Name: Küçük Kemirgenler sistometri ve Kullanımı: Mesane Chemosensation Çalışması (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2012-08-21T12:00:00.000+00:00
Duration: 8 min 8 s
Description: Öğrenin, küçük kemirgenlerde sistometri yöntemiyle mesane fonksiyonlarını ve kimyasal bileşiklerin boşaltım düzenine etkisini inceleyin. Bu teknik, fizyolojik koşullarda tekrarlanabilir ölçümler sağlar.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Bu eser Belçika Federal Hükümeti (IUAP P6/28), Araştırma Vakfı-Flanders (FWO) (G.0565.07 ve G.0686.09), Astellas Avrupa Vakfı Ödülü 2009 ve KU Leuven Araştırma Konseyi bağışları ile desteklenmiştir (GOA 2009/07, EF/95/010 ve PFV/10/006). PU ve BİZ Araştırma Vakfı-Flanders (FWO) ve doktora öğrencisinin vardır. MB Marie Curie akademisyendir. FWO DDR temel-klinik fellow.

1. Laboratuvar Hayvanları <ol><li> Hayvanlar (fare, sıçan) 12 saat ışık-karanlık döngüsü, su ve standart gıda granül ad libitum erişimi ile özel bir hayvan tesisi içinde muhafaza edilir. Hayvanların yaş ve cinsiyet Hem ihtiyaçlarına göre standardize edilmelidir önemli parametrelerdir. 12 haftalık dişi hayvanlarda 5,6 - Biz genellikle 10 sistometri gerçekleştirin. </li><li> Tüm hayvan deneyleri Avrupa Birliği Topluluğu Konseyi kurallarına uygun olarak yürütülen ve yerel etik kurul tarafından onaylanmıştır. </li></ol> 2. Anestezi <ol><li> Bu yarı-ömrü kısa olması nedeniyle doza kolay olduğundan İzofluran anestezi, küçük bir cerrahi işlemlerin gerçekleştirilmesi için kullanılır. Izofluran kullanırken süpürücü Uygun atık gaz gereklidir. <ol class="lalpha"><li> Hayvanlar saf oksijen izofluran% 5 (1 l / dk) ile gazlandırılan kapalı bir kutu, yerleştirilir. </li><li> Uygun l indüksiyon, anestezi sonrası1 l / 1 dak oksijen - - izofluran% 1.5 evel 0,8 oranında küçük bir maske (bir kesim 10 ml şırınga) tarafından yapılmaktadır. </li></ol></li><li> Fareler için, fonksiyonel üretan anestezi kayıtları (cfr. Kızılötesi) sırasında kullanılır. Diğer birçok anestetik aksine, işeme refleks bu anestezik madde 4 ile bastırılmış değildir, çünkü anestezi fonksiyonel üretan kayıt sırasında kullanılır. Üretan 1.2 g / kg vücut ağırlığı (sc) 60 dakikalık kayıtların başlamasından önce deri altından tatbik edilmektedir. Eğer gerekirse, uygun anestezi elde etmek için gerekli olan, üretan ve subkütan olarak ek doz (0.1 g / kg) verilerek titre edilebilir. Bu belirtmek gerekir, ancak, bu ek anestezi işeme verimlilik ve dolayısıyla işeme frekans 7,8 değiştirebilir. Dolayısıyla, mesane kayıtları yakından takip ve kontrol davranışı önemli sapmaların tespit edildiği anda atılmalıdır. Ederken Anestezikler uygulanmamalıdır testibileşiklerin veri yorumlanmasına önlemek için uygulanır. </li></ol> 3. Cerrahi Prosedür - Mesane Kateteri İmplantasyonu <ol><li> Cerrahi aletler kullanmadan önce otoklavda sterilize edilir. , Hayvanın karın Tıraş etanol% 70 ile dezenfekte ve mesane maruz düşük bir orta hat laparotomi uygulandı. </li><li> Cerrahi mikroskop altında, bir emilmeyen, monofilaman sütür (boyut 6-0) kullanarak mesane kubbesi bir çanta-string sütür koyun. </li><li> Çanta dize içinde küçük bir sistostomi (biz tercihen 18 G iğne kullanın) gerçekleştirin ve bu delikten sonunda küçük bir manşet (dikkatle tüp ısıtılmasıyla elde edilen) ile, PE 50 Polietilen kateter yerleştirin. Bizim ellerde, ince borular (PE 10) daha yüksek ve değişken