Login processing...

Trial ends in Request Full Access Tell Your Colleague About Jove

Biochemistry

חילוץ וניתוח של פרופוליס ירוק מטייוואן

doi: 10.3791/58743 Published: January 7, 2019

Summary

אנו מציגים פרוטוקול להצפנה באמצעות אתנול כמו הממס כדי לחלץ לאפיין פרופוליס ירוק מטייוואן זה מוצגים אנטיבקטריאלי.

Abstract

פרופוליס ירוק מטייוואן עשיר prenylated פלבנואידים ותערוכות במגוון רחב של פעילויות ביולוגיות, כגון נוגדי חמצון, אנטי בקטריאלי, ואת אלה נגד סרטן. Bioactive תרכובות של פרופוליס ירוק מטייוואן הם propolins, כלומר C, D, F ו- G. הריכוז של propolins ב פרופוליס ירוק מטייוואן משתנה בהתאם העונה והמיקום הגיאוגרפי. לפיכך, חיוני להקים הליך סטנדרטי, הדיר לקביעת האיכות של פרופוליס ירוק מטייוואן. כאן, אנו מציגים פרוטוקול העושה האתנול מבוססי החילוץ, כרומטוגרפיה נוזלית ביצועים גבוהים, ניתוח פעילות נגד חיידקים לאפיון איכות פרופוליס ירוק מטייוואן. שיטה זו מציינת כי 95% ו- 99.5% אתנול עקירות להשיג את היבול המרבי חומר יבש של פרופוליס ירוק מטייוואן, ובכך מניב הריכוזים הגבוהים ביותר של propolins יש תכונות אנטיבקטריאליות. על פי ממצאים אלה, בפרוטוקול הנוכחי נחשבת הדיר לקביעת האיכות של פרופוליס ירוק מטייוואן ואמין.

Introduction

or Start trial to access full content. Learn more about your institution’s access to JoVE content here

פרופוליס הוא תערובת שרפי הטבעי המיוצר על ידי דבורה המין בומבוס. פרופוליס כבר בשימוש נרחב מאז ימי קדם בפולק תרופות. מחקר דיווח לאחרונה שכי הפרופוליס הינו מועיל למניעת זיהומים חיידקים, דלקת1. מחקרים רבים הראו כי תרכובות ביו הראשי של פרופוליס הם פלבנואידים, בעל תאים פנוליים אסטרים חומצה, prenylated p-חומצות coumaric ו- diterpenic חומצות2,3. עד כה, זוהו prenylated 10 flavanone נגזרות של פרופוליס ירוק מטייוואן באמצעות כרומטוגרפיה נוזלית ביצועים גבוהים (HPLC)4,5,6,7. הנפוץ ביותר בקרב אלה הם propolins C, D, F ו- G5,7. השפעות ביולוגיות ניכר של פרופוליס ירוק מטייוואן נמצאים בקורלציה עם שלה תכולה גבוהה של propolins8.

הריכוזים של תרכובות ביו בפרופוליס משתנים במידה רבה בהתאם העונה והמיקום הגיאוגרפי שממנו מתקבל פרופוליס. פרופוליס האירופית מכיל בעיקר פלבנואיד אגליקון ו בעל תאים פנוליים חומצות9. תרכובות ביו העיקריים של פרופוליס מברזיל הם prenylated p-חומצות coumaric, כגון artepillin C10. מחקר הוכיח כי העונה הוא גורם קריטי בקביעת התכנים propolin הכולל פרופוליס ירוק מטייוואן11. התוכן propolin הטייוואנית פרופוליס ירוק הוא הגבוה ביותר בחודשי הקיץ (מאי - יולי), הנמוך ביותר חורף11. המאפיין אנטיבקטריאלי של פרופוליס נחשב באופן נרחב כדי להיות מחוון פעילות ביולוגית. בדרך כלל, הדגימות של פרופוליס שנאספו מאזורים שונים שכישוריי אנטיבקטריאלי נכס דומה; לדוגמה, זה בדרך כלל יעילה כנגד כמעט כל חיידקים גראם חיוביים ותערוכות השפעה אנטי-בקטריאלי מוגבלת נגד חיידקים גראם שליליים10,12,13. האינטראקציות סינרגטי בין פלבנואידים ב פרופוליס היו הפגינו יש השפעה אנטי-בקטריאלית של14. באופן דומה, פרופוליס ירוק מטייוואן דווח להשפיע מיקרוביאלית כנגד חיידקים גראם חיוביים15. יתר על כן, מחקר זיהה גם אפקט מיקרוביאלית של פעולת הגומלין בין propolins פרופוליס ירוק מטייוואן8.

