Name: Aktif Aktin Bazlı Montajların Kasılma ve Deformasyon Modlarının In Vitro Olarak Ayarlanması: İki Boyutlu Aktif Ağlardan Sıvı Kristal Damlalara (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2025-07-11T16:50:00.000+00:00
Duration: 6 min 48 s
Description: Keşfedin aktin montajlarının hazırlanması ve kasılma modlarının incelenmesi için in vitro yöntemleri. Bu protokol yumuşak biyolojik malzemelerde tekrarlanabilirliği artırarak fiziksel mekanizmaları anlamaya yardımcı olur.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

<ol><li>Marchetti, M. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Hydrodynamics+of+soft+active+matter%5BTitle%5D)+AND+%22Rev+Mod+Phys%22%5BJournal%5D)">Hydrodynamics of soft active matter.</a> Rev Mod Phys. 85 (3), 1143-1189 (2013).</li>
<li>Needleman, D., Dogic, Z. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Active+matter+at+the+interface+between+materials+science+and+cell+biology%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Rev+Mater%22%5BJournal%5D)">Active matter at the interface between materials science and cell biology.</a> Nat Rev Mater. 2 (9), 17048(2017).</li>
<li>Murrell, M., Oakes, P. W., Lenz, M., Gardel, M. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Forcing+cells+into+shape%3A+the+mechanics+of+actomyosin+contractility%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Rev+Mol+Cell+Biol%22%5BJournal%5D)">Forcing cells into shape: the mechanics of actomyosin contractility.</a> Nat Rev Mol Cell Biol. 16 (8), 486-498 (2015).</li>
<li>Cáceres, R., Abou-Ghali, M., Plastino, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Reconstituting+the+actin+cytoskeleton+at+or+near+surfaces+in+vitro%5BTitle%5D)+AND+%22Biochim+Biophys+Acta+Mol+Cell+Res%22%5BJournal%5D)">Reconstituting the actin cytoskeleton at or near surfaces in vitro.</a> Biochim Biophys Acta Mol Cell Res. 1853 (11), 3006-3014 (2015).</li>
<li>Burla, F., Mulla, Y., Vos, B. E., Aufderhorst-Roberts, A., Koenderink, G. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((From+mechanical+resilience+to+active+material+properties+in+biopolymer+networks%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Rev+Phys%22%5BJournal%5D)">From mechanical resilience to active material properties in biopolymer networks.</a> Nat Rev Phys. 1 (4), 249-263 (2019).</li>
<li>Bezanilla, M., Gladfelter, A. S., Kovar, D. R., Lee, W. -L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cytoskeletal+dynamics%3A+a+view+from+the+membrane%5BTitle%5D)+AND+%22J+Cell+Biol%22%5BJournal%5D)">Cytoskeletal dynamics: a view from the membrane.</a> J Cell Biol. 209 (3), 329-337 (2015).</li>
<li>Alfaro-Aco, R., Petry, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Building+the+microtubule+cytoskeleton+piece+by+piece%5BTitle%5D)+AND+%22J+Biol+Chem%22%5BJournal%5D)">Building the microtubule cytoskeleton piece by piece.</a> J Biol Chem. 290 (28), 17154-17162 (2015).</li>
<li>Sanchez, T., Chen, D. T. N., DeCamp, S. J., Heymann, M., Dogic, Z. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Spontaneous+motion+in+hierarchically+assembled+active+matter%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">Spontaneous motion in hierarchically assembled active matter.</a> Nature. 491 (7424), 431-434 (2012).</li>
<li>Foster, P. J., Fürthauer, S., Shelley, M. J., Needleman, D. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Active+contraction+of+microtubule+networks%5BTitle%5D)+AND+%22eLife%22%5BJournal%5D)">Active contraction of microtubule networks.</a> eLife. 4, e10837(2015).</li>
<li>Murrell, M. P., Gardel, M. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((F-actin+buckling+coordinates+contractility+and+severing+in+a+biomimetic+actomyosin+cortex%5BTitle%5D)+AND+%22Proc+Natl+Acad+Sci+U+S+A%22%5BJournal%5D)">F-actin buckling coordinates contractility and severing in a biomimetic actomyosin cortex.</a> Proc Natl Acad Sci U S A. 109 (51), 20820-20825 (2012).</li>