direnç var. Tüp, etanol% 70 solüsyon koyarak veya bir otoklavda sterilize ile dezenfekte edilebilir. Takılmadan önce boru tuzlu su ile yıkanması gerekir. </li><li> Çanta str sabitleyinBir cerrahın düğüm ile tüp etrafında ing. Çan şeklinde ucu kadar yavaşça dışarıya doğru dikiş altında konumlandırılmış kateter çekin. Sızıntı önlemek için dikiş doğru 18 G kateter bir parça itin. </li><li> Yavaşça sızıntı olup olmadığını kontrol etmek - salin küçük hacimli (200 ul 100) Infuse. Sızıntı varsa, bir ek sütür konulmalıdır. </li><li> Kesi üst kısmında kateter için bir geçit bırakarak monofilaman sütürler kullanılarak karın kaslarının kapatın. </li><li> Tünel içi boş bir metal çubuk kullanılarak interskapular için tüp, böylece deney sırasında boru ısırmak için hayvanlar önler. </li><li> Cilt emilmeyen, monofilaman sütürler kullanılarak kapatılır. Implante kateter geçirgenliğini kontrol etmek için tuzlu su ile temizlenir. </li><li> Hayvanlar uyandırmak önce, analjezikler (buprenorfin, 0.05 mg / kg) deri altından verilmiştir. </li></ol> 4. Kurulum ve Sistometriler <ol><li> Deneysel Questi bağlı olarak,(ve tür kullanılan) üzerinde sistometri uyanık (kısıtlama ya da serbestlik) veya üretan-anestezi uygulanmış hayvanlarda gerçekleştirilir. Sistometri bir ölçülü ortamda sakin olmaya eğilimi bilinçli sıçanlarda, mükemmel mümkündür Oysa fareler 3,5,6,9 kullanırken, biz genellikle üretan anestezisi (subkütan 1.2 mg / kg) altında sistometri gerçekleştirin. </li><li> Anestezi farelerde vücut sıcaklığı sürekli olarak izlenir ve 36.5 &#39;da tutulmaktadır ° C ± 0.2 ° C arasında bir sıcaklık probu ve bir ısıtma lambası aracılığı ile. </li><li> Set-up üreticinin talimatlarına göre her deneyden önce kalibre edilir. </li><li> Implante kateter bir tarafında ve (Harvard Apparatus) başka bir enfüzyon pompası üzerinde basınç transdüktör (Edwards Lifesciences) bağlı olan 3-yollu bir musluk için bir luer saplama ile bağlıdır. Basınç dönüştürücü veri toplama sistemi (DI-730-USB, Dataq araçlar) için bir amplifikatör (78534c monitör, Hewlett Packard) ve bir ortak ile bağlandığındamputer. Windaq / Lite yazılım kayıt için de kullanılabilir. </li><li> Enfüzyon pompası, örneğin salin ya da PBS içinde infüzyon sağlayan başlatıldığında, 100 ul / dakika (sıçanlar) ya da 20 ul / dk (farelerde). Intravesikal basınç kaydedilirken gibi mesane, sabit bir oranda doldurulur. </li><li> Şekil 5 tipik bir basınç izleme gösteriyor: belirli bir hacim / basıncına ulaşılana kadar sıvı infüzyonu sırasında, mesane yavaş bir baskı birikimini miksiyon eşiği vardır. Bir kez bu eşiği, mesane sözleşme ulaşılması ve daha sonra üriner sfinkter açılır, üretra yoluyla idrarın geçişine izin. Bu nedenle, mesane boşaltılır, daralma duracak ve basınç &quot;bazal&quot; seviyesine tekrar düşecek. </li><li> Bir sıçan metabolik kafesinde ve bir dijital denge üstüne yerleştirilir gibi, idrar hacmi idrar hacmi ile ilgili bilgi vererek, eşzamanlı olarak ölçülebilir. Mil içinde küçük işeme hacimleri nedeniyle,ce, bu sistemi kullanarak çok zor olabilir. Bu nedenle, idrar hacmi işeme önce ve hemen sonra tartılmış küçük bir filtre kağıdı kullanılarak tespit edilir. </li><li> Genellikle, sistem 30 dakika arasında bir süre kayıt ardından, 30 dakika için denge sağlar. Sonra, ilaç sistemik veya intravesikal tatbik edilebilir ve bir 30 dakika daha kaydedilir. </li><li> Kaydedilmiş