האפיון של תרכובות ביו של פרופוליס קשה בגלל ההרכב הכימי שלה יכולה להשתנות, בהתאם למקורו של המקור. לכן, זה הכרחי ליצור שיטה אפשרית הדיר לקביעת איכות פרופוליס ירוק מטייוואן. עם זאת, אין נוהל הוקם עבור חילוץ פרופוליס ירוק מטייוואן, אנליזה פונקציונלית עוקבות. מספר שיטות החלות ממיסים אורגניים ואנאורגניים בדרכים שונות הוצעו פרופוליס החילוץ16,17,18,19,20. כי הפרופוליס הינו תערובת lipophilic, מחקרים הראו החילוץ אורגני עדיף אורגניים החילוץ8,18,19. ריכוז propolin הכולל פרופוליס ירוק מטייוואן, שלה תכונות אנטיבקטריאליות הם מחווני מפתח של האיכות של פרופוליס ירוק מטייוואן. לפיכך, מטרת מחקר זה היא להציג פרוטוקול להצפנה באמצעות אתנול כמו הממס כדי לחלץ לאפיין את תכונות אנטיבקטריאליות של פרופוליס ירוק מטייוואן.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Protocol

or Start trial to access full content. Learn more about your institution’s access to JoVE content here

1. הכנת תרכובות אתנול, חילוץ

  1. שוקלת 10 גרם של קפואים פרופוליס ירוק מטייוואן, אשר נאסף מתוך כוורות בטייוואן ממאי עד יולי, לטחון אותו באמצעות את מטחנת תבלינים. לאשר כי כל פיסות פרופוליס ירוק מטייוואן הם הקרקע לאבקה בסדר בלי שום חלקיקים גדולים.
  2. להוסיף 100 מ של ריכוזים שונים של אתנול (60%, 70%, 80%, 95% ו- 99.5%) ומים נפרדים מבחנות ולערבב כל ריכוז עם 10 גרם פרופוליס הקרקע.
  3. דגירה 25 ° c, לנער את הבקבוק בהישג 250 סל"ד במשך 48 שעות.
  4. לסנן את תמציות אתנול דרך מסנן נייר עם גודל הנקבוביות 25 μm.
  5. לשקם את filtrates כדי שלהם לאמצעי האחסון המקורי (100 מ"ל) עם אתנול 95% באמצעות על סטריליות.
  6. חנות שהאתנול תמציות ב-20 ° C.
    הערה: הפרוטוקול אפשר לעצור כאן.

2. הכנה של אתנול תמציות HPLC

  1. רכז 10 מ"ל אתנול תמציות בשל התאיידות ואקום ב 40 מעלות צלזיוס למשך 15 דקות.
  2. אופים את העניין יבש ב 45 מעלות צלזיוס במשך 24 שעות ביממה.
  3. לשקם את העניין יבש עם 10 מ"ל אתנול 95%.
  4. מסנן 1 מ"ל אתנול תמציות באמצעות מסנן סטרילי מזרק עם גודל הנקבוביות 0.45 מיקרומטר.
  5. לסנן מחדש תמציות אתנול באמצעות מסנן סטרילי מזרק עם גודל הנקבוביות 0.22 מיקרומטר. פילטרט של שנאספו, ניתן ישירות לנתח באמצעות HPLC.