<li>Weirich, K. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Liquid+behavior+of+cross-linked+actin+bundles%5BTitle%5D)+AND+%22Proc+Natl+Acad+Sci+U+S+A%22%5BJournal%5D)">Liquid behavior of cross-linked actin bundles.</a> Proc Natl Acad Sci U S A. 114 (9), 2131-2136 (2017).</li>
<li>Alvarado, J., Sheinman, M., Sharma, A., MacKintosh, F. C., Koenderink, G. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Molecular+motors+robustly+drive+active+gels+to+a+critically+connected+state%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Phys%22%5BJournal%5D)">Molecular motors robustly drive active gels to a critically connected state.</a> Nat Phys. 9 (9), 591-597 (2013).</li>
<li>Keber, F. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Topology+and+dynamics+of+active+nematic+vesicles%5BTitle%5D)+AND+%22Science%22%5BJournal%5D)">Topology and dynamics of active nematic vesicles.</a> Science. 345 (6201), 1135-1139 (2014).</li>
<li>Zhang, R., Kumar, N., Ross, J. L., Gardel, M. L., De Pablo, J. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Interplay+of+structure%2C+elasticity%2C+and+dynamics+in+actin-based+nematic+materials%5BTitle%5D)+AND+%22Proc+Natl+Acad+Sci+U+S+A%22%5BJournal%5D)">Interplay of structure, elasticity, and dynamics in actin-based nematic materials.</a> Proc Natl Acad Sci U S A. 115 (2), E124-E133 (2018).</li>
<li>Schaller, V., Weber, C., Semmrich, C., Frey, E., Bausch, A. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Polar+patterns+of+driven+filaments%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">Polar patterns of driven filaments.</a> Nature. 467 (7311), 73-77 (2010).</li>
<li>Blanchoin, L., Boujemaa-Paterski, R., Sykes, C., Plastino, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Actin+dynamics%2C+architecture%2C+and+mechanics+in+cell+motility%5BTitle%5D)+AND+%22Physiol+Rev%22%5BJournal%5D)">Actin dynamics, architecture, and mechanics in cell motility.</a> Physiol Rev. 94 (1), 235-263 (2014).</li>
<li>Bendix, P. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+quantitative+analysis+of+contractility+in+active+cytoskeletal+protein+networks%5BTitle%5D)+AND+%22Biophys+J%22%5BJournal%5D)">A quantitative analysis of contractility in active cytoskeletal protein networks.</a> Biophys J. 94 (8), 3126-3136 (2008).</li>
<li>Köhler, S., Schaller, V., Bausch, A. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Structure+formation+in+active+networks%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Mater%22%5BJournal%5D)">Structure formation in active networks.</a> Nat Mater. 10 (6), 462-468 (2011).</li>
<li>Backouche, F., Haviv, L., Groswasser, D., Bernheim-Groswasser, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Active+gels%3A+dynamics+of+patterning+and+self-organization%5BTitle%5D)+AND+%22Phys+Biol%22%5BJournal%5D)">Active gels: dynamics of patterning and self-organization.</a> Phys Biol. 3 (4), 264-273 (2006).</li>
<li>Svitkina, T. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Actin+cell+cortex%3A+structure+and+molecular+organization%5BTitle%5D)+AND+%22Trends+Cell+Biol%22%5BJournal%5D)">Actin cell cortex: structure and molecular organization.</a> Trends Cell Biol. 30 (7), 556-565 (2020).</li>
<li>Reymann, A. -C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Actin+network+architecture+can+determine+myosin+motor+activity%5BTitle%5D)+AND+%22Science%22%5BJournal%5D)">Actin network architecture can determine myosin motor activity.</a> Science. 336 (6086), 1310-1314 (2012).</li>
<li>Reymann, A. -C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Nucleation+geometry+governs+ordered+actin+network+structures%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Mater%22%5BJournal%5D)">Nucleation geometry governs ordered actin network structures.</a> Nat Mater. 9 (10), 827-832 (2010).</li>
<li>Vogel, S. K., Petrasek, Z., Heinemann, F., Schwille, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Myosin+motors+fragment+and+compact+membrane-bound+actin+filaments%5BTitle%5D)+AND+%22eLife%22%5BJournal%5D)">Myosin motors fragment and compact membrane-bound actin filaments.</a> eLife. 2, e00116(2013).</li>