veriler nicel analiz için özel bir yazılım alınabilir. Csv dosyaları olarak ihraç edilebilir. Biz genellikle (originlab Corporation, MA, ABD) Menşe kullanın. </li><li> Deneylerden sonra, hayvanlar servikal dislokasyon (fare) veya CO 2 zehirlenmesi (sıçan) tarafından kurban edilir. </li></ol> 5. Temsilcisi Sonuçlar <img alt="Şekil 1" src="/files/ftp_upload/3869/3869fig1.jpg" /> Şekil 1. Laparotomi bakış. A) yatar pozisyonda sıçan yerleştirin. B) Tıraş ve antiseptically cerrahi sitesi hazırlamak. Cilt C) İnsizyonunun. D) Kesi of karın kasları, mesane ve pozlama. <img alt="Şekil 2," src="/files/ftp_upload/3869/3869fig2.jpg" /> Şekil 2. A purse-string sütür. <img alt="Şekil 3" src="/files/ftp_upload/3869/3869fig3.jpg" /> 3. Kateter implantasyonu Şekil. <img alt="Şekil 4," src="/files/ftp_upload/3869/3869fig4.jpg" /> Şekil 4,. Kateterin tip tünel. Bilinçli bir sıçan ve anestezi uygulanmış bir farenin salin intravesikal basınç perfüzyon sırasında elde edilen ölçüm örnekleri Şekil 5 &#39;de gösterilmiştir. Birden çok parametreler basınç sinyali (intercontractile aralık, temel eşik basınç ve basınç gibi) dan elde edilebilir. Bu parametrelerin tanımları için kapsamlı, Andersson, et al. (Ref 4) ve Yoshiyama ve diğerleri bakınız. (<html> ref 10). Biz son zamanlarda hardal yağı moleküler hedeflerin (MO), uzun inflamasyon ve bu mesane 11,12 olarak visseral organların hiperaljezi deneysel modellerinde kullanılan bir yüksek reaktif bileşiği tanımlamak için sistometri kullandık. 10 mM MO İntravezikal infüzyon vahşi tip farelerde işeme sıklığı güçlü bir artış (intercontractile aralığında düşüş) (Şekil 6A, B) ve işeme hacmi 6 azalma indüklenen. İlginçtir, MO MO reseptör TRPA1 arasında eksik farelerde benzer değişiklikler indüklenen. Buna karşılık, MO WT farelere kıyasla daha TRPV1 KO fareleri içinde mesane parametreleri çok daha zayıftır değişimlere neden olan ve Trpa1/Trpv1 KO fareleri içinde herhangi bir etkisi yoktu. Birlikte Peptid (CGRP) 6 İlişkin Kalsitonin Gen verildiği ölçümleri ile, bu veriler TRPV1 MO tarafından indüklenen visseral tahriş önemli bir rol oynayabileceğini göstermektedir göstermektedir. ve_content &quot;&gt; <img alt="Şekil 5," src="/files/ftp_upload/3869/3869fig5.jpg" /> Şekil 5. Bilinçli bir dişi sıçan (A) ve anestezi dişi fare (B) kaydedilmiş intravezikal basınç Temsilcisi izleri. En düşük basınç &quot;taban baskısı&quot; (kırmızı oklar) olarak tanımlanır. Doldurma aşamasının sonunda, basınç mavi oklarla işaretlenmiştir. Basınç farkı bölünmesiyle bu noktaların arasındaki infüzyon sıvı hacmi sağlayan mesane duvarının uyum (uyum = infüzyon hacmi / (eşik basıncı hesabı -. Bazal çizgi basıncı) &quot;intercontractile aralığı&quot; (ICI) arasındaki zaman iki işeme kasılmalar. <img alt="Şekil 6" src="/files/ftp_upload/3869/3869fig6.jpg" /> Vahşi tip ve Trpa1, TRPV1 ve Trpa1/Trpv1 knockout farelerde sistometri desen üzerine hardal yağı intravezikal uygulama Şekil 6. Etkileri.(A) ve 10 mM salin infüzyonu, MO yanıt olarak WT, Trpa1 KO, TRPV1 KO ve Trpa1/Trpv1 KO fareleri içinde kaydedilmiş intravesikal basınç değişiklikleri temsil eden örnekler. Öncesi ve MO intravezikal infüzyon sırasında ortalama anlık işeme sıklığı (B) Zaman kursu. Tüm fareler için, veri salin infüzyonu sırasında elde edilen ortalama frekans için normalize edildi. Bu veriler, Elsevier izni ile Everaerts ve ark. (Ref 6) uyarlanmıştır.