3. ניתוח התוכן Propolin באמצעות HPLC

  1. הקמתה של עקומות סטנדרטית של propolins
    1. להכין 1 ליטר בשלב ניידים של פתרון מתנול: מים 88.8:11.2 (וי/v).
    2. להכין דילולים טורי של propolin ריכוז רגיל (C, D, F ו- G) (15.625 מ"ג/מ"ל, 31.25 מ"ג/מ"ל, 62.5 מ"ג/מ"ל ו- 125 מ"ג/מ"ל, בהתאמה) באמצעות הפתרון שלב ניידים כמו הממס.
    3. מזריקים µL 20 של ריכוזים סטנדרטי propolin לתוך העמודה הפוכה-פאזי, ברצף של ריכוז נמוך לריכוז גבוה.
    4. הגדר את העמודה HPLC של 30 מעלות צלזיוס, קצב הזרימה כדי 1 mL/min.
    5. הגדר אורך הגל של הגלאי UV 280 ננומטר וזמן מקליט את 20 דקות.
    6. לנתח את הסטנדרטים לפחות 3 x.
    7. להתוות את התגובה מדידה (ציר y) נגד הריכוז (ציר x) באמצעות חישוב גיליון תוכנה, וליצור עיקול רגיל עם חמוציות או ערך R בריבוע.
  2. ניתוח של אתנול לחלץ s
    1. מזריקים µL 20 של תמציות אתנול המתקבל שלב 2.5 לתוך העמודה הפוכה-פאזי.
    2. הגדר את העמודה HPLC של 30 מעלות צלזיוס, קצב הזרימה כדי 1 mL/min.
    3. הגדר אורך הגל של הגלאי UV 280 ננומטר וזמן מקליט את 20 דקות.
    4. לנתח את הסטנדרטים לפחות 3 x.
    5. חשב את ריכוז propolin תמצית אתנול, באמצעות המשוואה עבור העקומה הסטנדרטי המתקבל שלב 3.1.7 המשתמשת האזור שיא עבור כל propolin.

4. הריכוז המעכב המינימלי וניתוח ריכוז אחרים מינימום

הערה: השיטה microdilution משמש כדי להעריך את היעילות אנטיבקטריאלי של אתנול, חילוץ propolins של פרופוליס ירוק מטייוואן.

  1. הכנת מבחן אורגניזמים
    1. להפשיר את זני חיידקים, Staphylococcus aureus ו- Escherichia coli, , תרבות אותם tryptic סויה מרק, מרק מזין, בהתאמה, ב 37 מעלות צלזיוס במשך 24 שעות ביממה.
    2. המעבר של S. aureus באמצעות ציר סויה tryptic ו- e. coli באמצעות נזיד מזין עבור שני דורות, ואז לחשב את המושבה יוצרי יחידות על ידי ספירת מושבות בודדות על צלחת אגר.
  2. הכנה של אתנול תמציות עבור בדיקות אנטיבקטריאלי
    1. לרכז את תמציות אתנול המתקבל שלב 1.5 על ידי אידוי ואקום ב 40 מעלות צלזיוס למשך 15 דקות.
    2. לשקם את העניין יבש עם דימתיל סולפוקסיד (דימתיל סולפוקסיד) ולהתאים את הריכוז של התמצית כדי 12.8 מ"ג/מ"ל.
    3. לגרום לדילול טורי (ריכוזים: 5, 10, 20, 40, 80, 160, 320 ו µg 640/mL) של אתנול תמציות באמצעות המרק.
  3. הריכוז המעכב המינימלי בדיקות
    1. להוסיף 10 µL של תמציות אתנול מדולל החל 0.156 וכלה µg 640.0/mL לתוך צלחת 96-ובכן.
    2. באמצעות ציר, לכוונן את עוצמת הקול כדי 100 µL, ולתחזק דימתיל סולפוקסיד 5% על כל דילולים.
    3. לחסן µL 100 התרבות חיידקי (1 x 106/mL) המשקולת 96-ובכן.
    4. תרבות inoculum המכילים ריכוזים שונים של אתנול תמציות ב 37 מעלות צלזיוס במשך 48 שעות.
    5. לנתח את התפתחות חיידקים על פי צפיפות אופטית (microplate קורא) עכירות ושימוש ב- 590 nm לקביעת הריכוז המעכב המינימלי (MIC).
  4. ריכוז אחרים מינימום בדיקות
    1. לחסן µL 10 של תרבות נוזלי מכל קידוח של הבדיקה מיקרופון זה הציג אין צמיחה על גבי צלחת אגר.
    2. דגירה ב 37 מעלות צלזיוס במשך 24 שעות ביממה.
    3. לקבוע את פעילות אחרים על-ידי זיהוי הריכוז הנמוך ביותר שגילה אין התפתחות חיידקים גלוי. ריכוז שלגמרי מבטלת צמיחת תאים נחשב ריכוז חיידקי מינימלי (MBC).

