Nous présentons un modèle d’aortique transplantation orthotopique utilisant la technique de la manche chez les souris. C’est une méthode très rapide d’anastomose, qui peut être utilisée dans les études des maladies vasculaires.
Une transplantation orthotopique aortique en utilisant la technique du manchon réduit la lésion de l’aorte avec taux d’échec de seulement 10-20 %. Le temps d’effectuer l’anastomose entre l’aorte chez la souris à l’aide de la méthode de la manche a été courte et facile avec une moyenne de 20 min, permettant des études des greffons d’iso/allo. L’article suivant décrit la procédure de transplantation aortique utilisée dans notre laboratoire. Les souris ont été anesthésiés avec un mélange d’isoflurane volume de 1,5 % et 100 % d’oxygène à travers un masque visage. À ce stade, le segment de l’aorte entre les artères rénales et sa bifurcation a été séparé de la veine cave supérieure, librement établi et clampedat les segments proximaux et distaux avec une suture de soie unique. Avant le retrait de l’aorte, une solution saline contenant de l’héparine a été injectée dans la veine cave inférieure. Puis l’aorte a été coupé entre les mâchoires et une solution saline de l’héparine a été utilisée pour rincer la lumière. La technique du manchon avec sutures monofilament a été utilisée afin de l’aorte abdominale en position orthotopique de transplantation.
Comme indiqué dans une étude antérieure, grande attention a été portée aux modèles murins greffe aortique qui permettent la discrimination entre les réponses vasculaires spécifiques causées par la prothèse elle-même et certains facteurs systémiques liés à un environnement arteriogenic 1 , 2 , 3. le principal facteur qui joue un rôle crucial ici est la disponibilité de masquage et de souris transgéniques. Leur implication dans un tel modèle offre la possibilité d’identifier et de déterminer de nouvelles voies physiopathologiques associés au développement des maladies vasculaires dégénératives, telles que l’athérosclérose et anévrisme formation4, 5.
Il est à noter que durant une ischémie/reperfusion intrinsèque de la greffe des blessures pour les bateaux destinés à la transplantation peuvent apparaître. Par conséquent, l’apparition de problèmes spécifiques avec l’intégrité de la prothèse ou une réaction inflammatoire inattendue au cours de la période post-opératoire ne peut être exclue en excluant éventuellement des changements pathophysiologiques dans les maladies vasculaires dégénératives3 ,4,5,6,7. Anastomose de manche est la méthode alternative de bout en bout pour anastomose artérielle des navires de moins d’un millimètre de diamètre et a été appliquée avec succès dans la transplantation rénale et cardiaque chez des rats qui a été adaptée par la suite à aortique transplantation chez les souris par Dambrin et al. 8 , 9 , 10 , 11.
Dommages aortique en utilisant la technique de transplantation de manchon sont réduit au minimum avec un taux de défaillance technique très faible, parce qu’elle a une durée de seulement 20 min en moyenne. Nos résultats antérieurs ont démontré des excellentes propriétés fonctionnelles et structurelles d’un isograft en vivo après la transplantation à l’aide de la gaine technique1. Dambrin et coll. décrivent qui, après une courbe d’apprentissage courte le taux de réussite était supérieur à 78 %10. Complications telles que la thrombose sont rares, par exemple Engelbrecht et coll. n’ont pas observé de thrombose utilisant la technique de la manche dans la transplantation rénale chez le rat8.
Le modèle murin greffe aortique avec manchon anastomoses est un outil rapid et facile à étudier les réactions d’iso/allogreffe dans le vaisseau greffé. Cette vidéo illustre la procédure de transplantation aortique effectuée dans notre laboratoire. Ce modèle de transplantation peut-être être utile pour définir les mécanismes pathologiques sous-jacents des maladies dégénératives vasculaires et peut-être contribuer à une évaluation plus poussée des interventions pharmacologiques et moléculaires12.