<ol><li>Everaerts, W., Gevaert, T., Nilius, B., De Ridder, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((On+the+origin+of+bladder+sensing%3A+Tr%28i%29ps+in+urology%5BTitle%5D)+AND+%22Neurourol.+Urodyn%22%5BJournal%5D)">On the origin of bladder sensing: Tr(i)ps in urology.</a> Neurourol. Urodyn. 27, 264-2673 (2008).</li>
<li>Fry, C. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Animal+models+and+their+use+in+understanding+lower+urinary+tract+dysfunction%5BTitle%5D)+AND+%22Neurourol.+Urodyn%22%5BJournal%5D)">Animal models and their use in understanding lower urinary tract dysfunction.</a> Neurourol. Urodyn. 29, 603-608 (2010).</li>
<li>Gevaert, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Deletion+of+the+transient+receptor+potential+cation+channel+TRPV4+impairs+murine+bladder+voiding%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Clin.+Invest%22%5BJournal%5D)">Deletion of the transient receptor potential cation channel TRPV4 impairs murine bladder voiding.</a> J. Clin. Invest. 117, 3453-3462 (2007).</li>
<li>Andersson, K. E., Soler, R., Fullhase, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Rodent+models+for+urodynamic+investigation%5BTitle%5D)+AND+%22Neurourol.+Urodyn%22%5BJournal%5D)">Rodent models for urodynamic investigation.</a> Neurourol. Urodyn. 30, 636-646 (2011).</li>
<li>Everaerts, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Inhibition+of+the+cation+channel+TRPV4+improves+bladder+function+in+mice+and+rats+with+cyclophosphamide-induced+cystitis%5BTitle%5D)+AND+%22Proc.+Natl.+Acad.+Sci.+U.S.A%22%5BJournal%5D)">Inhibition of the cation channel TRPV4 improves bladder function in mice and rats with cyclophosphamide-induced cystitis.</a> Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 107, 19084-19089 (2010).</li>
<li>Everaerts, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+capsaicin+receptor+TRPV1+is+a+crucial+mediator+of+the+noxious+effects+of+mustard+oil%5BTitle%5D)+AND+%22Curr.+Biol%22%5BJournal%5D)">The capsaicin receptor TRPV1 is a crucial mediator of the noxious effects of mustard oil.</a> Curr. Biol. 21, 316-321 (2011).</li>
<li>Yoshiyama, M., Roppolo, J. R., Thor, K. B., de Groat, W. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+of+LY274614%2C+a+competitive+NMDA+receptor+antagonist%2C+on+the+micturition+reflex+in+the+urethane-anaesthetized+rat%5BTitle%5D)+AND+%22Br.+J.+Pharmacol%22%5BJournal%5D)">Effects of LY274614, a competitive NMDA receptor antagonist, on the micturition reflex in the urethane-anaesthetized rat.</a> Br. J. Pharmacol. 110, 77-86 (1993).</li>
<li>Yoshiyama, M., Roppolo, J. R., de Groat, W. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+of+MK-801+on+the+micturition+reflex+in+the+rat--possible+sites+of+action%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Pharmacol.+Exp.+Ther%22%5BJournal%5D)">Effects of MK-801 on the micturition reflex in the rat--possible sites of action.</a> J. Pharmacol. Exp. Ther. 265, 844-850 (1993).</li>
<li>Boudes, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Functional+Characterization+of+a+Chronic+Cyclophosphamide-Induced+Overactive+Bladder+Model+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Neurourol.+Urodyn%22%5BJournal%5D)">Functional Characterization of a Chronic Cyclophosphamide-Induced Overactive Bladder Model in mice.</a> Neurourol. Urodyn. , (2011).</li>
<li>Yoshiyama, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Sex-related+differences+in+activity+of+lower+urinary+tract+in+response+to+intravesical+acid+irritation+in+decerebrate+unanesthetized+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Am.+J.+Physiol.+Regul.+Integr.+Comp.+Physiol%22%5BJournal%5D)">Sex-related differences in activity of lower urinary tract in response to intravesical acid irritation in decerebrate unanesthetized mice.</a> Am. J. Physiol. Regul. Integr. Comp. Physiol. 295, R954-R960 (2008).</li>
<li>McMahon, S. B., Abel, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+model+for+the+study+of+visceral+pain+states%3A+chronic+inflammation+of+the+chronic+decerebrate+rat+urinary+bladder+by+irritant+chemicals%5BTitle%5D)+AND+%22Pain%22%5BJournal%5D)">A model for the study of visceral pain states: chronic inflammation of the chronic decerebrate rat urinary bladder by irritant chemicals.</a> Pain. 28, 109-127 (1987).</li>
<li>Du, S., Araki, I., Yoshiyama, M., Nomura, T., Takeda, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Transient+receptor+potential+channel+A1+involved+in+sensory+transduction+of+rat+urinary+bladder+through+C-fiber+pathway%5BTitle%5D)+AND+%22Urology%22%5BJournal%5D)">Transient receptor potential channel A1 involved in sensory transduction of rat urinary bladder through C-fiber pathway.</a> Urology. 70, 826-831 (2007).</li>
<li>Streng, T., Santti, R., Talo, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Similarities+and+differences+in+female+and+male+rat+voiding%5BTitle%5D)+AND+%22Neurourol.+Urodyn%22%5BJournal%5D)">Similarities and differences in female and male rat voiding.</a> Neurourol. Urodyn. 21, 136-141 (2002).</li>
<li>Igawa, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cystometric+findings+in+mice+lacking+muscarinic+M2+or+M3+receptors%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Urol%22%5BJournal%5D)">Cystometric findings in mice lacking muscarinic M2 or M3 receptors.</a> J. Urol. 172, 2460-2464 (2004).</li>
<li>Schroder, A., Newgreen, D., Andersson, K. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Detrusor+responses+to+prostaglandin+E2+and+bladder+outlet+obstruction+in+wild-type+and+Ep1+receptor+knockout+mice%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Urol%22%5BJournal%5D)">Detrusor responses to prostaglandin E2 and bladder outlet obstruction in wild-type and Ep1 receptor knockout mice.</a> J. Urol. 172, 1166-1170 (2004).</li>
<li>Chen, Q. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Function+of+the+lower+urinary+tract+in+mice+lacking+alpha1d-adrenoceptor%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Urol%22%5BJournal%5D)">Function of the lower urinary tract in mice lacking alpha1d-adrenoceptor.</a> J. Urol. 174, 370-374 (2005).</li>
<li>May, V., Vizzard, M. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Bladder+dysfunction+and+altered+somatic+sensitivity+in+PACAP-%2F-+mice%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Urol%22%5BJournal%5D)">Bladder dysfunction and altered somatic sensitivity in PACAP-/- mice.</a> J. Urol. 183, 772-779 (2010).</li>
<li>Thorneloe, K. S., Meredith, A. L., Knorn, A. M., Aldrich, R. W., Nelson, M. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Urodynamic+properties+and+neurotransmitter+dependence+of+urinary+bladder+contractility+in+the+BK+channel+deletion+model+of+overactive+bladder%5BTitle%5D)+AND+%22Am.+J.+Physiol.+Renal.+Physiol%22%5BJournal%5D)">Urodynamic properties and neurotransmitter dependence of urinary bladder contractility in the BK channel deletion model of overactive bladder.</a> Am. J. Physiol. Renal. Physiol. 289, 604-610 (2005).</li>
</ol>

