Vi presenterer en protokoll for bruk av etanol som et løsemiddel og karakterisere taiwanske grønne propolis som viser antibakteriell aktivitet.
Taiwanske grønne propolis er rik på prenylated flavonoider og utstillinger et bredt spekter av biologiske aktiviteter, for eksempel antioksidant, antibakterielle, og anticancer seg. Bioaktive forbindelser av taiwanske grønne propolis er propolins, nemlig C, D, F og G. Konsentrasjonen av propolins i taiwanske grønne propolis varierer avhengig av sesong og geografisk plassering. Derfor er det viktig å etablere en standard og repeterbare prosedyre for å bestemme kvaliteten på taiwanske grønne propolis. Her presenterer vi en protokoll som bruker etanol-baserte utvinning, høy ytelse flytende kromatografi og en antibakteriell aktivitetsanalyse for å karakterisere taiwanske grønne propolis kvalitet. Denne metoden angir at 95% og 99,5% etanol utdrag oppnå maksimal tørr saken avkastningen fra taiwanske grønne propolis, og dermed gir de høyeste konsentrasjonene av propolins som har antibakterielle egenskaper. Ifølge disse funnene som nåværende protokollen pålitelig og repeterbare for å bestemme kvaliteten på taiwanske grønne propolis.
Propolis er en naturlig resinous blanding produsert av bee arten APIene mellifera. Propolis har vært mye brukt siden antikken i folk medisiner. En studie nylig rapportert at propolis er gunstig for å forebygge mikrobielle infeksjoner og betennelse1. Mange studier har vist at de viktigste bioaktive forbindelsene i propolis er flavonoider, fenoliske syre estere, prenylated p-coumaric syrer og diterpenic syren2,3. Hittil har 10 prenylated flavanone derivater fra taiwanske grønne propolis identifisert gjennom høy ytelse flytende kromatografi (HPLC)4,5,6,7. Den mest tallrike blant disse er propolins C, D, F og G5,7. Betydelig biologiske effekter av taiwanske grønne propolis er korrelert med dens høye innhold av propolins8.
Konsentrasjonen av bioaktive forbindelser i propolis variere avhengig av sesong og geografisk plassering som propolis er oppnådd. Europeiske propolis inneholder hovedsakelig flavonoid aglycone og fenoliske syrer9. Store bioaktive forbindelser i propolis fra Brasil er prenylated p-coumaric syrer, for eksempel artepillin C10. En studie viste at sesongen er en kritisk faktor for å bestemme det totale propolin innholdet i taiwanske grønne propolis11. Propolin innholdet i taiwanske grønne propolis er høyest i sommer (mai – juli) og lavest i vinter11. Antibakterielle eiendom propolis har blitt kjent som en indikator på biologiske aktivitet. Vanligvis har prøver av propolis fra ulike regioner vist en lignende antibakterielle eiendom; for eksempel det er vanligvis effektiv mot nesten alle gram-positive bakteriene og utstillinger en begrenset antibakteriell effekt mot gram-negative bakterier10,12,13. Synergistisk interaksjoner mellom flavonoider i propolis ble vist for å ha en antibakteriell effekt14. Tilsvarende ble taiwanske grønne propolis rapportert å ha en antimikrobiell effekt mot gram-positive bakteriene15. Videre identifisert en studie også en antimikrobiell effekt fra samspillet av propolins i taiwanske grønne propolis8.
Karakterisering av bioaktive forbindelser i propolis er vanskelig fordi dens kjemiske sammensetning kan variere avhengig av kilden opprinnelsesland. Derfor er det nødvendig å etablere en mulig og repeterbare metode for å bestemme kvaliteten på den Taiwanske grønne propolis. Men er ingen standard prosedyre etablert for taiwanske grønne propolis utvinning og påfølgende funksjonell analyse. Flere metoder som blant annet bruker organiske og uorganiske løsemidler foreslått for propolis utvinning16,17,18,19,20. Propolis er en lipofile blanding, har studier vist at organisk utvinning er bedre enn uorganiske utvinning8,18,19. Den totale propolin konsentrasjonen i taiwanske grønne propolis og antibakterielle egenskaper er viktige indikatorer for kvaliteten på taiwanske grønne propolis. Dermed er formålet med denne studien å presentere en protokoll for bruk av etanol som et løsemiddel og prege det antibacterial eiendom av taiwanske grønne propolis.
En studie rapportert at maserasjon, bruker ulike konsentrasjoner av etanol, kan brukes for brasilianske propolis utvinning17; prosessen var imidlertid tidkrevende17. Det tok minst 10 dager å trekke bioaktive forbindelser, for eksempel fenoliske innhold, fra brasilianske propolis17. Alternativt har etanol utvinning i kombinasjon med ved 37 ° C, 50 ° C eller 70 ° C i 30 min blitt foreslått for utpakking brasilianske propolis19</s…
The authors have nothing to disclose.
Dette manuskriptet ble redigert av Wallace akademiske redigering.
ethanol | Sigma-Aldrich | E7023 | |
Whatman no. 4 filter paper | Sigma-Aldrich | WHA1004125 | |
methanol | Sigma-Aldrich | 34860 | |
reverse phase RP-18 column | Phenomenex Inc. | 00G-0234-E0 | |
Staphylococcus aureus | ATCC | BCRC 10780 | |
Escherichia coli | ATCC | BCRC 10675 | |
tryptic soy broth | Sigma-Aldrich | 22092 | |
nutrient broth | Sigma-Aldrich | 70122 | |
dimethyl sulfoxide | Sigma-Aldrich | D2650 | |
spice grinder | Waring | WSG60K | |
microplate Reader | Molecular Devices | EMAX PLUS | |
HPLC system | Agilent | 1200 Series | |
vacuum evaporation | BÜCHI | Rotavapor R-215 |