Login processing...

Trial ends in Request Full Access Tell Your Colleague About Jove
Click here for the English version

Biology

مقابلة : HIV - 1 الحمض النووي الختان Proviral باستخدام تطورت Recombinase

doi: 10.3791/793 Published: June 16, 2008

Summary

HIV - 1 الحالية استراتيجيات تعمل على قمع دورة حياة الفيروس لكن لا القضاء على نحو فعال من العدوى. هنا ، فإننا يمكن أن تثبت أن recombinase المهندسة الحمض النووي متكاملة بكفاءة المكوس HIV - 1 proviral من الجينوم من الخلايا المصابة.

Abstract

HIV - 1 يدمج مجموعة من كروموسوم الخلايا المصابة واستمرت باعتبارها طليعة الفيروس محاط يكرر محطة الطويلة. استراتيجيات العلاج الحالية تستهدف في المقام الأول الإنزيمات الفيروس أو الفيروس الخلايا الانصهار ، وقمع دورة حياة الفيروس من دون القضاء على العدوى. ربما لأنه لا يستهدف طليعة الفيروس عن طريق هذه المناهج المتكاملة ، وسلالات جديدة من المقاومة HIV - 1 في الظهور. هنا ، ونحن التقرير أن المهندسة recombinase تري (انظر التطور الجزيئي للrecombinase تري ، بوتشولز ، F. ، معهد ماكس بلانك لبيولوجيا الخلية والوراثة ، درسدن) المكوس متكاملة بكفاءة DNA HIV - 1 proviral من الجينوم من الخلايا المصابة. أنتجنا loxLTR pseudotypes الفيروسية والتي تحتوي على خلايا هيلا المصابة إلى دراسة ما إذا كانت تري recombinase يمكن استئصال طليعة الفيروس من جينوم فيروس نقص المناعة البشرية ، 1 خلايا بشرية مصابة. تم استنساخ خط الفيروس الخلية وبين الافراج عن الجسيمات transfected مع البلازميد تري الإعراب أو مع ناقل السيطرة الأبوية. وتم رصد النشاط والانتاج Recombinase الفيروس. أظهرت جميع المقايسات الحذف الفعال للطليعة الفيروس من الخلايا المصابة دون آثار السامة للخلايا مرئية. هذه النتائج بمثابة دليل على المبدأ القائل بأن من الممكن أن نطور recombinase تستهدف بالتحديد على LTR HIV - 1 ، وأن هذا recombinase قادر على استئصال للطليعة الفيروس HIV - 1 من جينوم HIV - 1 - المصابة الخلايا البشرية.

أمام recombinase هندسيا يمكن أن تدخل الساحة العلاجية ، ولكن عقبات كبيرة يتعين التغلب عليها. من بين القضايا الأكثر أهمية ، التي نواجهها ، هي تسليم فعالة وآمنة إلى الخلايا المستهدفة وعدم وجود آثار جانبية.

Protocol

or Start trial to access full content. Learn more about your institution’s access to JoVE content here

الرجاء مشاهدة أشرطة الفيديو ذات الصلة بعنوان مبادئ محددة ، الموقع التكنولوجيا (SSR) Recombinase و التطور الجزيئي للRecombinase تري لمزيد من المعلومات حول إعادة التركيب محددة الموقع والهندسية للموقع خصوصية recombinase الانزيمات.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

مقابلة : HIV - 1 الحمض النووي الختان Proviral باستخدام تطورت Recombinase
Play Video
PDF DOI

Cite this Article

Hauber, J. Interview: HIV-1 Proviral DNA Excision Using an Evolved Recombinase. J. Vis. Exp. (16), e793, doi:10.3791/793 (2008).More

Hauber, J. Interview: HIV-1 Proviral DNA Excision Using an Evolved Recombinase. J. Vis. Exp. (16), e793, doi:10.3791/793 (2008).

Less
Copy Citation Download Citation Reprints and Permissions
View Video

Get cutting-edge science videos from JoVE sent straight to your inbox every month.

Waiting X
simple hit counter