Name: Antimikrobiyal Biyomühendislik uygulamalar için gelişmiş malzeme karakterizasyonu (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2018-08-04T14:00:00.000+00:00
Duration: 8 min 8 s
Description: Öğrenin, agar disk difüzyon testi ve ISO 22196:2007 yöntemleriyle antimikrobiyal malzeme karakterizasyonunu. Staphylococcus aureus ve Escherichia coli'ye karşı etkinliği değerlendirin.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

playerTrialDesktop

Yazarlar Universidad Católica de Valencia San Vicente Mártir bu çalışma sayesinde 2017-231-001UCV için finansal destek için kabul etmek istiyorum ve 2018-231-001UCV verir.

1. numune hazırlama
<ol><li>Malzeme örnekleri 10 mm çaplı diskler 10 mm çapında silindirik yumruk kesilmiş. Not: Kırılgan malzeme uygun steril çözücüler, 1 h için yumuşadı ve sonra diskleri kesti. Örneğin, çinko aljinat gibi hidrofilik maddeler bu protokol sonrası test edildi ve autoclaved suda örnek kırma önlemek için kesmeden önce ıslatılmış. Ancak, poly(3-hydroxybutyrate-co-3-hydroxyvalerate) gibi hidrofobik diğer malzemeler her türlü düzgün kesilmiş olduğu için önceki şişme gerek yoktur.</li>
	<li>Örnek malzeme diskleri bir vakum fırında 60 ° C'de kuru (&lt; 10-2 Torr) 24 h için. Not: Bazı materyaller yüksek kurutma sıcaklığı gerekebilir. Ancak, Termal malzeme aşağılamak bir sıcaklık ulaşamadığı önemlidir.</li>
	<li>Dijital kumpas ile malzeme film kalınlıkları ölçmek. Not: Bu iletişim kuralı kullanımı sürekli ve benzer kalınlıkları ile malzeme filmlerin Antimikrobiyal aktivite farklı malzemelerin karşılaştırırken önerir.</li>
	<li>Her numune etanol p 10 dk ve sonraki ultraviyole (UV) radyasyon her yan başına 1 h için daldırma tarafından sterilize. Not: UV radyasyon UV-C radyasyon bir 12,0 W lamba ile steril Petri kabına bir laminar akış başlık içinde her numune yerleştirerek gerçekleştirilir. Dikkat: çünkü mutajenik araştırmacılar kendilerini UV radyasyon için açığa değil.</li>
	<li>1.1, 1.2, 1.3 ve 1.4 adımları gerçekleştirin. Denetim malzeme disklerle. Not: Denetim diskleri difüzyon ve iletişim yöntemi olarak polietilen tereftalat (PET) veya alternatif sigara antimikrobiyal malzemeler kullanılabilir. Ayrıca, nanokompozitlerin veya işlem görmüş malzemeler karakterize, ana malzeme kontrol malzemesi olarak kullanılmalıdır.</li>
</ol>2. tavsiye edilen mikroorganizmalar
Not: Çok çeşitli mikroorganizmalar karşı test edilmiş malzeme antimikrobiyal kapasite çalışmaya 3 farklı mikroorganizmalar kullanımı önerilir.
<ol><li>3 mikroorganizmaları saf kültürler: gram-pozitif bakteri Staphylococcus aureus, gram-negatif bakteri Escherichia colive Maya Candida albicans. Not: Diğer mikroorganizma türler de bu iletişim kuralıyla kuluçka koşulları gerekirse değiştirerek test edilebilir. Dikkat: Bu protokol için istihdam Mikroorganizma tipine göre gerekli Biyogüvenlik ölçümleri izlenmesi gerekir.</li>
	<li>Önceden steril veya autoclaved malzeme ile çalışabilir ve Bunsen burner mikrobiyal manipülasyon veya biyolojik güvenlik kabini bütün işlemi sırasında (gerekirse) aseptik koşullar sağlamak için; Not: Önerilen otoklav 121 ° C 15dk sırasında kültür ortamlar için ve 121 ° C çalışma malzeme ve biyolojik artıkları için 20 min sırasında koşullardır.</li>
</ol>3. agar Disk difüzyon testi (difüzyon yöntemi)
Not: bir sıvı difüzyon antimikrobiyal bileşiklerin ileri düzey malzemeler ana antimikrobiyal mekanizması olabilir durumlarda difüzyon yöntemi bu malzemelerin antimikrobiyal kapasitesi hakkında çok yararlı bilgiler sağlayabilir. Agar plaka merkezinde bulunan malzeme diske mikroorganizmaların büyüme inhibisyonu sonra 24 h kültürünün oluştuğu bir şeffaf halka bölgesi (halo) oluşabilir (bkz. Şekil 1).
<ol><li>
Difüzyon testi prosedürü
	<ol>
<li>Hazırlama ve otoklav tryptic soya agar (TSA) üreticinin yönergeleri izleyin.</li>
		<li>TSA steril Petri yemekler Bunsen brülör veya laminar akış kukuIeta kullanarak aseptik koşullar altında içine dökün. Not: TSA plakaları 4-6 mm kalınlığında olmalıdır.</li>
		<li>TSA ile 18-24 h 37 ° C'de bir kuluçka-Petri yemeklerinde tükenmesiyle için test edilecek farklı mikroorganizmalar kültür</li>
		<li>Hazırlama ve otoklav tryptic soya suyu (TSB) üreticinin yönergeleri izleyin.</li>
		<li>Tekerlekli sandalye basketbolu aseptik şartlarda Bunsen brülör veya laminar akış kukuIeta kullanarak önceden sterilize edilmiş serolojik pipet ile 50 mL önceden sterilize santrifüj tüpü dökmek.</li>
		<li>Kimden adım 3.1.3 25 mL steril pamuklu çubukla ve girdap kullanarak bir steril santrifüj tüpü bulunan TSB birkaç koloniler resuspend onları karıştırma bir üniforma elde etmek 1 dakika.</li>
		<li>Absorbans ayarlamak (vasıl 540 nm) ile spektrofotometre birimleri (CFU) mL oluşturan colony uygun sayıda kültürünün: yaklaşık 1.5 x 108 CFU/mL 1 x 106 -5 x 106 CFU/mL için mantar ve bakteri için. Not: Kültür ve küvet birimleri absorbans ölçmek için kullanılan spektrofotometre, türüne göre seçilmelidir.</li>
		<li>Girdap mikroorganizma dağılım geliştirmek ve kısaca bu mikrobiyal süspansiyon steril pamuklu çubukla daldırın için 5 saniye için mikrobiyal suyu. Sıvı fazlalığı kültür içeren tüp duvara basarak çubukla kaldırın.</li>
		<li>Mikrobiyal suyu süspansiyon ile steril pamuklu çubukla tüm yüzeyini mikroorganizma ile kapak ve 5 min için aşı sonra kuruması için 3 uçak TSA levha yüzeyine eşit olarak çizgi. Not: herhangi bir nem kaldırmak için TSA plakaları 10-15 dk önce aşılama için 37 ° C'de ters bir pozisyonda açık yerleştirilmesi gerekir.</li>
		<li>Onları bir ölçek etanol ile % 96 çeker ve sonra onları yanan Bunsen brülör veya alkol yazıcı ile bir çift cımbız sterilize.</li>
		<li>Test edilecek ve disk steril Cımbız kullanarak TSA plakaları ortasındaki denetlemek için örnek diskleri yerleştirebilirsiniz.</li>
		<li>Tükenmesiyle TSA tabak 24 h 37 ° C'de ters bir pozisyonda kuluçkaya. Not: herhangi bir kirlenme riski ortadan kaldırmak için bu ters bir pozisyonda TSA plakaları kuluçkaya için tavsiye edilir. Örnek disk TSA plakaları ayırır, ancak, bu adım ters bir pozisyonda gerçekleştirme. Bu durumda, bu tabakalar laminar akış başlıklı kuru için tavsiye edilir. Bu antimikrobiyal test tekrarlanabilirlik sağlamak için farklı günlerde en az quadriplicate içinde gerçekleştirilmelidir.</li>
	</ol>
</li>
	<li>
Mikrobiyal süspansiyon konsantrasyon ve saflık denetleme Not: Adım 3.1.7'Spektrofotometre ile belirlenen mikrobiyal konsantrasyon doğru olup olmadığını denetleyin ve mikrobiyal hiçbir çevresel bulaşma olduğunu emin olmak için aşağıdaki adımlar gereklidir. Mikrobiyal çevresel kirlenme mikrobiyal kolonileri çeşitli görünüm kültürünün 24 saat sonra tarafından kolayca tespit edilebilir. Ayrıca, Tekerlekli sandalye basketbolu orta yok mikrobiyal kirlenme ondalık seri dilutions onun manipülasyon sırasında bir negatif TSB kontrol plaka ile sağlanmış olur gerekir.<ol>