<li>Liebe, N. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Bioinspired+membrane+interfaces%3A+controlling+actomyosin+architecture+and+contractility%5BTitle%5D)+AND+%22ACS+Appl+Mater+Interfaces%22%5BJournal%5D)">Bioinspired membrane interfaces: controlling actomyosin architecture and contractility.</a> ACS Appl Mater Interfaces. 15 (9), 11586-11598 (2023).</li>
<li>Thoresen, T., Lenz, M., Gardel, M. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Thick+filament+length+and+isoform+composition+determine+self-organized+contractile+units+in+actomyosin+bundles%5BTitle%5D)+AND+%22Biophys+J%22%5BJournal%5D)">Thick filament length and isoform composition determine self-organized contractile units in actomyosin bundles.</a> Biophys J. 104 (3), 655-665 (2013).</li>
<li>Stachowiak, M. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Self-organization+of+myosin+II+in+reconstituted+actomyosin+bundles%5BTitle%5D)+AND+%22Biophys+J%22%5BJournal%5D)">Self-organization of myosin II in reconstituted actomyosin bundles.</a> Biophys J. 103 (6), 1265-1274 (2012).</li>
<li>Winkelman, J. D., Bilancia, C. G., Peifer, M., Kovar, D. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ena%2FVASP+enabled+is+a+highly+processive+actin+polymerase+tailored+to+self-assemble+parallel-bundled+F-actin+networks+with+fascin%5BTitle%5D)+AND+%22Proc+Natl+Acad+Sci+U+S+A%22%5BJournal%5D)">Ena/VASP enabled is a highly processive actin polymerase tailored to self-assemble parallel-bundled F-actin networks with fascin.</a> Proc Natl Acad Sci U S A. 111 (11), 4121-4126 (2014).</li>
<li>Stam, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Filament+rigidity+and+connectivity+tune+the+deformation+modes+of+active+biopolymer+networks%5BTitle%5D)+AND+%22Proc+Natl+Acad+Sci+U+S+A%22%5BJournal%5D)">Filament rigidity and connectivity tune the deformation modes of active biopolymer networks.</a> Proc Natl Acad Sci U S A. 114 (47), E10037-E10045 (2017).</li>
<li>Weirich, K. L., Stam, S., Munro, E., Gardel, M. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Actin+bundle+architecture+and+mechanics+regulate+myosin+II+force+generation%5BTitle%5D)+AND+%22Biophys+J%22%5BJournal%5D)">Actin bundle architecture and mechanics regulate myosin II force generation.</a> Biophys J. 120 (10), 1957-1970 (2021).</li>
<li>Scholz, M., Weirich, K. L., Gardel, M. L., Dinner, A. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Tuning+molecular+motor+transport+through+cytoskeletal+filament+network+organization%5BTitle%5D)+AND+%22J+Soft+Mat%22%5BJournal%5D)">Tuning molecular motor transport through cytoskeletal filament network organization.</a> J Soft Mat. 16 (8), 2135-2140 (2020).</li>
<li>Spudich, J. A., Watt, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+regulation+of+rabbit+skeletal+muscle+contraction%5BTitle%5D)+AND+%22J+Biol+Chem%22%5BJournal%5D)">The regulation of rabbit skeletal muscle contraction.</a> J Biol Chem. 246 (15), 4866-4871 (1971).</li>
<li>Li, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+F-actin+bundler+%CE%B1actinin+Ain1+is+tailored+for+ring+assembly+and+constriction+during+cytokinesis+in+fission+yeast%5BTitle%5D)+AND+%22Mol+Biol+Cell%22%5BJournal%5D)">The F-actin bundler αactinin Ain1 is tailored for ring assembly and constriction during cytokinesis in fission yeast.</a> Mol Biol Cell. 27 (11), 1821-1833 (2016).</li>
<li>Skau, C. T., Kovar, D. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Fimbrin+and+tropomyosin+competition+regulates+endocytosis+and+cytokinesis+kinetics+in+fission+yeast%5BTitle%5D)+AND+%22Curr+Biol%22%5BJournal%5D)">Fimbrin and tropomyosin competition regulates endocytosis and cytokinesis kinetics in fission yeast.</a> Curr Biol. 20 (16), 1415-1422 (2010).</li>
<li>Vignjevic, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Role+of+fascin+in+filopodial+protrusion%5BTitle%5D)+AND+%22J+Cell+Biol%22%5BJournal%5D)">Role of fascin in filopodial protrusion.</a> J Cell Biol. 174 (6), 863-875 (2006).</li>