Çıkar çatışması ilan etti.

Burada sunulan sistometri tekniği hayvan modellerinde mesane fonksiyonu in vivo ölçümleri performans sağlar. Sıçanlar belkide en çok kullanılan hayvan modeli vardır. Fare işlemek için daha zor, ama genetik olarak manipüle hayvanları kullanmanın avantajı sunuyoruz. Çünkü implante kateter ve intravezikal basıncı etkileyebilir karın içi basınç değişiklikleri gevşemesi sonucunda çok aktif olma eğilimi bilinçli fareler kullanarak teknik zorluk, biz tam sistometrisi sırasında üretan ile anestezi tutmak için tavsiye p...

<table border="1"><tbody><tr><td> Reaktif Adı </td><td> Ticari adı, şirket, </td><td> Katalog numarası </td><td> Yorumlar </td></tr><tr><td> üretan </td><td> Üretan, Sigma-Aldrich </td><td> 315419 </td><td> Grup 2B kanserojen </td></tr><tr><td> izofluran </td><td> Isoba, Schering-Plough Hayvan Sağlığı </td><td></td><td></td></tr><tr><td> polietilen kateter </td><td> Intramedic polietilen boru PE50, Becton Dickinson </td><td> 427411 </td><td></td></tr><tr><td> Cerrahi mikroskop </td><td> Op-Mi 6, Carl Zeiss </td><td> Op-Mi 6 </td><td></td></tr><tr><td> purse-string sütür </td><td> Prolen 6/0, Ethicon </td><td> 8610H </td><td></td></tr><tr><td> fasya ve cilt sütür </td><td> Ethilon 4/0 veya 5/0, Ethicon </td><td> 662G veya 661G </td><td></td></tr><tr><td> postoperatif analjezik </td><td> Temgesic, Schering-Plough Hayvan Sağlığı </td><td></td><td> fareler için doz: 0.05 mg / kg &#39; </td></tr><tr><td> amplifikatör </td><td> 78534c monitör, Hewlett Packard </td><td></td><td></td></tr><tr><td> analitik dengeleri ve denge veri toplama yazılımı </td><td> FZ 300i, A &amp; D </td><td> FZ-300i </td><td></td></tr><tr><td> infüzyon pompaları </td><td> Pompa 33, Harvard Apparatus </td><td> HA33 </td><td></td></tr><tr><td> sistometri kayıt sistemi </td><td> Dataq aletleri, DI-730 serisi ve Windaq / Lite </td><td> DI-730-USB Windaq / Lite </td><td></td></tr><tr><td> sıcaklık kaydı </td><td> Fluke 52 KJ termometre </td><td> 52 KJ </td><td></td></tr><tr><td> basınç dönüştürücüler </td><td> Edwards Lifesciences, basınç izleme seti </td><td> T322247A </td><td></td></tr></tbody></table>

küçük kemirgenler sistometri ve kullanımı: mesane chemosensation Çalışması

The Use of Cystometry in Small Rodents: A Study of Bladder Chemosensation

<p class="jove_content"&gt; Idrarı depolamak ve verimli uygun bir anda çıkarmak için güçlü bir dinamik rezervuar olarak alt üriner sistem (AÜS) fonksiyonları. Idrar depolanması sırasında, ancak, mesane atık ürünler için uzun süre maruz kalır. Sıkı bir bariyer gibi hareket ederek, LUT, Ürotelyumun, epitel zarının zararlı maddelerin emilimini önler. Ayrıca, zararlı kimyasallar mesane nosiseptif innervasyon uyarmak ve mesane içeriğini sınırdışı kasılmaları işeme başlatabilir. İlginçtir, zararlı kimyasallar mesane hassasiyeti intravezikal nörojenik mesane aşırı aktivitesi tedavi TRPV1 agonisti kapsaisin beslerken tarafından, klinik pratikte başarıyla kullanılmıştır<sup&gt; 1</sup&gt;. Bu kimyasal duyusal organ olarak mesane görüntüleme avantajı altını çiziyor ve daha ileri klinik araştırmalar için ister. Ancak, etik konular ciddi insan denekler, LUT klinik farmakoloji moleküler temelleri çözülmeye gerekli olan invaziv ölçümler, gerçekleştirmek için olanakları sınırlı. Bu sınırlama üstesinden gelmek için bir yol birkaç hayvan modellerinin kullanımı<sup&gt; 2</sup&gt;. Burada fare ve sıçanlarda sistometri, kontrollü mesane perfüzyon koşullarında intravezikal basıncı ölçmek sağlayan bir tekniğin uygulanmasını açıklar.</p&gt;<p class="jove_content"&gt; Laparotomi sonra bir kateter mesane kubbesi implante ve interskapular bölgeye subkutan tünel. Üretra işeme için serbest bırakılırken sonra mesane, kontrollü bir oranda doldurulabilir. Dolum ve işeme tekrarlayan döngüleri sırasında intravezikal basınç implante kateter yoluyla ölçülebilir. Bunun gibi, basınç değişiklikleri belirleyen ve analiz edilebilir. Ayrıca, işeme hacmi aynı anda ölçülmesini sağlar dışı işeme kasılmalar ayırt işeme kasılmalar<sup&gt; 3</sup&gt;.</p&gt;<p class="jove_content"&gt; Önemlisi, kemirgenler ve insanlar arasında miksiyon kontrolü farklılıklar nedeniyle, bu hayvanlarda sistometrik ölçümler sadece sınırlı ötelenme değeri<sup&gt; 4</sup&gt;. Yine de, deneysel klinik öncesi ortamlarda mesane patofizyolojisi ve farmakoloji çalışmasında oldukça aracı bulunmaktadır. Bu tekniği kullanarak son araştırmalar mesane Mechano-ve kemo-duyusal özelliklerinde yeni moleküler oyuncuların rol ortaya çıkarmıştır.</p