<li>(Adım 3.1.4 hazır) steril TSB aseptik şartlarda uygun autoclaved ipuçları ile bir micropipette kullanarak steril microcentrifuge tüpler içine dağıtmak. Bir tanesi bir negatif TSB kontrol kullanılacaktır.</li>
		<li>Ondalık seri dilutions adım 3.1.9 TSB içeren steril microcentrifuge tüpler'de kullanılan mikrobiyal suyu süspansiyon ile gerçekleştirin.</li>
		<li>Her seyreltme önceden sterilize Drigalski spatula ya da alternatif bir araç kullanarak TSA plakalar üzerinde 100 µL yayıldı. Ayrıca TSB orta 100 μL mikroorganizma (3.2.1. adımda hazırlanan) bir TSA plaka üzerinde olmadan bir negatif TSB kontrol plaka yayıldı.</li>
		<li>Tükenmesiyle TSA plakaları tükenmesiyle 37 ° C'de 24 h için kuluçkaya.</li>
		<li>Koloniler CFU/mL 3.1.7. adımda belirlenen benzer kontrol etmek saymak.</li>
		<li>Hiçbir mikrobiyal çevresel kirlenme ile tek tip kolonileri bir TSA tabaklarda olduğunu kontrol edin.</li>
		<li>Hiçbir mikrobiyal kirlenme yok kolonileri gösterilen TSB negatif kontrol plaka üzerinde olup olmadığını kontrol edin</li>
	</ol>
</li>
</ol>4. malzeme yüzeyleri (iletişim yöntemi) üzerinde antimikrobiyal aktivitesi ölçümü
 Not: Ana antimikrobiyal mekanizması gelişmiş bazı malzemelerin yüzey temas olabilir durumlarda iletişim yöntemi bu malzemelerin antimikrobiyal kapasitesi hakkında çok yararlı bilgiler sağlayabilir. Bu yöntemde, mikroorganizmaların doğrudan malzeme yüzeyine yerleştirilir ve onların büyüme inhibisyon belirli bir miktar sonra belirlenebilir.
<ol><li>
İlk yordam
	<ol>
<li>Hazırlama ve otoklav TSB üreticinin yönergeleri izleyin.</li>
		<li>Tekerlekli sandalye basketbolu aseptik şartlarda Bunsen brülör veya laminar akış kukuIeta kullanarak önceden sterilize edilmiş serolojik pipet ile 50 mL önceden sterilize santrifüj tüpü dökmek.</li>
		<li>Tükenmesiyle test edilecek farklı mikroorganizmalar tüp TSB bir orbital Shaker (140 devir/dakika) ile 37 ° C'de bir gecede kültür</li>
		<li>Gecede kültür TSB 20 ml 50 mL önceden sterilize santrifüj tüp için yaklaşık 10 bir konsantrasyon içinde seyreltik6 CFU/mL (540, Spektrofotometre ile belirlenen nm). Not: Kültür ve küvet birimleri absorbans ölçmek için kullanılan spektrofotometre, türüne göre seçilmelidir.</li>
		<li>Bu kültürün ondalık seri dilutions TSB içeren steril microcentrifuge tüplerde gerçekleştirin. 100 µL TSA plakaları kültürünün yayılı ve tükenmesiyle 37 ° C'de 24 h için kuluçkaya.</li>
		<li>Koloniler yaklaşık 1 x 106 CFU/mL bir ilk hücre konsantrasyonu sağlamak için sayma</li>
		<li>Sonra 24 saat ve 24 saat steril 48-şey plaka kuyu ayıran sonra mikrobiyal sayım için test edilmiş malzemelerin her türdeki 4 örnek diskleri mikrobiyal sayım için denetim diskler yer 4.</li>
		<li>Her disk yüzeyine mikrobiyal süspansiyon 150 µL pipet.</li>
	</ol>
</li>
	<li>
Mikrobiyal kontrol ve test malzemeleri (24 saat sonra) sayma
	<ol>
<li>4.1.6 adımdan sonra tükenmesiyle 24 h 37 ° C'de 48-şey tabak içinde kalan 4 örnek diskleri kuluçkaya. Not: Bu 24 h kuluçka süresi daha kısa veya daha uzun zaman Büyüme inhibisyon çalışma için değiştirilebilir.</li>
		<li>24 h, kuluçka sonra 4 örnek disk yüzeyine steril PBS 850 µL pipet ve mikrobiyal süspansiyon 150 µL ile karıştırın.</li>
		<li>PBS/mikrobiyal süspansiyon karışımı ve her disk 48-şey plaka toplamak ve bir 10 mL önceden steril tüp aktarabilirsiniz.</li>
		<li>Girdap PBS/mikrobiyal süspansiyon karışımı ve her disk için 1 dk, solüsyon içeren temizleyicide bu 50 Hz'de 5 min ve girdap bu hiç uygun mikroorganizmalar kalmasını sağlamak 1 dk için tekrar malzeme yüzeye yapıştırılır.</li>
		<li>Ondalık seri dilutions her sonicated kültür TSB içeren steril microcentrifuge tüplerde gerçekleştirmek ve TSA plakaları kültürünün 100 µL yaymak ve tükenmesiyle 37 ° C'de 24 h için kuluçkaya.</li>
		<li>Her örnek ve kontrol disk yüzeyi uygun mikroorganizmalar vardır kolonileri saymak. (CFU/ml) hücrelerin bu sayıda hızlı.</li>
		<li>Son mikrobiyal kültür örnek ve denetim diskler için bir fotoğraf çekmek.</li>
	</ol>
</li>
</ol>5. antimikrobiyal sonuçları analiz
<img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/57710/57710fig1.jpg"> Şekil 1: antimikrobiyal "halo" normalleştirilmiş genişliği ölçülerini. Bu panel inhibisyon bölge (dız) çapı ve disk çapı (d) gösterir. <a href="/files/ftp_upload/57710/57710fig1large.jpg" target="_blank">Bu rakam daha büyük bir versiyonunu görüntülemek için buraya tıklayınız.</a>
<ol><li>
Difüzyon yöntemi sonuçları analiz
	<ol>
<li>Disk çapı (d) ve (dız) inhibisyon bölgesinin çapı ölçmek (bkz. Şekil 1) bir dijital kumpas ile. Not: İnhibisyon bölge veya antimikrobiyal "halo" antimikrobiyal malzeme disk tarafından üretilen mikrobiyal Büyüme inhibisyon sonucu olarak oluşturulur (bkz. Şekil 1). Nerede mikroorganizmaların büyümüş düzgün bir şeffaf halka bölgeyi kapatmak için örnek plaka kalanı ile karşılaştırıldığında gözlemlemek mümkündür (opak bölge).</li>
		<li>Denklem (1) uygulayarak antimikrobiyal "halo" in her yuvarlak yüzey (Batıhalo) normalleştirilmiş genişliğini belirler. (1)<img alt="Equation 1" src="/files/ftp_upload/57710/57710eq1.jpg">
</li>
		<li>Ortalama ve standart sapma her örnek "belirlenen antimikrobiyal halo" 4 KBhalo değerleri normalleştirilmiş genişliği belirleyin.</li>
		<li>Son mikrobiyal kültür malzemesi disk ile bir fotoğraf çekmek. Not: İnhibisyon bölge (dız) çapı ve disk çapı (d) Ayrıca uygun bir görüntü işleme yazılımı kullanarak 5.1.4. adımda alınan fotoğraf üzerinden ölçülebilir.</li>
	</ol>
</li>
	<li>
İletişim yöntemi sonuçları analiz
	<ol>
<li>Denklem (2) göre kurtarıldı canlı mikroorganizmaların sayısını belirleyin. (2)<img alt="Equation 2" src="/files/ftp_upload/57710/57710eq2.jpg"> Not: Burada, N uygun mikroorganizmalar cm testi numune2 başına kurtarılan sayısıdır; C plaka sayısıdır; D seyreltme faktörü olduğunu; A örnek disk çapı ile belirlenen cm2 testi numune yüzey alanı olduğunu.</li>
		<li>Denklem (3) uygulayarak hücre büyüme inhibisyonu yansıtacak şekilde canlılık (LV) kaybı belirler. (3)<img alt="Equation 3" src="/files/ftp_upload/57710/57710eq3v3.jpg"> Not: C uygun mikroorganizmalar (N) ortalama sayısı CFU/mL•cm2kontrol örnekler 24 saat sonra kurtarılan, burada; S uygun mikroorganizmalar (N) CFU/mL•cm2testi numune 24 saat sonra kurtarılan, sayısıdır.</li>
		<li>Ortalama ve standart sapma her örnek 4 kararlı LV(%) değerleri ile canlılık kaybı belirler.</li>
	</ol>
</li>
</ol>