<li>Margossian, S. S., Lowey, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Preparation+of+myosin+and+its+subfragments+from+rabbit+skeletal+muscle%5BTitle%5D)+AND+%22Methods+Enzymol%22%5BJournal%5D)">Preparation of myosin and its subfragments from rabbit skeletal muscle.</a> Methods Enzymol. 85, 55-71 (1982).</li>
<li>Palmgren, S., Ojala, P. J., Wear, M. A., Cooper, J. A., Lappalainen, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Interactions+with+PIP2%2C+ADPactin+monomers%2C+and+capping+protein+regulate+the+activity+and+localization+of+yeast+twinfilin%5BTitle%5D)+AND+%22J+Cell+Biol%22%5BJournal%5D)">Interactions with PIP2, ADPactin monomers, and capping protein regulate the activity and localization of yeast twinfilin.</a> J Cell Biol. 155 (2), 251-260 (2001).</li>
<li>Craig, S. W., Lancashire, C. L., Cooper, J. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Preparation+of+smooth+muscle+alphaactinin%5BTitle%5D)+AND+%22Methods+Enzymol%22%5BJournal%5D)">Preparation of smooth muscle alphaactinin.</a> Methods Enzymol. 85, 316-321 (1982).</li>
<li>Verkhovsky, A. B., Borisy, G. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Nonsarcomeric+mode+of+myosin+II+organization+in+the+fibroblast+lamellum%5BTitle%5D)+AND+%22J+Cell+Biol%22%5BJournal%5D)">Nonsarcomeric mode of myosin II organization in the fibroblast lamellum.</a> J Cell Biol. 123 (3), 637-652 (1993).</li>
<li>LeBel, R. G., Goring, D. A. I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Density%2C+viscosity%2C+refractive+index%2C+and+hygroscopicity+of+mixtures+of+water+and+dimethyl+sulfoxide%5BTitle%5D)+AND+%22J+Chem+Eng+Data%22%5BJournal%5D)">Density, viscosity, refractive index, and hygroscopicity of mixtures of water and dimethyl sulfoxide.</a> J Chem Eng Data. 7 (1), 100-101 (1962).</li>
<li>Lengsfeld, A. M., Lowt, I., Wielandt, T., Dancker, P., Hasselbach, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Interaction+of+phalloidin+with+actin%5BTitle%5D)+AND+%22Proc+Natl+Acad+Sci+U+S+A%22%5BJournal%5D)">Interaction of phalloidin with actin.</a> Proc Natl Acad Sci U S A. 31, 846(1974).</li>
<li>Chowdhury, M. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Dendronized+fluorosurfactant+for+highly+stable+waterinfluorinated+oil+emulsions+with+minimal+interdroplet+transfer+of+small+molecules%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Commun%22%5BJournal%5D)">Dendronized fluorosurfactant for highly stable waterinfluorinated oil emulsions with minimal interdroplet transfer of small molecules.</a> Nat Commun. 10 (1), 4546(2019).</li>
<li>Alvarado, J., Mulder, B. M., Koenderink, G. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Alignment+of+nematic+and+bundled+semiflexible+polymers+in+cellsized+confinement%5BTitle%5D)+AND+%22J+Soft+Mat%22%5BJournal%5D)">Alignment of nematic and bundled semiflexible polymers in cellsized confinement.</a> J Soft Mat. 10 (14), 2354-2364 (2014).</li>
<li>Weirich, K. L., Israelachvili, J. N., Fygenson, D. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Bilayer+edges+catalyze+supported+lipid+bilayer+formation%5BTitle%5D)+AND+%22Biophys+J%22%5BJournal%5D)">Bilayer edges catalyze supported lipid bilayer formation.</a> Biophys J. 98 (1), 85-92 (2010).</li>
<li>Tan, A. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Topological+chaos+in+active+nematics%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Phys%22%5BJournal%5D)">Topological chaos in active nematics.</a> Nat Phys. 15 (10), 1033-1039 (2019).</li>
<li>Nasirimarekani, V., Strübing, T., Vilfan, A., Guido, I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Tuning+the+properties+of+active+microtubule+networks+by+depletion+forces%5BTitle%5D)+AND+%22Langmuir%22%5BJournal%5D)">Tuning the properties of active microtubule networks by depletion forces.</a> Langmuir. 37 (26), 7919-7927 (2021).</li>
<li>Heymann, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Studies+on+solgel+transformations%3A+I.+the+inverse+solgel+transformation+of+methylcellulose+in+water%5BTitle%5D)+AND+%22Trans+Faraday+Soc%22%5BJournal%5D)">Studies on solgel transformations: I. the inverse solgel transformation of methylcellulose in water.</a> Trans Faraday Soc. 31, 846(1935).</li>
</ol>