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Representative Results

or Start trial to access full content. Learn more about your institution’s access to JoVE content here

נציג נתונים חיוביים להפקת אתנול מוצגים בטבלה1. התשואה חומר יבש של פרופוליס ירוק מטייוואן היה קשור באופן חיובי הריכוז של אתנול. תמציות אתנול 95% ו- 99.5% היה החומר היבש הגבוה ביותר תשואה של פרופוליס ירוק מטייוואן. התשואה חומר יבש הנמוכה מפרופוליס ירוק מטייוואן אירעה כאשר המים שימש הממס החילוץ. תוצאות אלו מצביעות על העובדה הממס האורגני, כגון אתנול, מבצעת הטוב לחילוץ פרופוליס ירוק מטייוואן. האות של תקן propolins C, D, F ו- G זוהה, לכמת באמצעות HPLC (איור 1 א'). האות של propolins ב תמציות אתנול התאפיינה באמצעות תקנים בודדים propolin ו- HPLC (איור 1b). בדרך כלל, הריכוז של propolins (C, D, F ו- G) בפרופוליס ירוק מטייוואן קשורה באופן חיובי ריכוז האתנול במהלך החילוץ (טבלה 1). התשואה הגבוהה ביותר של propolins ב פרופוליס ירוק מטייוואן מיוצר תמציות אתנול 95% ו- 99.5%.

נציג נתונים חיוביים עבור אפקט אנטיבקטריאלי של אתנול תמציות מוצגים בטבלה מס ' 2. פעילות נגד חיידקים נגד S. aureus ו e. coli תמציות אתנול נבחנו. המיקרופון ואת MBC של אתנול תמציות עבור S. aureus הממוצע היו 10-20 µg/mL ו- 20 µg/mL, בהתאמה (טבלה 2). תמציות מים לא היו השפעות אנטיבקטריאליות נגד S. aureus (טבלה 2). אין השפעה אנטי-בקטריאלית ב e. coli נצפתה עם כל אחד האתנול או מים תמציות (טבלה 2).

Figure 1
איור 1: זיהוי של propolins ב פרופוליס ירוק מטייוואן. הלוחות הללו מראים () סטנדרטים של propolins ו- (b) את המדידה של propolins הטייוואנית פרופוליס ירוקים באמצעות HPLC. דמות זו שונתה מ. חן ואח 8. אנא לחץ כאן כדי להציג גירסה גדולה יותר של הדמות הזאת.

הממס * תשואה (%) Propolin (C + D + F + G)
(mg/mL)
99.5% EtOH 66.75 ± 0.5* * 36.73 ± 0.80
95% EtOH 66.25 ± 0.50 37.55 ± 1.29
80% EtOH 64.75 ± 0.96b 34.25 ± 0.71b
70% EtOH 63.25 ± 0.96c 31.53 ± 0.31c
60% EtOH 59.00 ± 1.41d 29.34 ± 1.59d
מים 7.00 ± 0.82e ND * * *

טבלה 1: יבש עניין התשואה (%) ואת תוכן propolin (מ"ג/מ"ל) בפרופוליס ירוק מטייוואן חילוץ באמצעות ממסים שונים. * 10 גר' פרופוליס שהופק באמצעות 100 מ של הממס, תמציות היו סוף סוף מחדש עד 100 מ"ל. * * הערכים הם הממוצע ± סטיית התקן (SD). -e כלומר בתוך עמודה יש לא עילי נפוצים הם שונים באופן משמעותי (P < 0.05). ND = לא זוהה. טבלה זו שונתה מ. חן ואח 8.