<ol><li>Sydnor, E. R. M., Perl, T. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Hospital+epidemiology+and+infection+control+in+acute-care+settings%5BTitle%5D)+AND+%22Clin+Microbiol+Rev%22%5BJournal%5D)">Hospital epidemiology and infection control in acute-care settings.</a> Clin Microbiol Rev. 24 (1), 141-173 (2011).</li>
<li>Chessa, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Staphylococcus+aureus+and+Staphylococcus+epidermidis+Virulence+Strains+as+Causative+Agents+of+Persistent+Infections+in+Breast+Implants%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">Staphylococcus aureus and Staphylococcus epidermidis Virulence Strains as Causative Agents of Persistent Infections in Breast Implants.</a> PLoS One. 11 (1), e0146668(2016).</li>
<li>Pandey, H., Parashar, V., Parashar, R., Prakash, R., Ramteke, P. W., Pandey, A. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Controlled+drug+release+characteristics+and+enhanced+antibacterial+effect+of+graphene+nanosheets+containing+gentamicin+sulfate%5BTitle%5D)+AND+%22Nanoscale%22%5BJournal%5D)">Controlled drug release characteristics and enhanced antibacterial effect of graphene nanosheets containing gentamicin sulfate.</a> Nanoscale. 3 (10), 4104(2011).</li>
<li>Jia, Z., Shen, D., Xu, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Synthesis+and+antibacterial+activities+of+quaternary+ammonium+salt+of+chitosan%5BTitle%5D)+AND+%22Carbohydr+Res%22%5BJournal%5D)">Synthesis and antibacterial activities of quaternary ammonium salt of chitosan.</a> Carbohydr Res. 333 (1), 1-6 (2001).</li>
<li>Liu, Y., Wang, X., Yang, F., Yang, X. <a target="_blank" href="https://www.sciencedirect.com/science/article/pii/S1387181108000425">Excellent antimicrobial properties of mesoporous anatase TiO2 and Ag/TiO2 composite films.</a> Microporous Mesoporous Mater. 114 (1-3), 431-439 (2008).</li>
<li>Wang, L., Chen, J., Shi, L., Shi, Z., Ren, L., Wang, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+promotion+of+antimicrobial+activity+on+silicon+substrates+using+a+%26%2334%3Bclick%26%2334%3B+immobilized+short+peptide%5BTitle%5D)+AND+%22Chem+Commun+%28Camb%29%22%5BJournal%5D)">The promotion of antimicrobial activity on silicon substrates using a &#34;click&#34; immobilized short peptide.</a> Chem Commun (Camb). 50 (8), Cambridge, England. 975-977 (2014).</li>
<li>Kümmerer, K. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/15215223">Resistance in the environment.</a> J Antimicrob Chemother. 54 (2), 311-320 (2004).</li>
<li>Ng, V. W. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Antimicrobial+hydrogels%3A+A+new+weapon+in+the+arsenal+against+multidrug-resistant+infections%5BTitle%5D)+AND+%22Adv+Drug+Deliv+Rev%22%5BJournal%5D)">Antimicrobial hydrogels: A new weapon in the arsenal against multidrug-resistant infections.</a> Adv Drug Deliv Rev. 78, 46-62 (2014).</li>
<li>Hegstad, K., Langsrud, S., Lunestad, B. T., Scheie, A. A., Sunde, M., Yazdankhah, S. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Does+the+Wide+Use+of+Quaternary+Ammonium+Compounds+Enhance+the+Selection+and+Spread+of+Antimicrobial+Resistance+and+Thus+Threaten+Our+Health%3F%5BTitle%5D)+AND+%22Microb+Drug+Resist%22%5BJournal%5D)">Does the Wide Use of Quaternary Ammonium Compounds Enhance the Selection and Spread of Antimicrobial Resistance and Thus Threaten Our Health?</a> Microb Drug Resist. 16 (2), 91-104 (2010).</li>
<li>Rana, D., Matsuura, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Surface+modifications+for+antifouling+membranes%5BTitle%5D)+AND+%22Chem+Rev%22%5BJournal%5D)">Surface modifications for antifouling membranes.</a> Chem Rev. 110 (4), 2448-2471 (2010).</li>
<li>Lok, C. N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Proteomic+analysis+of+the+mode+of+antibacterial+action+of+silver+nanoparticles%5BTitle%5D)+AND+%22J+Proteome+Res%22%5BJournal%5D)">Proteomic analysis of the mode of antibacterial action of silver nanoparticles.</a> J Proteome Res. 5 (4), 916-924 (2006).</li>
<li>Chen, X., Schluesener, H. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Nanosilver%3A+A+nanoproduct+in+medical+application%5BTitle%5D)+AND+%22Toxicol+Lett%22%5BJournal%5D)">Nanosilver: A nanoproduct in medical application.</a> Toxicol Lett. 176 (1), 1-12 (2008).</li>
<li>Ahamed, M., AlSalhi, M. S., Siddiqui, M. K. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Silver+nanoparticle+applications+and+human+health%5BTitle%5D)+AND+%22Clin+Chim+Acta%22%5BJournal%5D)">Silver nanoparticle applications and human health.</a> Clin Chim Acta. 411 (23-24), 1841-1848 (2010).</li>
<li>Yeaman, M. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mechanisms+of+Antimicrobial+Peptide+Action+and+Resistance%5BTitle%5D)+AND+%22Pharmacol+Rev%22%5BJournal%5D)">Mechanisms of Antimicrobial Peptide Action and Resistance.</a> Pharmacol Rev. 55 (1), 27-55 (2003).</li>
<li>McLean, D. T. F., Lundy, F. T., Timson, D. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((IQ-motif+peptides+as+novel+anti-microbial+agents%5BTitle%5D)+AND+%22Biochimie%22%5BJournal%5D)">IQ-motif peptides as novel anti-microbial agents.</a> Biochimie. 95 (4), 875-880 (2013).</li>
<li>Brogden, K. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Antimicrobial+peptides%3A+Pore+formers+or+metabolic+inhibitors+in+bacteria%3F%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Rev+Microbiol%22%5BJournal%5D)">Antimicrobial peptides: Pore formers or metabolic inhibitors in bacteria?</a> Nat Rev Microbiol. 3 (3), 238-250 (2005).</li>
<li>Ghosh, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Small+molecular+antibacterial+peptoid+mimics%3A+The+simpler+the+better%21%5BTitle%5D)+AND+%22J+Med+Chem%22%5BJournal%5D)">Small molecular antibacterial peptoid mimics: The simpler the better!</a> J Med Chem. 57 (4), 1428-1436 (2014).</li>
<li>Chongsiriwatana, N. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Peptoids+that+mimic+the+structure%2C+function%2C+and+mechanism+of+helical+antimicrobial+peptides%5BTitle%5D)+AND+%22Proc+Natl+Acad+Sci%22%5BJournal%5D)">Peptoids that mimic the structure, function, and mechanism of helical antimicrobial peptides.</a> Proc Natl Acad Sci. 105 (8), 2794-2799 (2008).</li>
<li>Chen, Y., Mant, C. T., Farmer, S. W., Hancock, R. E. W., Vasil, M. L., Hodges, R. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Rational+design+of+alpha-helical+antimicrobial+peptides+with+enhanced+activities+and+specificity%2Ftherapeutic+index%5BTitle%5D)+AND+%22J+Biol+Chem%22%5BJournal%5D)">Rational design of alpha-helical antimicrobial peptides with enhanced activities and specificity/therapeutic index.</a> J Biol Chem. 280 (13), 12316-12329 (2005).</li>
<li>Porter, E. A., Wang, X., Lee, H. S., Weisblum, B., Gellman, S. H. <a target="_blank" href="https://www.nature.com/articles/35007145">Non-haemolytic beta-aminoacid oligomers.</a> Nature. 404 (6778), 565(2000).</li>
<li>Gao, Q., Li, P., Zhao, H., Chen, Y., Jiang, L., Ma, P. X. <a target="_blank" href="http://pubs.rsc.org/en/content/articlelanding/2017/py/c7py01495c">Methacrylate-ended Polypeptides and Polypeptoids for Antimicrobial and Antifouling Coatings.</a> Polym Chem. 8 (41), 6386-6397 (2017).</li>