<a href="https://app.jove.com/t/6643">This corrects</a> the article <a href="https://dx.doi.org/10.3791/68127">10.3791/68127</a>

An erratum was issued for:&#160;<a href="https://www.jove.com/t/68127">Tuning the Contractility and Deformation Modes of Active Actin-Based Assemblies In Vitro: From Two-Dimensional Active Networks to Liquid Crystal Drops</a>. The Affiliations&#160;section was&#160;updated.

Erratum: Tuning the Contractility and Deformation Modes of Active Actin-Based Assemblies In Vitro: From Two-Dimensional Active Networks to Liquid Crystal Drops

<table><tbody><tr><td>0.6 mL mikrosantrifüj tüpü</td><td>Fisher Scientific</td><td>05-408-123</td><td></td></tr><tr><td>008-Florosüraktif madde</td><td>RAN Biyoteknolojileri</td><td>00115081361-6525</td><td>Önceden karıştırılmış çözeltiye alternatif</td></tr><tr><td>008-RAN Biyoteknolojilerinde HFE7500 FloroYüzey Aktif Madde</td><td></td><td>008-FloroYüzey Aktif Madde 008-FluoroSurfactant-2wtH-50G</td><td>Önceden karıştırılmış çözelti</td></tr><tr><td>2-merkaptoetanol (&beta;-merkaptoetanol)</td><td>Sigma Aldrich</td><td>63689</td><td>CAS Numarası: 60-24-2 Stok çözeltisi: MilliQ suda 25 mM, 4 &°C'de saklanır; C4</td></tr><tr><td>- (2-Hidroksietil) piperazin-1-etan-sülfonik asit (HEPES)</td> <td>Sigma Aldrich</td><td>H3375</td><td>CAS Numarası: 7365-45-9</td></tr><tr><td>5 dk Epoksi</td><td>Devcon</td><td>14250</td><td></td></tr><tr><td>Aktin Hücre İskeleti</td><td>, Inc.</td><td>AKL99-A</td><td>>99% saf tavşan iskelet kası (Saflaştırmaya alternatif)</td></tr><tr><td>Aktin (rodamin etiketli)</td><td>Cytoskeleton, Inc.</td><td>AR05-A</td><td>Tavşan iskelet kası (Saflaştırmaya alternatif)</td></tr><tr><td>Adenozin 5&prim;-trifosfat (ATP)</td><td>Sigma Aldrich</td><td>A6419</td><td>CAS Numarası: 34369-07-8 Stok çözeltisi: MilliQ suda 25 mM, -20 °C'de saklayın; C Hidrolizi önlemek için donmuş halde tutun</td></tr><tr><td>Kalsiyum Klorür (CaCl2)</td><td>Sigma Aldrich</td><td>C5670</td><td>CAS Numarası: 10043-52-4</td></tr><tr><td>Kapak Proteini (Fare)</td><td></td><td></td><td>E.coli'de aşırı ekspresyondan saflaştırılmış HisTag ile Stok çözeltisi: -80 °C'de protein tamponunda 20 mM; Sığır</td></tr><tr><td>karaciğerinden C Katalaz</td><td>Sigma Aldrich</td><td>C9322</td><td>CAS Numarası: 9001-05-2 Stok çözeltisi: 85 ku/mL, -20 ° C'de glikoz oksidaz ile saklanın; C</td></tr><tr><td>Kapak Camı</td><td>Fisherbrand</td><td>12544C</td><td>Borosilikat, #1.5, 24 mm x 40 mm Fisherbrand değil Fisher En İyi</td></tr><tr><td>D-(+)-Glikoz</td><td>Sigma Aldrich</td><td>G8270</td><td>CAS Numarası: 50-99-7 Stok çözeltisi: MilliQ suda 225 mg/mL, -20 °C'de saklayın; C</td></tr><tr><td>Dithiothreitol (DTT)</td> <td>Sigma Aldrich</td><td>3860-OP</td><td>CAS Numarası: 3483-12-3 