Sistometriler küçük hayvanların mesane fonksiyonu ölçmek için etkili bir tekniktir<em&gt; In vivo</em&gt;. Mesane sürekli idrar işeme için serbest bırakılmalıdır ise, intravezikal kateter yoluyla kontrol fiyatla demlenir. Bu intravezikal basıncı ve işeme hacmi kaydedilir iken, tekrarlayan için doldurma ve mesane boşaltılmasını sağlar.

Küçük Kemirgenler sistometri ve Kullanımı: Mesane Chemosensation Çalışması

Alt üriner sistem (AUS), idrarı depolayabilen ve uygun bir zamanda etkili bir şekilde dışarı atabilen dinamik bir rezervuar olarak işlev görür. ...

Bu prosedürün amacı, kimyasal bileşiklerin mesanenin depolama ve boşaltma fonksiyonları üzerindeki etkisini belirlemektir. Bu işlem, öncelikle mesaneye bir kateter implante edilerek gerçekleştirilir. Kısa bir iyileşme döneminin ardından, kateter aracılığıyla 30 dakika boyunca bir kontrol çözeltisi infüze edilir.İntravezik basınç ve boşaltılan hacim başka bir 30 dakika boyunca kaydedilirken, hayvana ilgili bileşik infüze edilir. Sonuçlar, boşaltım sıklığı analizi yoluyla tahriş edici kimyasalların boşaltım modelini nasıl etkilediğini gösterebilir. Bu tekniğin, izole mesane kontraktilitesinin kaydedilmesi gibi mevcut yöntemlere göre temel avantajı, bu organın fonksiyonunun daha fizyolojik koşullar altında incelenebilmesidir.Örneğin, merkezi sinir sisteminin düzenleyici etkileri korunur. Cerrahi basamakların öğrenilmesi, deneyin başarısını sağlamak için gözlemlenmesi gereken çok sayıda teknik detay ve manevra içerdiğinden zor olduğundan, bu yöntemin görsel olarak gösterilmesi kritik önem taşımaktadır. Mesaneye implant etmek istediğiniz tüpü hazırlamak için öncelikle, bir PE 50 tüpünü istenen uzunlukta kesin ve ana kateterin üzerine 18 gauge kateterden küçük beyaz bir parça yerleştirin.Ardından, tüpün bir ucunu yakarak sonunda küçük bir manşon oluşturun ve içerideki havayı boşaltmak için salin ile yıkayın. Şimdi, 10 ila 12 haftalık dişi bir sıçana izofloran ile anestezi uygulayın. Anesteziyi başlattıktan sonra, izofloran idame seviyesini ayarlayın.Hayvanı sırtüstü pozisyona getirin ve 10 cc'lik bir şırıngadan yapılmış küçük bir anestezi maskesi yerleştirin. Karın bölgesini tıraş edip dermisi dezenfekte ettikten sonra cerrahi işleme geçin. Aşağıdaki cerrahi işlem hem sıçanlarda hem de farelerde aynı şekilde uygulanır.Mesaneyi açığa çıkarmak için alt orta hat laparotomisi yaparak başlayın. Ardından cerrahinin en kritik aşamasına geçilir. Cerrahi mikroskop altında, emilmeyen monofilaman altı sıfır sütür kullanarak mesane kubbesine bir torba ağzı dikişi (purse string suture) atın.Ardından, bir iğne kullanarak purse string dikişinin içinde küçük bir sistostomi gerçekleştirin. Manşetli PE 50 kateteri bu delikten içeri yerleştirin. PE 10 gibi daha ince kateter tüpleri daha yüksek ve değişken bir dirence sahip olabildiğinden önerilmezler.Bir cerrah düğümü kullanarak torba ağzı dikişini tüp çevresinde sabitleyin. Ardından, manşetli uç doğrudan dikişin altına gelene kadar kateteri nazikçe dışarı doğru çekin. Sızıntıyı önlemek için 18 gauge kateter parçası dikişe doğru itilir.Kateter ile mesane arasında sızıntı olup olmadığını kontrol edin. Bunun için nazikçe serum fizyolojik infüzyonu uygulayın. Varsa sızıntıları ek sütürlerle kapatın.Şimdi, insizyonun üst kısmında kateter için bir geçiş bırakarak karın kaslarını monofilaman sütürlerle kapatın. Hayvanların tüpü ısırmasını önlemek için içi boş bir metal çubuk kullanarak kateteri interskapular bölgeye tünelleyin. Cerrahi işlemden sonra, metal çubuk deri altına, karın ve sırt kaslarının üzerine yerleştirilmelidir.