<li>Serrano-Aroca, Á, Gómez-Ribelles, J. L., Monleón-Pradas, M., Vidaurre-Garayo, A., Suay-Antón, J. <a target="_blank" href="https://www.sciencedirect.com/science/article/pii/S0014305707004211">Characterisation of macroporous poly(methyl methacrylate) coated with plasma-polymerised poly(2-hydroxyethyl acrylate).</a> Eur Polym J. 43 (10), 4552-4564 (2007).</li>
<li>Serrano-Aroca, Á, Monleón-Pradas, M., Gómez-Ribelles, J. L. <a target="_blank" href="https://www.sciencedirect.com/science/article/pii/S0032386107001590">Plasma-induced polymerisation of hydrophilic coatings onto macroporous hydrophobic scaffolds.</a> Polymer (Guildf). 48 (7), 2071-2078 (2007).</li>
<li>Serrano-Aroca, Á, Monleón-Pradas, M., Gómez-Ribelles, J. L., Rault, J. <a target="_blank" href="https://www.sciencedirect.com/science/article/pii/S0014305715003043">Thermal analysis of water in reinforced plasma-polymerised poly(2-hydroxyethyl acrylate) hydrogels.</a> Eur Polym J. 72, 523-534 (2015).</li>
<li>Monleón-Pradas, M., Gómez-Ribelles, J. L., Serrano-Aroca, Á, Gallego-Ferrer, G., SuayAntón, J., Pissis, P. <a target="_blank" href="https://link.springer.com/article/10.1007/s003960000426">Interaction between water and polymer chains in poly(hydroxyethyl acrylate) hydrogels.</a> Colloid Polym Sci. 279 (4), 323-330 (2001).</li>
<li>Serrano-Aroca, Á, Monleón-Pradas, M., Gómez-Ribelles, J. L. <a target="_blank" href="https://link.springer.com/article/10.1007/s00396-007-1755-0">Effect of crosslinking on porous poly(methyl methacrylate) produced by phase separation.</a> Colloid Polym Sci. 286 (2), 209-216 (2008).</li>
<li>Monleón-Pradas, M., Gómez-Ribelles, J. L., Serrano-Aroca, Á, Gallego Ferrer, G., Suay Antón, J., Pissis, P. <a target="_blank" href="https://www.sciencedirect.com/science/article/pii/S0032386100007424">Porous poly (2-hydroxyethyl acrylate) hydrogels.</a> Polymer (Guildf). 42 (10), 4667-4674 (2001).</li>
<li>Serrano-Aroca, Á, Monleón-Pradas, M., Gómez-Ribelles, J. L. <a target="_blank" href="https://link.springer.com/article/10.1007/s00396-006-1614-4">Macroporous poly(methyl methacrylate) produced by phase separation during polymerisation in solution.</a> Colloid Polym Sci. 285 (7), 753-760 (2007).</li>
<li>Serrano-Aroca, Á, Llorens-Gámez, M. <a target="_blank" href="https://www.sciencedirect.com/science/article/pii/S0032386117307504">Dynamic mechanical analysis and water vapour sorption of highly porous poly(methyl methacrylate).</a> Polymer (Guildf). 125, 58-65 (2017).</li>
<li>Serrano-Aroca, Á, Campillo-Fernández, A. J., Gómez-Ribelles, J. L., Monleón-Pradas, M., Gallego-Ferrer, G., Pissis, P. <a target="_blank" href="https://www.sciencedirect.com/science/article/pii/S0032386104010158">Porous poly(2-hydroxyethyl acrylate) hydrogels prepared by radical polymerisation with methanol as diluent.</a> Polymer (Guildf). 45 (26), 8949-8955 (2004).</li>
<li>Rodríguez-Hernández, J. C., Serrano-Aroca, Á, Gómez-Ribelles, J. L., Monleón-Pradas, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Three-dimensional+nanocomposite+scaffolds+with+ordered+cylindrical+orthogonal+pores%5BTitle%5D)+AND+%22J+Biomed+Mater+Res+-+Part+B%3A+Appl+Biomater%22%5BJournal%5D)">Three-dimensional nanocomposite scaffolds with ordered cylindrical orthogonal pores.</a> J Biomed Mater Res - Part B: Appl Biomater. 84 (2), 541-549 (2008).</li>
<li>Brígido-Diego, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Acrylic+scaffolds+with+interconnected+spherical+pores+and+controlled+hydrophilicity+for+tissue+engineering%5BTitle%5D)+AND+%22J+Mater+Sci+Mater+Med%22%5BJournal%5D)">Acrylic scaffolds with interconnected spherical pores and controlled hydrophilicity for tissue engineering.</a> J Mater Sci Mater Med. 40 (18), 4881-4887 (2005).</li>
<li>Serrano-Aroca, Á, Ruiz-Pividal, J. F., Llorens-Gámez, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Enhancement+of+water+diffusion+and+compression+performance+of+crosslinked+alginate+with+a+minuscule+amount+of+graphene+oxide%5BTitle%5D)+AND+%22Sci+Rep%22%5BJournal%5D)">Enhancement of water diffusion and compression performance of crosslinked alginate with a minuscule amount of graphene oxide.</a> Sci Rep. 7, 11684(2017).</li>
<li>Serrano-Aroca, Á, Deb, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Synthesis+of+irregular+graphene+oxide+tubes+using+green+chemistry+and+their+potential+use+as+reinforcement+materials+for+biomedical+applications%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">Synthesis of irregular graphene oxide tubes using green chemistry and their potential use as reinforcement materials for biomedical applications.</a> PLoS One. 12 (9), e0185235(2017).</li>
<li>Sánchez-Correa, F., Vidaurre-Agut, C., Serrano-Aroca, A., Campillo-Fernández, A. J. <a target="_blank" href="https://onlinelibrary.wiley.com/doi/abs/10.1002/app.46158">Poly(2-hydroxyethyl acrylate) hydrogels reinforced with graphene oxide: Remarkable improvement of water diffusion and mechanical properties.</a> J Appl Polym Sci. , (2018).</li>
<li>Serrano-Aroc, Á, Iskandar, L., Deb, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Green+synthetic+routes+to+alginate-graphene+oxide+composite+hydrogels+with+enhanced+physical+properties+for+bioengineering+applications%5BTitle%5D)+AND+%22Eur+Polym+J%22%5BJournal%5D)">Green synthetic routes to alginate-graphene oxide composite hydrogels with enhanced physical properties for bioengineering applications.</a> Eur Polym J. 103, 198-206 (2018).</li>
<li>Llorens-Gámez, M., Serrano-Aroca, Á <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Low-Cost+Advanced+Hydrogels+of+Calcium+Alginate%2FCarbon+Nanofibers+with+Enhanced+Water+Diffusion+and+Compression+Properties%5BTitle%5D)+AND+%22Polymers+%28Basel%29%22%5BJournal%5D)">Low-Cost Advanced Hydrogels of Calcium Alginate/Carbon Nanofibers with Enhanced Water Diffusion and Compression Properties.</a> Polymers (Basel). 10 (4), 405(2018).</li>
<li>Bauer, A. W., Kirby, W. M. M., Sherris, J. C., Turck, A. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Antibiotic+susceptibility+testing+by+a+standardized+single+disk+method%5BTitle%5D)+AND+%22A+J+Clin+Pathol%22%5BJournal%5D)">Antibiotic susceptibility testing by a standardized single disk method.</a> A J Clin Pathol. 45, 493-496 (1966).</li>
<li><a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=%22ISO+Specification+22196%3A+measurement+of+antibacterial+activity+on+plastics+surfaces%22">ISO Specification 22196: measurement of antibacterial activity on plastics surfaces</a>. , 584(2007).</li>
<li>Taubes, G. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/18635788">The bacteria fight back.</a> Science. 321 (5887), 356-361 (2008).</li>
<li>Boucher, H. W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((10+x+%2720+progress--development+of+new+drugs+active+against+Gram-negative+bacilli%3A+an+update+from+the+infectious+diseases+society+of+America%5BTitle%5D)+AND+%22Clinical+Infectious+Diseases%22%5BJournal%5D)">10 x '20 progress--development of new drugs active against Gram-negative bacilli: an update from the infectious diseases society of America.</a> Clinical Infectious Diseases. 56 (12), 1685-1694 (2013).</li>
</ol>