תמצית Staphylococcus aureus Escherichia coli
מיקרופון (µg/mL) MBC (µg/mL) מיקרופון (µg/mL)
99.5% EtOH 10 20 > 640
95% EtOH 10 20 > 640
80% EtOH 20 20 > 640
70% EtOH 10 20 > 640
60% EtOH 20 20 > 640
מים ND ND ND

בטבלה 2: מיקרופון ו MBC (µg/mL) של תמציות שונות נגד S. aureus ו e. coli. טבלה זו שונתה מ. חן ואח 8.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Discussion

or Start trial to access full content. Learn more about your institution’s access to JoVE content here

מחקר דיווחו כי השרייה, שאורכה, באמצעות ריכוזים שונים של אתנול, יכול לשמש עבור חילוץ פרופוליס ברזילאי17; עם זאת, התהליך היה זמן רב17. זה לקח לפחות 10 ימים כדי לחלץ את תרכובות ביו, כגון תוכן בעל תאים פנוליים, פרופוליס ברזילאי17. לחלופין, הפקת אתנול בשילוב עם חימום 37 ° C, 50 ° C או 70 מעלות צלזיוס למשך 30 דקות הוצע לחילוץ פרופוליס ברזילאי19,21,22. נקבע כי תרכובות ביו בפרופוליס הברזילאי יכול באופן שונה לחלץ בהתאם אחוזי אתנול19. יעילות הפקת תרכובות ביו בפרופוליס עשוי להשתנות בגלל קומפוזיציות כימיים שונים של פרופוליס ברזילאי, פרופוליס ירוק מטייוואן. כאן, אנו מספקים פרוטוקול הדיר ואמין עבור חילוץ פרופוליס ירוק מטייוואן. יכול להיות שנקטפו תרכובות ביו של פרופוליס ירוק מטייוואן תוך יומיים, באמצעות אתנול כמו הממס. ממצא דומה גם תומך בפרוטוקול המובאת כאן וקבעה כי propolins (C, D, F ו- G) של פרופוליס ירוק מטייוואן יכול להיות חילוץ באמצעות אתנול 95% בשילוב עם מיצוי 3 יום23. מחקר נוסף הראה כי 95% אתנול בשילוב עם ה 21 החילוץ הצליח לקצור propolins מ פרופוליס ירוק מטייוואן24. עם זאת, יש לאמת את הריכוז המדויק של propolins אחרי החילוץ אתנול 21 h. החוקרים הציעו כי תהליך חימום מגביר את היעילות החילוץ פרופוליס ברזילאי19,21,22. Propolins של פרופוליס ירוק מטייוואן ניתן לחילוץ על חימום יש לחקור.

אתנול תמציות פרופוליס ירוק מטייוואן יש תופעות אנטי בקטריאלי נגד פתוגנים גראם חיוביים. מכיוון פרופוליס הידרופוביות, מחקרים הראו כי הממס האורגני כגון אתנול הוא הפשר מתאימים פרופוליס החילוץ8,16,17,18,19, 20. מחקרים הראו גם כי ריכוז האתנול מוגברת מוביל יותר שחולצו תרכובות ביו8,17,18,20. בפרוטוקול הנוכחי, מחלצת העניין יבשה מרבי של פרופוליס ירוק מטייוואן התשואות הם נצפו האתנול 95% ו- 99.5%, כמו גם הריכוז הגבוה ביותר של propolins ופעילות אנטי-בקטריאלי.

בפרוטוקול הנוכחי מיועד לחילוץ פרופוליס ירוק מטייוואן באמצעות אתנול, הערכת איכות נעשית על בסיס התוכן של propolins. עם זאת, כמה תרכובות ביו אתנול-לא מסיס בפרופוליס ירוק מטייוואן כראוי אפשרות מבודדים באמצעות פרוטוקול הנוכחי.

הדבר הקריטי ביותר של השיטה ביחס שיטות קיימות היא כי שיטה זו חוסכת זמן יחסית השיטות שהוצעו מחקרים אחרים,17,23. יתר על כן, תמציות אתנול 95% ו- 99.5% של פרופוליס ירוק מטייוואן הציג ריכוז גבוה של propolins ופעילות אנטיבקטריאליים.