Çubuğu hayvanın deri altından interskapular bölgeye doğru itin. Karın kaslarını ve cildi emilmez monofilaman sütürlerle kapatarak cerrahi işlemi tamamlayın. Şimdi, implante edilen kateterin geçirgenliğini ve stabilitesini salin ile yıkayarak kontrol etmek oldukça önemlidir.İnfüzyon çözeltisi mesaneden çıkıp üretradan boşalmalıdır. Analjezik deri altına uygulandıktan sonra, kateterin dış ucu plastik bir filmle kapatılmalı ve kateter sıçanın alt sırt derisine sabitlenmelidir. Son olarak, hayvanın 30 dakika boyunca iyileşmesine izin verilmelidir.Sitomtriye başlamadan önce, cihazların uygun şekilde kalibre edildiğinden emin olun. Sıçanı, dijital bir terazi üzerinde duran ve içinde yağ bulunan bir kapla desteklenmiş metabolik bir kafese yerleştirin. Bir sonraki adım, implante kateteri bir luer uç aracılığıyla üç yollu bir musluğa bağlamaktır.Musluk, basınç dönüştürücüye ve bir infüzyon pompasına bağlanmalıdır. Basınç dönüştürücü, bir amplifikatör aracılığıyla veri toplama sistemine bağlanır ve halka açık yazılım kullanan bir bilgisayar, mesaneye salin infüzyonu yapmak için infüzyon pompasını çalıştırarak kontrol ölçümlerine başlar. 30 dakikalık süre boyunca, metabolik kafes, sıçanın boşalttığı hacmi tahmin etmek için kullanılan dijital bir terazi üzerine asılır.Mesane dolarken ve boşalırken intravezikal basınç kaydedilir. Bir sonraki adımda, 30 dakikalık başka bir veri toplama süresi boyunca ilaçlar sistemik veya intravezikal olarak uygulanabilir. Deney tamamlandığında, hayvan sakrifiye edilmelidir.Bir sıçandan elde edilen tipik bir basınç izleği, sıvı infüzyonu sırasında belirli bir eşiğe ulaşılana kadar mesanede yavaş bir basınç artışı olduğunu göstermektedir. Ardından mesane kasılacak ve üriner sfinkter açılıp instilled çözeltinin üretra üzerinden geçişine izin verecektir. Böylece mesane boşaltılmış olur.Kasılma duracak ve basınç yeniden bazal seviyeye düşecektir. Bir fareden toplanan veriler aynı özelliklerin tamamına sahiptir. Hardal yağı veya mo'nun moleküler hedeflerini belirlemek için sitometri kullanılmıştır. MO, idrar kesesi gibi visseral organların inflamasyon ve hiperaljezi deneysel modellerinde uzun süredir kullanılan oldukça reaktif bir bileşiktir.Beklendiği üzere, 10 millimolar MO'nun intravezikal infüzyonu, vahşi tip farelerde kontraktil aralıkta güçlü bir azalmaya neden olmuştur. İlginç bir şekilde, MO reseptörü TRPA1 eksikliği olan fareler, aynı koşullar altında vahşi tiplere benzer bir sonuç göstermiştir. Buna karşın, MO'nun bir TRPV1 nakavt faresindeki sistemetrik parametrelerde neden olduğu değişim, vahşi tip fareye göre çok daha zayıftır; hem TRPA1 hem de TRPV1 nakavt olan çift nakavt fareler ise MO dozuna neredeyse yanıtsız kalmıştır.Veriler, TRP V1'in MO ile indüklenen viseral irritasyonda kilit bir rol oynayabileceğini göstermektedir. MO'nun intravezikal infüzyonu öncesindeki ve sırasındaki ortalama anlık boşaltım sıklığı bu verileri desteklemektedir. Ortalama sıklık, salin infüzyonuna göre belirlenmiştir.Bu prosedür uygulanırken, infüzyon çözeltisinin karın boşluğuna sızmaması için kateterin mesaneye sıkıca tutturulduğundan emin olmak önemlidir. Bu videoyu izledikten sonra, mesaneye kateter implantasyonu ve uyanık veya anestezi altındaki hayvanların kontrollü mesane perfüzyonu altında bir sistometri platformuna yerleştirilmesini içeren intravezikal basınç ölçümünün nasıl yapılacağı konusunda iyi bir anlayışa sahip olmalısınız.

the-use-cystometry-small-rodents-study-bladder

Research

JoVE Journal

Medicine

Tıp

Mesane büyütme cerrahi aşamaları fare ve sıçan modellerinde 3-D iskeleler kullanılarak anlatılmıştır. Mesane büyütme kullanım için biyomalzemenin konfigürasyonlarda etkinliği test etmek için, her iki uyanık ve anestetize sistometri teknikleri yer almaktadır.