Yazarlar ifşa gerek yok.

Yeni ileri düzey malzemeler Antimikrobiyal aktivite üzerinde 2 mevcut yöntemleri temel 2 tamamlayıcı yordamlar oluşan bu takip etmek kolay iletişim kuralı tarafından çözümlenebilir: agar disk difüzyon testi38 ve Antimikrobiyal aktivite üzerinde ölçülen ISO 22196:2007 norm39göre malzeme yüzeyler.
Bu araştırma alanında birçok literatürde bildirilen antimikrobiyal test son derece tahlil bağımlıdır. Bu nedenle, çok ayrıntılı olması önemli ve tutarlı protokolleri laboratuvarlar arasında bir yerde. Bu makalede, bu yönde bir adımdır. Ayrıca, bu alanda daha az deneyimli ve ayrıntılı, adım adım yordamları takip etmek için doğru sonuçlar gerektiren pek çok araştırmacı için çok yararlı olabilir.
Bu iletişim kuralı malzemeler 10 mm çapında yuvarlak yüzey şekillerine kesme birçok türü ile kullanılabilir. Kırılgan malzeme kesim işlemi daha kolay işlemek 1 h için uygun bir çözücü içinde şişmiş. Böylece, Aljinatlar gibi hidrofilik maddeler autoclaved distile suda sulu. Etanol, keton ve diklorometan, gibi diğer solventler hidrofobik malzemeler 1 h için onları kesmeden önce şişmeye istihdam edilebilir. Ancak, bazı malzemeler poly(3-hydroxybutyrate-co-3-hydroxyvalerate) gibi şişmiş gerekmez ve doğrudan kesilebilir. Bundan sonra bu örnek malzeme diskleri bir vakum fırında kuru ve herhangi bir kirlenme riski ortadan kaldırmak için her numune etanol ve 1 h için UV radyasyon ile sterilize etmek çok önemlidir.
Bu iletişim kuralı TSA ve tekerlekli sandalye basketbolu Kültür Medya ve çok çeşitli mikroorganizmalar ulaşmak için 3 mikroorganizmaları saf kültürler kullanımı önerir: gram pozitif bakteri Staphylococcus aureus, gram-negatif bakteri Escherichia coli, ve Maya Candida albicans. Ancak, alternatif kültür medya ve diğer mikroorganizmalar ihtiyacı farklı kuluçka koşulları da bu iletişim kuralı ile kullanılabilir. Bazen, sadece 1 mikroorganizma yeni bir malzeme antimikrobiyal aktivitesinin ilk bir fikrim var test edilmiştir.
Önerilen 3 karşı güçlü antimikrobiyal aktivite farklı türleri mikroorganizmaların Ayrıca test edilebilir gibi metisiline dirençli Staphylococcus epidermidis (MRSE), antibiyotik dirençli patojenlere karşı gösterilen malzemeleri hangi başarıyla bu iletişim kuralıyla kullanılmıştır. Gram-pozitif metisiline dirençli Staphylococcus aureus (MRSA) ve Vankomisin dirençli enterokoklar (VRE) ve gram-negatif çok endişe neden diğer önemli ilaca dirençli mikroorganizmaların çoğu Pseudomonas aeruginosa40,41.
Biyofilm inhibisyonu ve Antimikrobiyal aktivite karşı diğer tip-in virüs ve parazitler gibi mikroorganizmaların malzemelerin bu iletişim kuralı ile sınanamıyor. Ancak, bu iletişim kuralı çok yararlı bir başlangıç noktası yeni bir antimikrobiyal bir incelenmesi için malzeme gelişmiş sağlar.
Antimikrobiyal agar disk difüzyon testinde önemli bir adım oluşur örnek disk agar medya ile temas alır almaz bazı malzemeleri kat çünkü plaka ortasına yerleştirilen gerekir. Bu durumda, bu örnek dikkatle açılmak için cımbız steril bir çift kullanmak için tavsiye edilir. Öte yandan, iletişim yöntemi, denetimin yıkamak için önemlidir ve örnek diskler çok iyi onları ardından dört kez bir dinç vortexing ve sonication hiçbir uygun mikroorganizmalar sağlamak amacıyla pipetting tarafından PBS ile malzeme yapıştırılır kalır yüzey.
Bu video iletişim kuralı-ebilmek var olmak kullanmak Biyoproses mühendislik, doku mühendisliği, kontrollü ilaç dağıtım, ambalaj malzemeleri, atıksu arıtma ve biyomalzeme ile kullanmak tarım gibi birçok Biyomühendislik uygulamada bir çok arzu antimikrobiyal kapasitesi.
Bu iletişim kuralı ile elde edilen sonuçları nitel (görüntüler) ve nicel (normalleştirilmiş genişliğini antibakteriyel "halo" ve canlılığı kaybı), tekrarlanabilirlik (ortalama ± standart sapma) iyi bir analiz ile. Farklı malzeme karşılaştırırken, difüzyon ve iletişim yöntemi sonuçları analiz ile elde edilen bu ortalama değerler, istatistiksel olarak önemli ölçüde Eğer onlar are çalışma için Türkiye nin analiz, özel mesaj takip tek yönlü ANOVA tarafından çözümlenmesi farklı (p < 0,01).

İmplantın başarısızlık kez antimikrobiyal profilaksi ve aseptik çalışma koşulları rağmen oluşan mikrobiyal enfeksiyonlar bir sonucudur. Bu sorun çok yüksek sağlık maliyetleri neden ve hasta1arasında üzücü olduğunu. Önemli bakteri Staphylococcus aureus gibi şu anda çok tehlikeli patojenler Nozokomiyal Enfeksiyonlar II kateterler ve diğer tıbbi implant ile ilişkili olduğu kabul edilir ve tıp aletleri2ana kirletici vardır. Bu nedenle, roman antimikrobiyal strateji geliştirme acilen günlük ve tıbbi kullanımlar için gereklidir.
Antimikrobiyal ajanlar antibiyotik3, kuaterner amonyum bileşikleri4, metal iyonları/oksitler5ve antimikrobiyal peptidler (amper)6içerir. Antibiyotik yavaş yavaş nedeniyle bakteri direnci7artış nedeniyle antibiyotik aşırı8olduğunu, daha az verimli hale gelmektedir. Kuaterner amonyum bileşikleri sadece nedeniyle9microbial direnci kısa süreli kullanım için çok etkilidir. Metal iyonları/oksitler uzun çok etkili antimikrobiyal ajanlar kullanılmaktadır ve bandaj, su filtreleri, boyalar, vb10,11,12de dahil olmak üzere birçok ortak ticari ürünlerde kullanılır. Ancak, bu tür bileşikleri-ebilmek var olmak zehirli memeli hücreleri13bazı türleri için kanıtlanmıştır.
Mükemmel antimikrobiyal ve immunomodulatory özellikleri14,15amper göstermek ve bakteri çok onlara karşı bir direnç geliştirmeye16zor görünmektedir. Ancak, saf amper üretmek için pahalı bir işlemdir; Bu nedenle, bir büyük ölçekli üretim uygun değildir. Böylece, stratejileri amper üreten sorunları olmuştur sayaç için (Örneğin, küçük moleküler antibakteriyel peptoid taklit eder17, peptoids18, α-peptidler19 ve β-peptidler20) geliştirdi. Metakrilat sona erdi polipeptitler ve polypeptoids antimikrobiyal ve zehirli boya21için sentez.
Geliştirme gibi ileri düzey malzemeler içinde saf yeni antimikrobiyal ajanların veya melez formu, önlemek ve kökenlerinin dirençli enfeksiyonların tedavisinde giderek gereklidir. Doku ve Biyoproses mühendislik gibi birçok Biyomühendislik alanlar için yeni ileri düzey malzemeler çok çeşitli geliştirilmiştir geliştirilmiş kimyasal ve fiziksel özellikleri ile son on yıl içinde çeşitli yöntemlerle: plazma polimerizasyonu üzerine aşılama bir hidrofobik yüzey22,23,24, crosslinking yoğunluk25,26terzilik, polimerizasyon çözüm27,28,29 , 30, porogen çözünme31,32ve tarafından Nanomalzemeler grafen oksit (GO)33,34,35,36 gibi birleşme ve karbon nanofibers (CNFs)37.
Bu yeni malzemelerin antimikrobiyal kapasite, çalışma onların potansiyel Biyomühendislik uygulanabilirliği katlanarak artış olabilir ve bu nedenle, temel haline gelmiştir. Biz bu yeni gelişmiş materyalleri antimikrobiyal aktivitesini ölçmek için bir takip etmek kolay iletişim kuralı mevcut. Burada, numune hazırlama sonra iki tamamlayıcı yöntem takip edilmektedir: ilk agar disk difüzyon testi38 (difüzyon yöntemi) dayanır ve ikinci üzerinde antimikrobiyal etkinliğini ölçmek için ISO 22196:2007 norm39 temel alır malzeme yüzeyleri (iletişim yöntemi).