גישה זו יש יישומים ישירה עבור אפיון אחרים תרכובות ביו אתנול-מסיס לא ידוע בפרופוליס ירוק מטייוואן. בנוסף, אתנול תמציות המכילות propolins יכול לשמש לקביעת bioactivities אחרים.

באחד ההליכים ניסיוני מפתח זה להבטיח אחידות פרופוליס ירוק מטייוואן במהלך שחיקה (פרוטוקול שלב 1.1). שחיקה לא הולם של פרופוליס ירוק מטייוואן יכול להוביל חומר יבש נמוך התשואות ותוכן propolin. זה חיוני כדי להשתמש מנגנון שחיקה המתאים, כגון spice grinder, מטחנת רקמות או מהמגן, וכדי. שמור על עצמך כי פרופוליס הופך אבקה ללא שום חלקיקים גדולים שנותרו לאחר שחיקה.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Disclosures

המחברים יש ריהצהל.

Acknowledgments

כתב יד זה נערך על-ידי עריכה אקדמית וואלאס.

Materials

Name Company Catalog Number Comments
ethanol Sigma-Aldrich E7023
Whatman no. 4 filter paper Sigma-Aldrich WHA1004125
methanol Sigma-Aldrich 34860
reverse phase RP-18 column Phenomenex Inc. 00G-0234-E0
Staphylococcus aureus ATCC BCRC 10780
Escherichia coli ATCC BCRC 10675
tryptic soy broth Sigma-Aldrich 22092
nutrient broth Sigma-Aldrich 70122
dimethyl sulfoxide Sigma-Aldrich D2650
spice grinder Waring WSG60K
microplate Reader Molecular Devices EMAX PLUS
HPLC system Agilent 1200 Series
vacuum evaporation BÜCHI Rotavapor R-215

