Encyclopedia of Experiments: Biology
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- C. elegans发生于两种性别:有两条X染色体的母体和只有一条X染色体称为XO或X的雄性染色体。
母细胞同时产生卵母细胞和精子,可以通过自我受精繁殖。几乎所有的卵母细胞都携带X染色体,因此自受精产生的后代大多是母细胞。
很少,X染色体在游戏生成过程中丢失,导致男性后代只有大约0.1%到0.2%的时间。 这不是一个实际的方法来收集足够的男性为任何实验或基因交叉,我们需要他们。
相反,我们可以用雄性制造一种草本石,导致大约一半的后代是雄性。 在进行这种基因交叉时,一定要包括比母马罗狄蒂更多的雄性,以确保有效的交配。 在下列示例中,我们将设置一个交配板,分离雄性蠕虫,为收集和研究体外精子做准备。
- 首先,通过在线虫生长介质或NGM板中心播种的大肠杆菌OP50细菌的小草坪上穿越5个野生型雄性和1个草本,获得大量雄性。大约50%的下一代将是野生型雄性。
收集L4阶段雄性,在解剖显微镜下检查发育阶段和尾部形态。根据尾部形态选择L4阶段蠕虫。雄性蠕虫有圆圆的尾巴,而母虫有尖尾。
使用铂线,每个实验挑选7至10个L4阶段雄性,并将其转移到用OP50播种的NGM板,让他们生长一两天。在没有母细胞的情况下生长的独身雄性可防止精子的流失,因此,在实验过程中将提供大量的精子。