<table><tbody><tr><td>Silindirik zımba&nbsp;</td><td></td><td></td><td>10 mm çaplı</td></tr><tr><td>Petri kapları</td><td>soria genlab</td><td>P101</td><td>90 mm çap, steril</td></tr><tr><td>Triptik soya agar (TSA)</td><td>Liofilchem</td><td>610052</td><td>Susuz ortam 500 g (toz)</td></tr><tr><td>Triptik soya suyu (TSB)</td><td>Liofilchem</td><td>610053</td><td>Susuz ortam 500 g (toz)</td></tr><tr><td>Steril pamuklu çubuk</td><td>EUTOTUBO</td><td>300200</td><td></td></tr><tr><td>Santrifüj tüpler</td><td>VIDRA FOC, SA</td><td>429900</td><td>50 mL, steril</td></tr><tr><td>Etanol</td><td>VWR</td><td>83813360</td><td>Mutlak etanol</td></tr><tr><td>Steril 48 kuyucuklu plaka</td><td>COSTAR</td><td>3548</td><td>Kapaklı düz tabanlı, doku kültürü ile işlenmiş, pirojenik olmayan, polistiren</td></tr><tr><td>Bir cımbız</td><td>BRAUN</td><td>24612036</td><td>Dişsiz</td></tr><tr><td>Steril fosfat tamponlu salin (PBS).</td><td>VWR</td><td>E404-100TAPBS</td><td></td></tr><tr><td>Bağlı vakum pompalı vakumlu fırın</td><td>JP Selecta, SA</td><td>5900620</td><td></td></tr><tr><td>Laminer akış başlığı</td><td>TELSTAR Technologies, SL</td><td>TELSTAR AH-100</td><td>12.0 W UV-C radyasyon</td></tr><tr><td>lambası Sınıf II Biyolojik güvenlik kabini</td><td>LABOGENE</td><td>MARS 1200</td><td></td></tr><tr><td>İnkübatör</td><td>ASTEC CO, LTD</td><td>SCA-165DR</td><td></td></tr><tr><td>Vorteks karıştırıcı</td><td>Biosan</td><td>V-1 Plus</td><td></td></tr><tr><td>Spektrofotometre</td><td>Macherey-Nagel, Almanya</td><td>Nanocolor UV/VIS II</td><td></td></tr><tr><td>Bunsen brülör</td><td>JP Selecta, SA</td><td>7001539</td><td></td></tr><tr><td>Alkol brülörü</td><td>VIDRA FOC, SA</td><td>1658/20</td><td>Sınıf II biyolojik güvenlik kabini içinde sterilizasyon yapılması gerektiği durumlarda</td></tr><tr><td>Orbital çalkalayıcı</td><td>sartorius stedim</td><td>8864845</td><td></td></tr><tr><td>Sonikatör</td><td>SELECTA 3000617</td><td></td><td>50/60 Hz</td></tr><tr><td>Dijital kumpas</td><td>ACHA</td><td>17-260</td><td>0-150 mm</td></tr><tr><td>Serolojik pipet</td><td>Fisherbrand</td><td>13-678-11</td><td>25 mL, steril</td></tr><tr><td>Serolojik pipet</td><td>VWR</td><td>612-4950</td><td>5 mL, steril</td></tr><tr><td>Serolojik pipet</td><td>VWR</td><td>612-5541</td><td>10 mL, steril</td></tr><tr><td>Mikropipet</td><td>GILSON</td><td>FA10005P</td><td>Pipetman L P200L, plastik 20-200 ve mikro; L</td></tr><tr><td>Mikropipet</td><td>GILSON</td><td>F123602</td><td>Pipetman P1000, 200-1000 ve mikro; L Mikropipet</td></tr><tr><td>&nbsp;</td><td>GILSON</td><td>FA10016</td><td>Pipetman L P12X300L, 20-300 ve mikro; L</td></tr><tr><td>Mikropipet uçları</td><td>LABBOX</td><td>TIBP-200-960</td><td>2-200 & L</td></tr><tr><td>Mikropipet uçları</td><td>LABBOX</td><td>TIBP-1K0-480</td><td>100-1000 & L</td></tr><tr><td>Önceden sterilize edilmiş tüp&nbsp;</td><td>INSULAB</td><td>301402</td><td>10 mL&nbsp;</td></tr><tr><td>Fotoğraf makinesi</td><td>Canon EOS 5D</td><td></td><td>Yüksek çözünürlüğe sahip herhangi bir kamera da kullanılabilir</td></tr><tr><td>Gram pozitif bakteriler Staphylococcus aureus</td><td></td><td>&nbsp; suş V329</td><td>Cucarella ve ark. J Bacteriol < güçlü> 183 (9) < / güçlü >, &nbsp; 2888&ndash; 2896 (2001)</td></tr><tr><td>Gram negatif bakteriler Escherichia coli</td><td>Colecci&oacute; n Espa&ntilde; ola de Cultivos Tipo CECT CECT</td><td>101</td><td></td></tr><tr><td>Maya Candida albicans</td><td>Colecci&oacute; n Espa&ntilde; ola de Cultivos Tipo CECT CECT</td><td>1394</td><td></td></tr><tr><td>Mikrosantrifüj tüpleri&nbsp;</td><td>DASLAB</td><td>175508</td><td>1,5 mL</td></tr><tr><td>Otoklav</td><td>JP Selecta, SA</td><td>4002136</td><td></td></tr><tr><td>Spektrofotometre küvetleri</td><td>UVAT Bio CB</td><td>F-0902-02</td><td>4,5 mL</td></tr><tr><td>Drigalski spatula</td><td>LABBOX</td><td>SPRP-L05-1K0</td><td>Steril, tek kullanımlık&nbsp;</td></tr><tr><td>cam bilyeler (2 mm çap)</td><td>Hecht Karl</td><td>1401/2</td><td>Otoklavlanabilir, Drigalski spatula</td></tr><tr><td>Otoklav torbalarına</td> alternatif cihaz <td>DELTALAB</td><td>200318</td><td>Mikrobiyolojik kalıntıları veya kontamine materyalleri sterilize etmek için</td></tr><tr><td>Elektronik pipet doldurma cihazı</td><td>JetPip</td><td>JET BIOFIL</td><td></td></tr><tr><td>ISO dişli, dereceli, borosilikat 3.3</td><td>LABBOX</td> <td>laboratuvar şişesiSBG3-100-010</td><td>100 mL, otoklavlama kültür ortamı için</td></tr><tr><td>ISO dişli laboratuvar şişesi, dereceli, borosilikat 3.3</td><td>LABBOX</td><td>SBG3-250-010</td><td>250 mL, otoklavlama kültür ortamı için</td></tr><tr><td>ISO dişli laboratuvar şişesi, dereceli, borosilikat 3.3</td><td>LABBOX</td><td>SBG3-500-010</td><td>500 mL, otoklavlama kültür ortamı için</td></tr><tr><td>ISO dişli laboratuvar şişesi, dereceli, borosilikat 3.3</td><td>LABBOX</td><td>SBG3-1K0-010</td><td>1000 mL, otoklavlama kültür ortamı için</td></tr><tr><td>Lateks eldivenler</td><td>DENIA</td><td>2278000000</td><td></td></tr><tr><td>Sterilizasyon için gösterge bandı</td><td>LABBOX</td><td>STAP-A55-001</td><td>Sterilizasyon işlemine maruz kaldığında renge dönüşen emprenye edilmiş kağıda sahip kendinden yapışkanlı bant.</td></tr><tr><td>Üniversal test tüpü rafı</td><td>LABBOX</td><td>MTSP-001-001</td><td>Santrifüj tüplerini tutmak için Mikrosantrifüj</td></tr><tr><td>tüp rafı</td><td>VWR</td><td>211-0210</td><td>Mikrosantrifüj tüplerini tutmak için</td></tr><tr><td>Steril döngü</td><td>ACEFE SA</td><td>100140055</td><td>10 ve mikro; Mikrobiyal kültür için L kapasite&nbsp;</td></tr><tr><td>Malzeme: M1</td><td>Universidad Cat&oakut; lica de Valencia San Vicente M&aacute; rtir (UCV)</td><td></td><td>Malzeme türü 1&nbsp;</td></tr><tr><td>Malzeme: M2</td><td>Universidad Cat&oacute; lica de Valencia San Vicente M&aacute; rtir (UCV)</td><td></td><td>Malzeme türü 2&nbsp;</td></tr><tr><td>Malzeme: M3</td><td>Universidad Cat&oacute; lica de Valencia San Vicente M&aacute; rtir (UCV)</td><td></td><td>Malzeme türü3</td></tr><tr><td>Malzeme M4</td><td>Universidad Cat&oacute; lica de Valencia San Vicente M&aacute; rtir (UCV)</td><td></td><td>Malzeme türü 4&nbsp;</td></tr><tr><td>Malzeme: C</td><td>: Universidad Cat&oakut; lica de Valencia San Vicente M&aacute; rtir (UCV)</td><td></td><td>Kontrol malzemesi</td></tr></tbody></table>

antimikrobiyal biyomühendislik uygulamalar için gelişmiş malzeme karakterizasyonu

Antimicrobial Characterization of Advanced Materials for Bioengineering Applications

Gelişmiş özellikleri ile yeni ileri düzey malzemeler geliştirilmesi Biyomühendislik uygulamaları geniş bir daha fazla önem kazanmaktadır. Böylece, birçok roman Biyomalzeme doku mühendisliği ve kontrollü ilaç dağıtım gibi biyomedikal uygulamalar için gerekli belirli ortamlarda taklit edecek şekilde dizayn edilmektedir. Hücreleri veya enzim immobilizasyon için gelişmiş özelliklere sahip malzemeler de geçerli araştırma konusunun Biyoproses Mühendisliği gelişmedir. Ancak, bu uygulamalar bir malzemenin en çekici özelliklerinden biri istenmeyen bulaşmaları önlemek için antibiyotik kapasitesidir. Bunun için biz takip etmek kolay iletişim kuralları (i) agar disk difüzyon testi (difüzyon yöntemi) ve (ii) ISO 22196:2007 norm malzeme yüzeylerde (temas Antimikrobiyal aktivite ölçmek için temel malzemeleri antimikrobiyal karakterizasyonu için mevcut yöntemi). Bu iletişim kuralı mikroorganizmaların geniş bir kapsayacak şekilde gram pozitif ve gram-negatif bakteri ve Maya kullanılarak gerçekleştirilmelidir. Örnek olarak, Staphylococcus aureus, Escherichia colive Candida albicanskarşı bu protokol sonrası 4 malzeme farklı kimyasal doğa ile test edilir. Bu testlerin sonuçlarını ilk malzeme ve 3 diğer malzemeler için gram pozitif ve gram-negatif bakteri karşı antibakteriyel etkinliği artan için sigara Antimikrobiyal aktivite sergilemek. Ancak, 4 malzemelerin hiçbiri Candida albicansbüyümesini inhibe edebiliyoruz.

