriver det aorta transplantation förfarande används i vårt laboratorium. Mössen var bedövas med en blandning av 1,5% volym isofluran och 100% syre genom en ansiktsmask. Vid denna punkt, segmentet av aorta mellan njurartärerna och dess bifurkation avskildes från vena cava, fritt beredd och clampedat proximala och distala segment med en enda silk sutur. Före avlägsnande av aorta injicerades en saltlösning som innehåller heparin i den sämre vena cava. Då aorta sänktes mellan klämmorna och en saltlösning heparin lösning användes att spola lumen. Ärm tekniken med monofilament suturer användes för att transplantera bukaorta i ortotop position.
Som påpekat i en tidigare studie, har stor uppmärksamhet ägnats åt murina aorta transplantation modeller som tillåter diskriminering mellan specifika vaskulär reaktioner orsakade av graften själv och vissa systemiska faktorer i samband med en arteriogenic miljö 1 , 2 , 3. den viktigaste faktorn som spelar en avgörande roll här är tillgången på knockout och transgena möss. Deras deltagande i en sådan modell erbjuder möjligheten att identifiera och fastställa nya patofysiologiska vägar är associerad med utveckling av degenerativa kärlsjukdom, såsom åderförkalkning och aneurysm bildas4, 5.
Det är värt att notera att skada till fartyg avsedda för transplantation kan visas under ympning en inneboende ischemi/reperfusion. Därför kan förekomsten av specifika problem med transplantat integritet eller en oväntad inflammatorisk reaktion under den postoperativa perioden uteslutas genom att eventuellt utesluter patofysiologiska förändringar i degenerativa vaskulära sjukdomar3 ,4,5,6,7. Ärm anastomos är den alternativa slut i metoden för arteriell anastomos för fartyg med en diameter på mindre än en millimeter och har tillämpats i njur- och hjärt transplantation hos råttor som anpassades därefter till aorta benmärgstransplantation hos möss av Dambrin et al. 8 , 9 , 10 , 11.
Aorta skador med ärm transplantation teknik minimeras med en mycket låg teknisk felfrekvens, på grund av det varar bara 20 min i genomsnitt. Våra tidigare resultat har visat utmärkta funktionella och strukturella egenskaper i en isograft i vivo efter transplantation använder ärm teknik1. Dambrin et al. beskriver som efter en kort inlärningskurva framgång var över 78%10. Komplikationer såsom trombos är sällsynta, till exempel Engelbrecht et al. inte iakttog trombos med ärm-tekniken i njurtransplantation i råtta8.
Murina aorta transplantation modellen med ärm anastomoser är en snabb och lätt verktyg att studera iso/transplantatavstötning reaktioner i transplanterade fartyget. Denna video illustrerar det aorta transplantation förfarande som utförs i vårt laboratorium. Denna transplantation modell kan vara användbara i att definiera de underliggande patologiska mekanismerna av vaskulär degenerativ sjukdom och kan bidra till ytterligare utvärdering av molekylära och farmakologiska interventioner12.
Innan denna studie var olika andra transplantation modeller hos möss grundligt analyserade3,6,7,10,13,14. Modell av aorta transplantation med ärm-tekniken med ändringar av Dambrin et al. valdes som det matchade våra kriterier och visade en hög tillförlitlighet av ärm anastomos i jämförelse med konventionella end-to-end sutur metoder 1 , 10.
Denna teknik är gynnsamt på många sätt med cross-clamp tid minskat betydligt minimerar skadorna på aorta under operation. En låg incidens av trombos observerades förutom att undvika en potentiell felmatchning i fartyg kaliber mellan givaren och mottagaren. Ovanstående gör denna teknik mycket lämplig för att utreda kärlsjukdom i aorta transplantationer hos möss.
I en uppföljande studie där ett ultraljud utfördes 8 veckor efter transplantation, upptäcktes inga betydande förändringar. Detta bekräftade antaganden att eventuella skador på aorta under operation skulle vara minimal1.
Det ympning förfarande som presenteras i denna artikel garanterar ingen försämring både i transplantat integriteten och dess funktion. Slutsatsen kan därför dras att denna experimentella transplantation modell kan tjäna som ett värdefullt verktyg för framtida molekylär och farmakologiska undersökningar av degenerativa fartyget sjukdom hos genetiskt modifierade möss.
Vi anser att den video guiden kan fungera som undervisningsmaterial som åskådliggör denna enkla arterio-arteriella modell och att den kommer att bidra till ytterligare givande debatt på många viktiga frågor i vaskulära sjukdomar. Denna mycket snabba anastomos metod kan användas att studera kärlsjukdom i genetiskt modifierade möss. Det kan också användas som en ändring i aneurysmet modellen kombineras med transplantation.
Det finns kritiska punkter under förfarandet. Utsläppande av suturen själv är det mest kritiska steget. Kirurgen måste vara noga med för att undvika någon vridning av aorta vid korrekt justering av givare och mottagare. Klämmorna avlägsnas noggrant efter inspektion av anastomos. Den distala klämman ska alltid släppas först vilket resulterar i lågtryck håller väggarna tillsammans före proximala högtrycks sida utgivningen. Konsekvensen av att inte riktigt följer release skulle blödning.
The authors have nothing to disclose.
Vi vill tacka Roma Wieczorek och Peter Kurdybacha för deras utmärkta redigering hjälp, och Leon Decker och Uli Heuter för deras utmärkta tekniskt bistånd.
Halsey Needle Holder | Fine Science Tools | 12001-13 | |
Dumont #5-45 Forceps | Fine Science Tools | 11251-35 | |
Dumont #5 Forceps – | Fine Science Tools | 11254-20 | |
Lexer-Baby Scissors | Fine Science Tools | 14079-10 | |
Castroviejo Micro Needle Holder | Fine Science Tools | 12060-01 | |
Vannas Scissors | Aesculap, Germany | Typ OC498R | |
Castroviejo Suture Forceps | Geuder, Germany | 19015 | |
6-0 silk black (Silk) | Deknatel, Research Triangle Park NC, USA | 18020-60- FST | |
11-0 monofilament (Ethilon) | Ethicon, Norderstedt, Germany | EH7438G | |
3-0 polyglycolic acid suture (Serafit) | Serag-Wiessner, Naila, Germany | 60203214 | |
Isofluorane | Any genericon | ||
Heparin | Any genericon | ||
0.9% saline | Any genericon | ||
Buprenorphine | Any genericon | ||
Bepanthene eye and nose cream | Bayer, Germany | ||
Microscop | Zeiss | Opmi MDO/S5 | |
Vaporiser | Eickemeyer | TEC3 | |
Ultrasound | Vevo, Canada | 770,2100 |