Avant cette étude, divers autres modèles de transplantation chez les souris ont été soigneusement analysées3,6,7,10,13,14. Le modèle de la greffe aortique en utilisant la technique de la manche sous réserve de modifications par Dambrin et coll. a été choisi car il correspond à nos critères et ont montré une grande fiabilité de l’anastomose de manches par rapport aux méthodes conventionnelles de suture bout à bout 1 , 10.
Cette technique est favorable à bien des égards avec croix-pince temps réduit considérablement réduisant au minimum les dommages causés à l’aorte pendant la chirurgie. Une faible incidence de thrombose a été observée en plus éviter une incompatibilité possible au calibre du navire entre le donneur et le receveur. Les observations qui précèdent rendent cette technique hautement adaptées pour enquêter sur les maladies vasculaires dans les transplantations aortiques chez les souris.
Dans une étude de suivi dans laquelle une échographie a été réalisée à 8 semaines après la transplantation, aucune variation significative n’est détectées. Cela a confirmé les hypothèses que tout dommage causé à l’aorte au cours de la chirurgie serait minime1.
Le greffage procédure présentée dans cet article garantit sans altération dans l’intégrité de la prothèse et sa fonction. Par conséquent, on peut conclure que ce modèle de transplantation expérimentales peut-être constituer un outil précieux pour de futures études moléculaires et pharmacologiques de la maladie des vaisseaux dégénératives chez des souris génétiquement modifiées.
Nous pensons que le guide vidéo peut fonctionner comme matériel illustrant l’utilisation de ce modèle simple d’arterio-artériel d’enseignement et qu’il contribuera à plus fructueux débat sur plusieurs questions importantes dans les pathologies vasculaires. Cette méthode anastomose très rapide peut être utilisée pour étudier les maladies vasculaires chez des souris génétiquement modifiées. Il peut également être utilisé comme une modification dans le modèle d’anévrisme combinée à la transplantation.
Il y a des points critiques au cours de la procédure. La mise de la suture elle-même est l’étape la plus critique. Le chirurgien doit prendre soin d’éviter toute torsion de l’aorte par un alignement correct du donneur et du receveur. Les pinces sont soigneusement retirés après inspection de l’anastomose. La pince distale doit toujours être libérée entraînant d’abord basse pression tenant les murs ensemble avant la libération proximale côté haute pression. La conséquence de pas correctement suite à la séquence de sortie pourrait être saignement.
The authors have nothing to disclose.
Nous tenons à remercier Roma Wieczorek et Peter Kurdybacha pour leur aide montage excellent et Leon Decker Uli Heuter pour leur assistance technique excellente.
Halsey Needle Holder | Fine Science Tools | 12001-13 | |
Dumont #5-45 Forceps | Fine Science Tools | 11251-35 | |
Dumont #5 Forceps – | Fine Science Tools | 11254-20 | |
Lexer-Baby Scissors | Fine Science Tools | 14079-10 | |
Castroviejo Micro Needle Holder | Fine Science Tools | 12060-01 | |
Vannas Scissors | Aesculap, Germany | Typ OC498R | |
Castroviejo Suture Forceps | Geuder, Germany | 19015 | |
6-0 silk black (Silk) | Deknatel, Research Triangle Park NC, USA | 18020-60- FST | |
11-0 monofilament (Ethilon) | Ethicon, Norderstedt, Germany | EH7438G | |
3-0 polyglycolic acid suture (Serafit) | Serag-Wiessner, Naila, Germany | 60203214 | |
Isofluorane | Any genericon | ||
Heparin | Any genericon | ||
0.9% saline | Any genericon | ||
Buprenorphine | Any genericon | ||
Bepanthene eye and nose cream | Bayer, Germany | ||
Microscop | Zeiss | Opmi MDO/S5 | |
Vaporiser | Eickemeyer | TEC3 | |
Ultrasound | Vevo, Canada | 770,2100 |