Bu iletişim kuralı, bir örnek olarak kullanıldı, mikroorganizmaların antimikrobiyal kapasitesi 3 karşı farklı kimyasal doğa'nın 4 malzemelerin test etmek için önerilen: Staphylococcus aureus, Escherichia colive Candida albicans . Kontrol disk (C, resim gösterilmez) oluştu olarak agar disk difüzyon testler (difüzyon yöntemi) Sigara Antimikrobiyal aktivite ilk malzeme (M1) için sergilenen ve gram-pozitif ve gram-negatif karşı antibakteriyel etkinliği artan bakteriler diğer 3 malzemeler için M2, M3 ve M4 (bkz. Şekil 2).
<img alt="Figure 2" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/57710/57710fig2.jpg"> Şekil 2: antimikrobiyal difüzyon yöntemi sonuçları. Bu panel kuluçka 24 h sonra 4 malzeme (M1, M2, M3 ve M4) disklerin (10 mm çap x 1 mm kalınlık) S. aureus ve E. coli karşı antimikrobiyal difüzyon yöntemi gösterir. <a href="/files/ftp_upload/57710/57710fig2large.jpg" target="_blank">Bu rakam daha büyük bir versiyonunu görüntülemek için buraya tıklayınız.</a>
Şekil 3 antimikrobiyal "(1) denklemi ile hesaplanan halo" (Kuzeyhalo) farklı örnek malzemeler için M1, M2, M3 ve M4 gram pozitif ve gram-negatif bakteri karşı farklı normalleştirilmiş genişlikleri gösterir. Ancak, 4 malzemelerin hiçbiri Maya Candida albicans (resimler gösterilmez) büyümesini inhibe başardık.
<img alt="Figure 3" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/57710/57710fig3v2.jpg"> Şekil 3: antimikrobiyal difüzyon "halo" sonuçları. Bu panel normalleştirilmiş "halo" (Kuzeyhalo) sonra 24 h, kuluçka her malzeme (M1, M2, M3 ve M4) disk için (10 mm çap x 1 mm kalınlık) S. aureus ve E. coli karşı gösterir. Farklılıklar istatistiksel olarak anlamlı (p &lt; 0,01). Ancak, örnek M1 Antimikrobiyal aktivite sergiledi. <a href="/files/ftp_upload/57710/57710fig3v2large.jpg" target="_blank">Bu rakam daha büyük bir versiyonunu görüntülemek için buraya tıklayınız.</a>
Kontrol disk (C) ve Grampositive ve diğer 3 malzemeler (bkz: için gram-negatif bakteri karşı artan antibakteriyel etkinliği oluştu olarak iletişim yöntemi sonuçları da sigara Antimikrobiyal aktivite ilk malzeme (M1) için sergilenen Şekil 4).
<img alt="Figure 4" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/57710/57710fig4v3.jpg"> Şekil 4: antimikrobiyal iletişim yöntemi sonuçları. Bu panel 4 malzeme (M1, M2, M3 ve M4) yüzey Antimikrobiyal aktivite assay ISO 22196:2007 göre ilgili 90 mm plakaları, kuluçka S. aureus ve E. coli (10-4seyreltme faktörü) için 24 saat sonra gösterir. C denetim diskten kuluçka 24 saat sonra kurtarıldı canlı bakteri var. <a href="/files/ftp_upload/57710/57710fig4v3large.jpg" target="_blank">Bu rakam daha büyük bir versiyonunu görüntülemek için buraya tıklayınız.</a>
Canlılık (%) kaybı Denklem (2) ve (3) tarafından bu protokol için belirtildiği şekilde belirlendi (bkz Şekil 5).
<img alt="Figure 5" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/57710/57710fig5v2.jpg"> Şekil 5: canlılık iletişim yöntemi tarafından kaybı. Bu panel malzeme yüzeylerde M1, M2, M3 ve M4 S. aureus ve E. coli karşı canlılık (%) kaybı gösterir. Örnek M1 Antimikrobiyal aktivite sergiledi. <a href="/files/ftp_upload/57710/57710fig5v2large.jpg" target="_blank">Bu rakam daha büyük bir versiyonunu görüntülemek için buraya tıklayınız.</a>
Ancak, 4 malzemelerin hiçbiri (ya da resimler gösterilmez) iletişim yöntemi tarafından Maya Candida albicans büyümesini inhibe başardık. Bu nedenle, bu 4 ileri düzey malzemeler 3 gram pozitif ve gram negatif bakterilere karşı olumlu antimikrobiyal sonuçlar gösterdi ve böylece yüksek antibakteriyel etkinliği gereksinimleri olan birçok Biyomühendislik uygulamalar için çok yararlı olabilir. Ancak, 4 malzemelerin hiçbiri Maya büyümesini inhibe başardık.

İleri düzey malzemeler antimikrobiyal karakterizasyonu için bir protokol tanıtacağız. Burada, malzeme yüzeylerde Antimikrobiyal aktivite birbirini tamamlayan iki yöntemine göre ölçülür: bir agar disk difüzyon testi üzerinde dayanır, ve diğeri de ISO 22196:2007 norm dayalı standart bir prosedür.

Antimikrobiyal Biyomühendislik uygulamalar için gelişmiş malzeme karakterizasyonu

The development of new advanced materials with enhanced properties is becoming more and more important in a wide range of bioengineering applications. ...

Bu yöntem, birçok biyomühendislik uygulaması için çok arzu edilen antimikrobiyal özellikler gibi malzeme mühendisliği alanındaki temel soruların yanıtlanmasına yardımcı olabilir. Bu teknik, doğru sonuçlar için izlenecek derinlemesine adım adım prosedürlere ihtiyaç duyan daha az deneyimli araştırmacılara yardımcı olmak için laboratuvarlar arasında tutarlı bir protokol olarak kullanılabilir. Bu yöntem için ilk olarak antimikrobiyal protokoller aramaya başladığımızda aklımıza geldi ve literatürde bununla ilgili ayrıntılı bir protokol olmadığını fark ettik.Bu çalışmada, farklı kimyasal yapılara sahip dört gelişmiş malzeme ve bir kontrol malzemesi, antimikrobiyal aktivite açısından test edilecektir. Her malzemeyi 10 mm çapında diskler halinde keserek hazırlayın. Daha sonra, her bir numuneyi 10 dakika boyunca% 70 etanole daldırarak sterilize edin, ardından her iki tarafta bir saat boyunca ultraviyole radyasyon uygulayın.Gelişmiş malzemelerin antimikrobiyal aktivitesini test etmek için üç farklı mikroorganizma kullanılacaktır. Gram pozitif bakteriler, Staphylococcus aureus, gram negatif bakteriler, Escherichia coli ve maya, Candida albicans. Steril bir pamuklu çubuk kullanarak, steril bir santrifüj tüpünde bulunan 25 mL triptik soya suyu veya TSB'de her mikroorganizmanın birkaç kolonisini yeniden süspanse edin.Düzgün bir karışım elde etmek için bir dakika boyunca vorteksleyin. Bir spektrofotometre ile her mikroorganizma kültürü için 540 nm'de absorbansı ölçün. Her mikroorganizmanın konsantrasyonunu uygun sayıda koloni oluşturan birime veya mililitre başına CFU'ya ayarlayın.Mikroorganizma dağılımını iyileştirmek için mikrobiyal süspansiyonu beş saniye boyunca girdap haline getirin ve bu mikrobiyal süspansiyona steril bir pamuklu çubuğu kısa bir süre daldırın. Swabı kültürü içeren tüp duvarına bastırarak swabdaki fazla sıvıyı çıkarın. Her bir mikrobiyal et suyu süspansiyonunu steril pamuklu çubukla triptik soya agarının veya TSA plakasının yüzeyine tüm yüzeyi mikroorganizma ile kaplamak için üç düzlemde eşit şekilde çizin.Aşılamadan sonra plakaların beş dakika kurumasını bekleyin. Mikrobiyal süspansiyon konsantrasyonunu ve saflığını kontrol etmek için mikrobiyal et suyu süspansiyonlarını daha sonra kullanmak üzere tezgah üstünde bırakın. Bir cımbızı% 96 etanol içeren bir behere batırarak ve ardından bir alkol brülörü ile alevlendirerek sterilize edin.Test edilecek numune disklerini TSA plakalarının ortasına yerleştirmek için steril cımbız kullanın. TSA plakalarını 24 saat boyunca 37 santigrat derecede ters pozisyonda inkübe edin. Difüzyon testi sonuçlarını analiz etmek için, inhibisyon bölgesinin çapını ve numune disk çapını bir dijital kumpas ile veya bir fotoğraf çekerek ve uygun bir görüntü işleme yazılımı kullanarak ölçün.Bu prosedür, daha önce belirlenen mikrobiyal konsantrasyonların doğru olduğunu doğrulamak ve mikrobiyal çevre kontaminasyonunun olmamasını sağlamak için gereklidir. Uygun otoklavlanmış uçlara ve aseptik koşullara sahip bir mikropipet kullanarak, steril TSB'yi steril mikrosantrifüj tüplerine dağıtın. Negatif kontrol olarak kullanılacak bir örnek ekleyin.TSA plakalarını çizmek için daha önce kullanılan mikrobiyal et suyu süspansiyonları ile altı ondalık seri seyreltme gerçekleştirin. Önceden sterilize edilmiş bir Drigalski spatula kullanarak, seçilen her seyreltmeden 100 l'yi bir TSA plakasına yayın. Negatif kontrol olarak bir TSA plakasına mikroorganizma içermeyen 100 l TSB ortamı yayın.TSA plakalarını 24 saat boyunca 37 santigrat derecede inkübe edin. Ertesi gün, mililitre başına CFU'nun daha önce belirlenene benzer olup olmadığını kontrol etmek için koloni sayısını sayın. Mikrobiyal çevre kontaminasyonu olmadığını doğrulamak için negatif kontrol plakasını kontrol edin.Bu prosedüre, TSB'de test edilecek farklı mikroorganizmaları gece boyunca 37 santigrat derecede bir orbital çalkalayıcıda kültürleyerek başlayın. Ertesi gün, her gece kültürünün OD540'ını ölçün ve daha sonra her kültürü 50 mL önceden sterilize edilmiş bir santrifüj tüpünde 20 mL TSB içinde mililitre başına yaklaşık on ila altıncı CFU konsantrasyonuna seyreltin. Her malzeme türünden dört diski ve dört kontrol diskini steril 48 oyuklu bir plakanın ayrı kuyularına yerleştirin.Her disk yüzeyine 150 l mikrobiyal süspansiyon pipetleyin. Plakayı 37 derece santigrat derece inkübatörde 24 saat inkübe edin. 48 oyuklu plaka 24 saat inkübe edildikten sonra, dört numune diskinin ve dört kontrol diskinin her birinin yüzeyine 850 l steril PBS pipetleyin ve mikrobiyal süspansiyon ile karıştırın.Her bir PBS mikrobiyal süspansiyon karışımını ve her bir diski 48 oyuklu plakadan toplayın ve 15 mL önceden sterilize edilmiş bir tüpe aktarın. PBS mikrobiyal süspansiyon karışımlarını ve disklerini bir dakika boyunca vorteksleyin. Beş dakika boyunca 50 Hz'de sonikasyon yapın ve malzeme yüzeyine hiçbir canlı mikroorganizmanın yapışmamasını sağlamak için bir dakika boyunca tekrar girdaplayın.Sonikasyonlu kültürlerin ve TSB içeren steril mikrosantrifüj tüplerinin ondalık seri dilüsyonlarını gerçekleştirin. Her seyreltmenin 100 l'sini bir TSA plakasına yayın ve plakaları 24 saat boyunca aerobik olarak 37 santigrat derecede inkübe edin. 24 saat sonra, koloni sayısını sayın ve bu sayıyı mililitre başına CFU cinsinden ifade edin.İletişim yöntemi sonuçları daha sonra metin protokolünde açıklandığı gibi analiz edilir. Agar disk difüzyon testlerinin sonuçları, ilk materyal için antimikrobiyal olmayan aktivite ve diğer üç materyal için S.aureus ve E.coli'ye karşı artan antibakteriyel aktivite göstermektedir. Bu grafik, 24 saatlik inkübasyondan sonra S.aureus ve E.coli'ye karşı her malzeme diski için normalleştirilmiş haleyi göstermektedir.Temas yönteminin sonuçları ayrıca ilk malzeme için antimikrobiyal olmayan aktiviteyi ve diğer üç malzeme için gram pozitif ve gram negatif bakterilere karşı artan antibakteriyel aktiviteyi göstermektedir. C, 24 saatlik inkübasyondan sonra kontrol diskinden geri kazanılan canlı bakteridir. Bu grafik, malzeme yüzeylerinde S.aureus ve E.coli'ye karşı dört malzeme için canlılık kaybı yüzdesini göstermektedir.Numune M1 hiçbir antimikrobiyal aktivite göstermedi. Burada gösterilmemesine rağmen, dört materyalden hiçbiri Candida albicans mayasının büyümesini başka bir yöntemle engelleyemez. Bu videoyu izledikten sonra, bu iki tamamlayıcı yöntemle antimikrobiyal aktivitenin nasıl belirleneceğini iyi anlamış olmalısınız.