Stok çözeltisi: MilliQ suda 1 M, -20 ° C'de saklayın; C</td></tr><tr><td>Çift Taraflı Bant</td><td>3M</td><td>3136</td><td></td></tr><tr><td>Etil alkolol 200 Korumalı</td><td>PHARMCO</td><td>111000200</td><td>CAS Numarası: 64-17-5 200 kanıt</td></tr><tr><td>Etilen glikol-bis (2-aminoetileter) -N, N, N ve asal;, N ve asal;-tetraasetik asit (EGTA)</td> <td>Sigma Aldrich</td><td>E3889</td><td>CAS Numarası: 67-42-5</td></tr><tr><td>Etilendiamintetraasetik asit (EDTA)</td> <td>Sigma Aldrich</td><td>E9884</td><td>CAS Numarası: 60-00-4</td></tr><tr><td>Glikoz Oksidaz</td><td>Sigma Aldrich</td><td>345386</td><td>CAS Numarası: 9001-37-0 Stok çözeltisi: MilliQ suda 135 mg / mL, -20 ° C'de katalaz ile aliquoted olarak saklayın; C</td></tr><tr><td>Gliserol</td><td>Sigma Aldrich</td><td>356352M</td><td>CAS Numarası: 56-81-5</td></tr><tr><td>İmidazol</td><td>Fisher Biyoreaktifleri&nbsp;</td><td>BP305-50</td><td>CAS Numarası: 288-32-4</td></tr><tr><td>Magnezyum Klorür (MgCl2)</td> <td>Fisher Bioreagents&nbsp;</td><td>BP214</td><td>CAS Numarası: 7786-30-3, 7791-18-6</td></tr><tr><td>Metilselüloz</td><td>Sigma Aldrich</td><td>M0512</td><td>CAS Numarası: 9004-67-5 15 centipoise</td></tr><tr><td>Mikroskop Slaytları Düz Elektron</td><td>Mikroskobu Bilimleri / Altın Mühür</td><td>63710-05</td> <td>& nbsp; 3 "x1", 1 mm kalınlığında</td></tr><tr><td>MilliQ su</td><td>Kırlangıç</td><td>CUFBI001</td><td>Ultra saf su</td></tr><tr><td>Novec-7500 Mühendislik Sıvısı</td><td>3M</td><td>7100134816</td><td>Önceden karıştırılmış çözeltiye alternatif</td></tr><tr><td>Potasyum Klorür (KCl)</td> <td>Sigma Aldrich</td><td>P3911</td><td>CAS Numarası: 7447-40-7</td></tr><tr><td>Potasyum Fosfat (KPO<alt>4</alt>)</td><td>Sigma Aldrich</td><td>P3786</td><td>CAS Numarası: 7758-11-4</td></tr><tr><td>Tavşan İskelet Kası Aseton Tozu</td><td>Pel-Freez Biologicals</td><td>41995-1</td><td>Aktini saflaştırırken kullanılır (satın almaya alternatif) -80 ° C'de aktin Tamponu G'de yaklaşık 30 mM saklayın; C</td></tr><tr><td>Sodyum Azide</td><td>Sigma Aldrich</td><td>71289</td><td>CAS Numarası: 26626-22-8</td></tr><tr><td>Tetrametilrodamin-C6-maleimid</td><td>AnaSpec</td><td>AS-81445</td><td>CAS Numarası: 174568-68-4 Aktini saflaştırırken kullanılır (satın almaya alternatif) -80 ° C'de aktin Tamponu G'de yaklaşık 30 mM saklayın. Aktin etiketlenirken kullanılır (satın almaya alternatif)</td></tr><tr><td>Tris Hidroklorik Asit (Tris HCl)</td><td>Sigma Aldrich</td><td>648317</td><td>CAS Numarası: 1185-53-1</td></tr><tr><td>Ultrasonik Banyo</td><td>Emerson Branson&nbsp;</td><td></td><td></td>CPX2800H</tr></tbody></table>

aktif aktin bazlı montajların kasılma ve deformasyon modlarının in vitro olarak ayarlanması: İki boyutlu aktif ağlardan sıvı kristal damlalara

