Karaciğer metastazlarının klinik öncesi bir sıçangil modeli, hemispleen enjeksiyon tekniği ile gerçekleştirilir.
Bu içeriği görüntülemek için JoVE aboneliğiniz gereklidir. Giriş yapın veya ücretsiz denemenizi bugün başlatın.
Yöntem makalesi
Karaciğer metastazları Klinik öncesi fare modeli
Bu makalede
Özet
Özet
Sayısız fare modelleri, insan kanserleri çalışma ve kanser tedavisi ve kalkınma anlayışı ilerletmek için geliştirilmiştir. Burada, sinjenik mürin pankreas tümörü hücreleri hemispleen enjeksiyon ile karaciğer metastazlarının klinik öncesi, kemirgen pankreatik tümör modeli tarif edilmektedir. Bu model, karaciğere metastatik hastalığı olan hastalarda klinik durumların bir çoğu taklit eder. Fareler sürekli metastatik sürecinin incelenmesi, deneysel tedavi test ve tümör immünoloji araştırma için izin karaciğer metastazı gelişir.
Giriş
Pankreas duktal adenokarsinom (PDA) Amerika Birleşik Devletleri 1 kansere bağlı ölümlerin dördüncü önde gelen nedenidir. Metastatik PDA hastalar için beş yıllık sağkalım% 2-12 1'dir. Pankreas kanseri için adjuvan kemoterapi ve bugün her zamankinden daha etkili olmasına rağmen, hala yeni tedaviler için umutsuz bir ihtiyaç duyulmaktadır.
Yeni tedavilerin geliştirilmesi güvenilir klinik öncesi hayvan modellerinde gerektirir. , Deri altı tümör modelleri kullanmak için basit olmasına rağmen, dezavantajları, insan kanserlerinde görülen tümör ilerlemesi ve mikroçevrelerde metastaz taklit etmek için, bu tümörlerin yeters....
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Protokol
Tüm hayvan deneyleri Johns Hopkins Üniversitesi Hayvan Bakım ve Kullanım Kurulu kurallarına uyduğu, ve hayvanlar Laboratuarı Değerlendirme ve Bakımı Akreditasyon (AAALAC) Derneği kurallarına uygun olarak muhafaza edildi. Cerrahi işlem on beş saatte hava değişim minimum giren bir ameliyathanede steril koşullar altında gerçekleştirilir. Tüm cihazlar, işlem sırasında önce, her bir fare arasında% 70 etanol ile işlem ve tekrar otoklav ile sterilize edilir. Cerrahi prosedürü hayatta beklenmemektedir bütün fareler anestezi altında ise hala sonra servikal dislokasyon yapılmıştır 3 dakika boyunca CO2 altında kurban edilmiştir.
1. Hücre Ha....
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Sonuçlar
Hemispleen içine enjekte edilen tümör hücreleri Panc02 tekniği doğru yapılması halinde akciğer ve karın zarı metastaz gözlenmez iken (Şekil 1) farelerin% 100'ünde bir şekilde karaciğer metastazı. Bu teknik çok sayıda bağımsız deneylerde Panc02 hücreleri kullanılarak yüz üzerinde fareler üzerinde gerçekleştirilmiştir ve yeniden üretilebilir, tüm tedavi edilmemiş fareler hemisplenectomy prosedür (Şekil 2) takip eden 30 ila 60 gün, karaciğer metastazı ölür. Muamele edilmemiş ve edilmiş.......
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Tartışma
Bir hemispleen enjeksiyon tekniği ile karaciğer, pankreas kanser metastazı bu klinik öncesi fare modeli, karaciğere metastatik hastalığı olan hastaların klinik ve immünolojik hastalıkların birçoğu aynaları tarif edilen birinci modelidir. Bu model, diğer sıçangil modellerinde fazla birkaç avantaj sunar. Farelerin sadece% 30 karaciğer ve metastaz oluşumu zamanlamasına metastazları geliştirir pankreas kanseri transjenik modelleri oldukça değişkendir farklı İlk olarak, bu model, farelerin% 100'ünde karaciğer sürekli ola.......
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Açıklamalar
Yazarlar ifşa ilgi hiçbir ilgili çatışmaları var.
Teşekkürler
KF ve KO KS ile birlikte ilk yazarları co edilir
Bu çalışma AHPBA Kardeşliği (KS), NIH K23 CA148964-01 (LZ), Tıp Johns Hopkins Yüksekokulu Klinik Bilim İnsanı Ödülü (LZ), Virágh Vakfı ve Johns Hopkins Atla Virágh Pankreas Kanseri Merkezi (EMJ ve kısmen desteklenmiştir LZ), Ulusal Pankreas Vakfı (LZ), Lefkofsky Aile Vakfı (LZ), Gastrointestinal Kanserler P50 CA062924 yılında NCI SPORE (EMJ, LZ), Lustgarten Vakfı (LZ) ve Sol Goldman Pankreas Kanseri Merkezi hibeler (KS , BHE, LZ).
....Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Malzemeler
| Ad | Şirket | Katalog numarası | Yorumlar |
|---|---|---|---|
| Hücre kültürü ortamı ve bileşenleri | , hücre hattına bağlı olarak değişecektir | ||
| Fosfat Tamponlu Salin | Gibco by Life Technologies | 10010-023 | |
| 15 ml santrifüj tüpleri | Corning | 430052 | |
| Kavisli Ameliyat Makası | Roboz Cerrahi Mağazası | RS-6835 | |
| Mikro Diseksiyon Graefe Forseps | Roboz Cerrahi Mağazası | RS-5130 | |
| İğne tutucu (normal) | World Precision Instruments, Inc | ||
| 3-0 veya 4-0 sütür | , cerrahi departmanının izniyle, Johns Hopkins | ||
| Weck Horizon Açık Bağlama Klipsi Uygulayıcısı, küçük, açılı | Teleflex | 137085 | |
| Weck Horizon Açık Bağlama Klipsi Uygulayıcısı, orta, açılı | Teleflex | 237115 | |
| Weck Horizon orta bağlama klipsi | Teleflex | 002200 | |
| Weck Horizon küçük bağlama klipsi | Teleflex | 001200 | |
| Şırınga, 1 cc, tb şırınga, 3/8" kayma ucu | Becton Dickinson | 309625 | |
| Şırınga, 1 cc, tb şırınga, 5/8" kayma ucu | Becton Dickinson | 309597 | |
| 9 mm Otomatik Klips Uygulayıcı | Mikron | 427630 | |
| 9 mm Autoclip | Becton Dickinson | 427631 | |
| Isıtma yastığı | Sunbeam | CAT93 | |
| %70 Etanol | çok sayıda satıcı tarafından satılmaktadır | ||
| Ketamin Hidroklorür | Hospira | 22395DD | |
| Ksilazin hidroklorür | Sigma | X1251 |
Kaynaklar
- American Cancer Society. Cancer Facts & Figures. , American Cancer Society. Atlanta. (2013).
- Clark, C. E., Beatty, G. L., Vonderheide, R. H. Immunosurveillance of pancreatic adenocarcinoma: insights from genetically engineered mouse models of cancer. Cancer letters. 279, 1-7 (2009).
- Rhim, A. ....
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Yeniden basım ve izinler