antimicrobial-characterization-advanced-materials-for-bioengineering

Research

JoVE Journal

Bioengineering

Biyomühendislik

Konak hücrelere bakteri bağlanması, konak kolonizasyonu ve enfeksiyonu sırasında önemli bir adımdır. Bu protokol, diğer bakteriyel faktörlerden bağımsız olarak, bireysel adezinlerin bu süreçlere katkısının analizine izin veren biyomimetik malzemeler olarak polimere bağlı rekombinant adezinlerin üretilmesini tanımlar.

Bakteri-konak Etkileşimleri karakterize etmek Biyomimetik Malzemeler

Tıbbi cihazlarda bakteriyel yüzey bağlanmasını azaltan polimerlerin tanımlanması için yüksek verimli bir mikrodizi yöntemi açıklanmaktadır.

Tıbbi Cihazlar Bakterilerin yüksek verimlilik Kimlik Savar Polimerler

Biyofilm enfeksiyonları kemoterapiye karşı yüksek tolerans gösterir. Tek bir tahlil biyofilmlerin karmaşıklığını yakalayamaz. Bunun yerine, tamamlayıcı tahlillere ihtiyaç vardır. Canlılık, biyokütle ve biyofilm matrisi tahlillerini birleştiren bir tarama platformu (S. aureus için geliştirilmiş) sunuyoruz. Uzun vadeli kemoterapötik etkilerin değerlendirilmesi de dahil olmak üzere anti-biyofilm ilaç keşfine izin verir.

Doğal Bileşik Kütüphaneleri Exploration uygundur Anti-biyofilm Tahliller Bir Platform

Bu çalışmada, antimikrobiyal Nanomalzemeler asidik multiwalled karbon nanotüpler oksidasyonunu ve gümüş nano tanecikleri sonraki indirgeyici birikimi tarafından sentezlenen. Antimikrobiyal aktivite ve sitotoksisite testi hazırlanan Nanomalzemeler ile gerçekleştirilmiştir.

Gümüş nano tanecikleri ve onların antibakteriyel faaliyetleri ve sitotoksik özellikleri değerlendirilmesi ile modifiye çok duvarlı karbon nanotüpler sentezi

Bu protokol, yüksek verimli 96 kuyulu sabitlenmiş kapak statik biyofilm taraması için kendinden montajlı derin kuyu PCR plakalı cihazları kullanarak biyofilm büyümesi ve biyokütle ölçümleri yapmak için metodoloji sunar.

PCR-Plate Deep Well Microplate Cihazları Kullanılarak Daha Büyük Bakteriyel Biyofilm Biyokütlesinin Oluşturulması

İn vitro teknikleri kullanarak nanopartiküllerin ve nanoyapılı yüzeylerin antimikrobiyal aktivitelerini değerlendirmek için dört yöntem sunuyoruz. Bu yöntemler, farklı nanopartiküllerin ve nanoyapılı yüzeylerin çok çeşitli mikrobiyal türlerle etkileşimlerini incelemek için uyarlanabilir.

Nanopartiküllerin ve Nanoyapılı Yüzeylerin Antimikrobiyal Aktivitelerinin İn Vitro Olarak Değerlendirilmesi

Bu çalışmada, çinko oksit nanopartikülleri bir çökeltme yöntemi kullanılarak sentezlenmiştir. Sentezlenen partiküllerin antibakteriyel etkisi, çoklu ilaca dirençli metisiline dirençli Staphylococcus aureus (MRSA) ve Pseudomonas aeruginosa bakteri suşlarına karşı test edilmiştir.

Çinko Oksit Nanopartiküllerinin Hazırlanması ve Antibakteriyel Etkilerinin Değerlendirilmesi

Burada, antibakteriyel bir nanomalzeme olarak grafen oksit / bakır (GO / Cu) nanokompozitlerini tanıtıyoruz. GO / Cu nanokompozitlerinin antibakteriyel etkinliği hem antibiyotiğe dirençli gram pozitif hem de gram negatif bakterilere karşı değerlendirildi.

Antibakteriyel Grafen Oksit / Bakır Nanokompozitlerin İmalatı

Mevcut protokol, implant ile ilişkili enfeksiyonları araştırmak için subkutan dorsal implantasyon kullanan, patofizyolojik mekanizmaların kapsamlı bir şekilde araştırılmasını sağlayan ve hedefe yönelik terapötik stratejilerle tanı kriterlerinin geliştirilmesini destekleyen bir fare modelini tanımlamaktadır.

Farelerde İmplantla İlişkili Enfeksiyonların Hayvan Modeli

Bu protokol, fitokimyasalların geleneksel biyositlerin bakterisit etkilerini nasıl artırabileceğini değerlendirmek için sistematik bir çerçeve sunar; bakterisit aktivite modellemesi ve kombinatoryal etkileşim testleri kullanarak, mikrobiyal kontrolü iyileştiren ve genel biyosit kullanımını azaltan sinergistik karışımları belirlemeyi amaçlar.

In Vitro Bitki kaynaklı moleküllerin geleneksel biyositler üzerindeki etkisinin değerlendirilmesi

Öğrenin, agar disk difüzyon testi ve ISO 22196:2007 yöntemleriyle antimikrobiyal malzeme karakterizasyonunu. Staphylococcus aureus ve Escherichia coli'ye karşı etkinliği değerlendirin.

Antimikrobiyal Biyomühendislik uygulamalar için gelişmiş malzeme karakterizasyonu

Daha fazla video keşfet