Tuning the Contractility and Deformation Modes of Active Actin-Based Assemblies In Vitro: From Two-Dimensional Active Networks to Liquid Crystal Drops

Bu yöntemlerde açıklanan genel stratejiyi izleyerek, saflaştırılmış proteinler kullanılarak model sistemlerde çok çeşitli aktin düzenekleri oluşturulabilir, burada aktin, montaj mimarisini değiştiren aksesuar proteinlerin varlığında filamentler halinde polimerize edilir (Şekil 1). Aktin, çapraz bağlayıcılar veya kapak proteini olmadan filamentler halinde polimerize edildiğinde, dolaşık filament ağları oluşturur (Şekil 1A). Dolaşık ağlara çapraz bağlayıcı eklemek...

Aktif Aktin Bazlı Montajların Kasılma ve Deformasyon Modlarının In Vitro Olarak Ayarlanması: İki Boyutlu Aktif Ağlardan Sıvı Kristal Damlalara

Actin cytoskeleton-based materials are widely investigated as model cellular materials to elucidate physical mechanisms of cell mechanics, such as shape ...

tuning-contractility-deformation-modes-active-actin-based-assemblies

Research

JoVE Journal

Biology

Biyoloji

Siloksan bazlı ve epoksi bazlı sıvı kristal elastomerlerin (LCE'ler) ve LCE nanokompozitlerinin hazırlanmasını gösteriyoruz. LCE'ler, tersinir gerinim, sıvı kristal sıralaması ve sertlik açısından karakterize edilir. Potansiyel bir uygulama olarak, aktif hücre kültürü için özel bir cihazda şekle duyarlı substratlar olarak kullanımlarını gösteriyoruz.

Monodomain Sıvı Kristal Elastomerler ve Likit Kristal Elastomer Nanokompozitlerinin Hazırlanması

Burada, hem şeklin hem de moleküler hizalamanın doğrudan lazer yazma kullanılarak nanometre ölçeğinde doğrulukla tasarlanabildiği 3D polimerik mikro/nano yapılar üretiyoruz. Çeşitli sıvı kristal elastomer mikro yapılarının ışık kaynaklı deformasyonu mikroskobik ölçekte kontrol edilebilir.

Serbest biçimli Işık Aktüatörler - Mikroskobik Ölçeğinde imalat ve çalıştırma Kontrolü

Bu çalışma, 3D, biyo-uyumlu yan zincir sıvı kristal elastomerler (LCEs) göre biyolojik olarak parçalanabilen, köpük-benzeri hücre iskeleleri hazırlanması için bir yöntem sunar. Konfokal mikroskopi deneyleri köpüğümsü LCEs hücre eki, proliferasyon ve C2C12s miyoblastların kendiliğinden uyum sağlamak olduğunu göstermektedir.

3D Mekansal Hücre Kültürleri için hücre yapı iskeleleri olarak biyo-uyumlu sıvı kristal Elastomer Köpüklerin sentezi

Mekanik olarak sürekli ışık ışınlama altında salınım sıvı kristal polimer filmler oluşturmak için protokol hedefidir. Müstakil filmleri, fotoğraf-çalıştırma için sıvı kristal hizalama yönteminden anlayışı ayrıntılı olarak açıklanmaktadır. Bu malzeme hazırlamak için uygulanan deneysel protokol genel olarak geçerlidir.

Işık tarafından indüklenen makroskopik salınım hareketi için sıvı kristal ağlar hazırlanması

Bu makalede mikrosıvısal süreci ve sıvı kristal elastomerler kişiseldir parçacıkları hazırlamak için parametreler açıklanır. Bu işlem çalıştırma büyüklüğü yanı sıra parçacıklar ve onların boyutu ve şekli (gelen oblate şiddetle muhtemelen için çekirdek-kabuk ve Janus türleri morfoloji) varyasyon prensibi hazırlık sağlar.