DOWNLOAD MATERIALS LIST

References

  1. Zabaiou, N., et al. Biological properties of propolis extracts: Something new from an ancient product. Chemistry and Physics of Lipids. 207, (Pt B), 214-222 (2017).
  2. Bankova, V. B., De Castro, S. L., Marcucci, M. C. Propolis: Recent advances in chemistry and plant origin. Apidologie. 31, (1), 3-15 (2000).
  3. Park, Y. K., Alencar, S. M., Aguiar, C. L. Botanical origin and chemical composition of Brazilian propolis. Journal of Agricultural and Food Chemistry. 50, (9), 2502-2506 (2002).
  4. Chen, C. N., Wu, C. L., Shy, H. S., Lin, J. K. Cytotoxic prenylflavanones from Taiwanese propolis. Journal of Natural Products. 66, (4), 503-506 (2003).
  5. Chen, C. N., Weng, M. S., Wu, C. L., Lin, J. K. Comparison of radical scavenging activity, cytotoxic effects and apoptosis induction in human melanoma cells by Taiwanese propolis from different sources. Evidence-Based Complementary and Alternative. 1, (2), 175-185 (2004).
  6. Chen, C. N., Wu, C. L., Lin, J. K. Apoptosis of human melanoma cells induced by the novel compounds propolin A and propolin B from Taiwanese propolis. Cancer Letters. 24, (1-2), 218-231 (2007).
  7. Huang, W. J., et al. Propolin G, a prenylflavanone, isolated from Taiwanese propolis, induces caspase-dependent apoptosis in brain cancer cells. Journal of Agricultural and Food Chemistry. 55, (18), 7366-7376 (2007).
  8. Chen, Y. W., Ye, S. R., Ting, C., Yu, Y. H. Antibacterial activity of propolins from Taiwanese green propolis. Journal of Food and Drug Analysis. 26, (2), 761-768 (2018).
  9. Hegazi, A. G., Abd El Hady, F. K., Abd Allah, F. A. M. Chemical composition and antimicrobial activity of European propolis. Zeitschrift für Naturforschung. 55, (1-2), 70-75 (2000).
  10. Sforcin, J. M., Fernandes, A., Lopes, C. A. M., Bankova, V., Funari, S. R. C. Seasonal effect on Brazilian propolis antibacterial activity. Journal of Ethnopharmacology. 73, (1-2), 243-249 (2000).
  11. Chen, Y. W., et al. Characterization of Taiwanese propolis collected from different locations and seasons. Journal of the Science of Food and Agriculture. 88, (3), 412-419 (2008).
  12. Grange, J. M., Davey, R. W. Antibacterial properties of propolis (bee glue). Journal of the Royal Society of Medicine. 83, (3), 159-160 (1990).
  13. Kujumgiev, A., et al. Antibacterial, antifungal and antiviral activity of propolis from different geographic origins. Journal of Ethnopharmacology. 64, (3), 235-240 (1999).
  14. Krol, W., Scheller, S., Shani, J., Pietsz, G., Czuba, Z. Synergistic effect of ethanol extract of propolis and antibiotics in the growth of Staphylococcus aureus. Drug Research. 43, (5), 607-609 (1993).
  15. Lu, L. C., Chen, Y. W., Chou, C. C. Antibacterial and DPPH free radical-scavenging activities of the ethanol extract of propolis collected in Taiwan. Journal of Food and Drug Analysis. 11, (4), 277-282 (2003).
  16. Tosi, B., Donini, A., Romagnoli, C., Bruni, A. Antimicrobial activity of some commercial extracts of propolis prepared with different solvents. Phytotherapy Research. 10, (4), 335-336 (1996).
  17. Cunha, I. B. S., et al. Factors that influence the yield and composition of Brazilian propolis extracts. Journal of the Brazilian Chemical Society. 15, (6), 964-970 (2004).
  18. Woo, S. O., Hong, I. P., Han, S. M. Extraction properties of propolis with ethanol concentration. Journal of Apicultural Research. 30, (3), 211-216 (2015).
  19. Park, Y. K., Ikegaki, M. Preparation of water and ethanolic extracts of propolis and evaluation of the preparations. Bioscience, Biotechnology, and Biochemistry. 62, (11), 2230-2232 (1998).
  20. Ramanauskienė, K., Inkėnienė, A. M. Propolis oil extract: quality analysis and evaluation of its antimicrobial activity. Natural Product Research. 25, (15), 1463-1468 (2011).
  21. Machado, B. A., et al. Chemical composition and biological activity of extracts obtained by supercritical extraction and ethanolic extraction of brown, green and red propolis derived from different geographic regions in brazil. PLoS One. 11, (1), e0145954 (2016).
  22. Monroy, Y. M., et al. Brazilian green propolis extracts obtained by conventional processes and by processes at high pressure with supercritical carbon dioxide, ethanol and water. The Journal of Supercritical Fluids. 130, 189-197 (2017).
  23. Popova, M., Chen, C. N., Chen, P. Y., Huang, C. Y., Bankova, V. A validated spectrophotometric method for quantification of prenylated flavanones in pacific propolis from Taiwan. Phytochemical Analysis. 21, (2), 186-191 (2010).
  24. Chen, L. H., et al. Taiwanese green propolis ethanol extract delays the progression of type 2 diabetes mellitus in rats treated with streptozotocin/high-fat diet. Nutrients. 10, (4), e503 (2018).
חילוץ וניתוח של פרופוליס ירוק מטייוואן
Play Video
PDF DOI DOWNLOAD MATERIALS LIST

Cite this Article

Chen, C. T., Chien, Y. H., Yu, Y. H., Chen, Y. W. Extraction and Analysis of Taiwanese Green Propolis. J. Vis. Exp. (143), e58743, doi:10.3791/58743 (2019).More

Chen, C. T., Chien, Y. H., Yu, Y. H., Chen, Y. W. Extraction and Analysis of Taiwanese Green Propolis. J. Vis. Exp. (143), e58743, doi:10.3791/58743 (2019).

Less
Copy Citation Download Citation Reprints and Permissions
View Video

Get cutting-edge science videos from JoVE sent straight to your inbox every month.

Waiting X
simple hit counter