Çeşitli Kemirgen Modeller sistometrik Analizleri kullanarak Mesane Büyütme için Biyomalzeme Değerlendirilmesi

Bu videoda, bir fare modelinin idrar kesesini boşaltmak ve durulamak için kateter tabanlı bir prosedürü açıklıyoruz. Hazırlanan fare daha sonra daha fazla deneysel prosedür için kullanılabilir.

Fare Modelinde İdrar Tükenmesi ve Mesane Durulama: Murin İdrar Kesesini Boşaltmak ve Yıkamak İçin Kateter Tabanlı Bir Prosedür

Amerika Birleşik Devletleri'nde yaklaşık 3-8000000 insan interstisyel sistit / mesane ağrı sendromu (IC / BPS), pelvik ağrı ile kısmen özelliği, bir zayıflatıcı durum muzdarip. Duruma sinir sistemi katkılarını araştırmak amacıyla, idrar kesesi ağrı fizyolojik modeli fareler ve sıçanlar kullanılır.

Farelerde Mesane Ağrı için bir model olarak Mesane Distansiyonunun Uyarılmış Visceromotor Cevapları

Farelerin transüretral Kateterizasyon kurulan modeli mesane patolojiler, idrar yolu enfeksiyonu, dahil olmak üzere çalışma sağlar ancak yalnızca dişi içinde gerçekleştirilebilir. Burada anlatılan erkek transüretral korumak yeni bir model araştırma cinsiyetler arasında güçlü klinik ve epidemiyolojik farklarına iaretlenmi bir alanı sağlayacaktır.

İdrar yolu enfeksiyonu küçük bir hayvan modeli: erkek ve dişi farelerin transüretral Kateterizasyon

Bu çalışma serbestçe hareket eden bir fare içinde uyanık sistometri gerçekleştirmek için cerrahi prosedürleri ve deneysel teknikleri tanımlamaktadır. Buna ek olarak, optimizasyonunu ve standardizasyonunu destekleyen deneysel kanıtlar sağlar.

Bir Fare Modelinde Seyrek Sistometri Uygulamasının Değerlendirilmesi

Bu iletişim kuralı, ilk dış üretral sfinkter elektrotlar ve ikinci, idrar kesesi ve dış üretral fonksiyonun ölçümü ile kombine bir idrar kesesi kateter kalıcı implantasyonu cerrahi işlem açıklar sfinkter implante uyanık hayvanlarda.

Cystometric ve dış üretral sfinkter ölçümleri implant kateter ve tekrarlanan ölçülerini izin elektrotları ile uyanık Sıçanlarda

Mesane hacmi, mesane duvarı kalınlığı, idrar hızı, boşluk hacmi, boşluk süresi ve üretral çapı ölçmek için bir yöntem olarak kontrast görüntüleme ile yüksek frekanslı ultrason kullanımını açıklar. Bu strateji alt üriner sistem disfonksiyonu (LUTD) çeşitli fare modellerinde voiding disfonksiyon ve tedavi etkinliğini değerlendirmek için kullanılabilir.

İdrar Fonksiyonel Testi için Erişkin Erkek İdrar Yolu Ultrasonografisi

Bu protokol, anestezi uygulanan bir kemirgende mesanenin lümenindeki ATP konsantrasyonlarını ölçme prosedürünü açıklar.

İn Vivo Kemirgenlerde Distansiyon Uyarılmış Ürotelyal ATP Salınımının Luminal Ölçümü

Bu makalede, geleneksel boşluk noktası testine video izlemeyi dahil ederek fare işeme davranışını incelemek için yeni bir yöntem açıklanmaktadır. Bu yaklaşım, günün aydınlık ve karanlık evrelerinde işeme olayları ve fare davranışının ayrıntıları hakkında zamansal, uzamsal ve hacimsel bilgiler sağlar.

Gerçek Zamanlı Boşluk Noktası Testi

Bu protokol, kürk ve cilt tarafından idrar emilimini önlemek için cildin siyanoakrilat ile su geçirmez hale getirilmesi için bir kılavuz sağlar. Yapıştırıcının cilde uygulanması, bir mesane kateterinin implante edilmesi ve uyanık farelerde sistometri ve dış üretral sfinkter elektromiyografi kayıtları için elektrotlar için talimatlar içerir.

Gelişmiş Doğruluk için Fare Ürodinamik Tekniklerini Optimize Etme 

Öğrenin, küçük kemirgenlerde sistometri yöntemiyle mesane fonksiyonlarını ve kimyasal bileşiklerin boşaltım düzenine etkisini inceleyin. Bu teknik, fizyolojik koşullarda tekrarlanabilir ölçümler sağlar.

Küçük Kemirgenler sistometri ve Kullanımı: Mesane Chemosensation Çalışması

Daha fazla video keşfet