Sıvı kristal Elastomer aktüatörler mikrosıvısal hazırlanması

Basit aktin filament mikroakışkan tahlilleri için, floresan mikroskobu ile birlikte, bireysel aktin filamentlerini gerçek zamanlı olarak doğru bir şekilde izlemeyi ve sırayla farklı protein çözeltilerine maruz bırakmayı sağlayan protokoller sunuyoruz.

Tek Aktin Filamentlerin ve Demetlerin Montaj Dinamiğini İncelemek için Mikroakışkanlar ve Floresan Mikroskobu Kullanma

Bu protokol, floresan mikroskobu kullanılarak yeniden oluşturulmuş, membrana bağlı sitoiskelet ağlarının dinamiklerini incelemek için desteklenen lipid çift katmanlarının oluşumunu ve hücre iskeleti filamentlerinin ve motor proteinlerin eklenmesini açıklar.

Membrana Bağlı Minimal Aktin Kortekslerinin Desteklenen Lipid Çift Katmanlı Üzerinde Yeniden Sulandırılması

Bu yazıda, F-aktin sitoiskeletini dev unilamellar lipid veziküllerine (lipozomlar olarak da adlandırılır) kapsüllemek için deneysel teknikleri ve lipozom zarının iç broşüründe korteks-biyomimik yapan bir F-aktin tabakası oluşturma yöntemini göstereceğiz.

İn Vitro Aktin Hücre İskeletinin Dev Unilameller Veziküller İçinde Yeniden Sulandırılması

Bu yazıda, birlikte dolaşık aktin filamentleri ve mikrotübüllerinin ayarlanabilir üç boyutlu kompozit ağlarının mühendisliği ve karakterizasyonu için protokoller sunulmaktadır. Kompozitler, miyozin II ve kinesin motorları tarafından tahrik edilen aktif yeniden yapılanma ve balistik harekete uğrar ve aktin, mikrotübüller, motor proteinler ve pasif çapraz bağlayıcıların göreceli konsantrasyonları tarafından ayarlanır.

Aktin-Mikrotübül Kompozitlerinin Ayarlanabilir Motor Tahrikli Dinamiği ve Mekaniği ile Yeniden Yapılandırılması ve Karakterize Edilmesi

Burada, protein hazırlama ve yapım ve aktif nematik hapsetme için kuyuların kullanımı da dahil olmak üzere mikrotübüllerden ve kinesin motorlarından aktif nematiklerin hazırlanması için yöntemler sunulmaktadır.

Mikrotübül Tabanlı Aktif Nematiklerin Oluşturulması, Sınırlandırılması ve Gözlemlenmesi

Bu çalışmada, kontrollü koşullar altında aktomiyosin jellerinin poroelastisitesini incelemek için in vitro rekonstrüksiyon yaklaşımı kullanılmıştır. Aktomiyosin jelinin ve gömülü çözücünün dinamikleri, ağ poroelastisitesinin gösterildiği şekilde ölçülür. Ayrıca deneysel zorlukları, ortak tuzakları ve hücre hücre iskeleti mekaniği ile olan ilgisini tartışıyoruz.

Hücre Hücre İskeletinin Model Sistemi Olarak (Poro-)Elastik Kasılma Aktomyosin Ağlarının Mekaniği

Keşfedin aktin montajlarının hazırlanması ve kasılma modlarının incelenmesi için in vitro yöntemleri. Bu protokol yumuşak biyolojik malzemelerde tekrarlanabilirliği artırarak fiziksel mekanizmaları anlamaya yardımcı olur.

Aktif Aktin Bazlı Montajların Kasılma ve Deformasyon Modlarının In Vitro Olarak Ayarlanması: İki Boyutlu Aktif Ağlardan Sıvı Kristal Damlalara (Video) | JoVE Journal

Aktif Aktin Bazlı Montajların Kasılma ve Deformasyon Modlarının In Vitro Olarak Ayarlanması: İki Boyutlu Aktif Ağlardan Sıvı Kristal Damlalara

Daha fazla video keşfet