Geç Embriyonik ve Yenidoğan Farelerde Ölçüm Sol Ventrikül Basınç

Bu prosedürün genel amacı, geç embriyonik ve neonatal farelerde sol ventrikül veya LV basıncını ölçmektir. İlk olarak, ekipman hazırlanır. Bir basınç dönüştürücüsüne bağlı bir iğne, bir ultrason probu ile hizalanmalıdır.

Daha sonra bir fare hazırlanır ve LV'si ultrason ile görüntülenir. Daha sonra iğne AG lümenine ilerletilir ve pulsatil basınç ölçümleri kaydedilir. Sonuç olarak, sonuçlar, bu ultrason kılavuzluğunda sıvı dolu kateterizasyonu kullanan geç embriyonik ve erken neonatal farelerde sistolik basınçları göstermektedir.

Bu tekniğin servo, basınç ölçümü veya katı hal kateterleri gibi mevcut yöntemlere göre en büyük avantajı, geç embriyonik ve yenidoğan farelerde basıncın sağlam ve tekrarlanabilir bir şekilde ölçülebilmesidir. Genel olarak, bu tekniğe yeni olan bireyler mücadele edecektir çünkü embriyo döneceği için embriyonik kese içindeki embriyonun oryantasyonunu korumak zordur. Ultrason probunun uygulanmasıyla, çalışılacak farenin aşamasına bağlı olarak, bir prob seçin ve damıtılmış su ile doldurun.

Probu ultrason sisteminin ayarlanabilir standına yerleştirin. Standı, LV tepesi enjeksiyon koluna bakacak şekilde platforma monte edilmiş bir farenin LV uzun eksen görünümünü sağlayacak şekilde ayarlayın. Basınç sistemi, sıvı dolu bir basınç dönüştürücüsü, köprü amplifikatörü, veri toplama sistemi ve laboratuvar şemasından oluşur.

Bir yazılım paketi, boruyu yıkamak için% 10 heparinize salin ile doldurulmuş 20 mililitrelik bir şırınga kullanılır. Kabarcıkların boruya veya dönüştürücünün üzerine sıkışmadığından emin olun. Dönüştürücüye giden boru, üç musluklar, yem kilitleri ve hortum dikenleri ile bağlanır.

Basınç dönüştürücü sistemini bir manometre ile kalibre edin: iğne borusunu ve muhafazasını enjeksiyon koluna monte edin. Boruyu enjeksiyon koluna tutmak için manometreyi bir muhafaza ile değiştirin. Muhafaza basitçe modifiye edilmiş üç mililitrelik bir şırınga gövdesidir.

Basınç dönüştürücüsünü bir halkaya sıkıştırın. Tıkanmayı önlemek için görüntüleme platformunun yaklaşık yüksekliğinde durun. Mümkün olan en büyük iğne boyutunu iğne borusuna takın ve birkaç damlaya kadar daha fazla heparinize salin enjekte edin.

İğneden tekrar çıkın. Hortumun içinde veya dönüştürücünün üzerinde kabarcık sıkışmadığından emin olun. Şimdi, görüntüleme platformuna bir höyük ultrason jeli yerleştirin.

İğneyi üç mililitrelik şırınga gövdesinden, iğnenin eğimli kenarı yukarı bakacak şekilde döndürün. Ardından, ayarlanabilir standı kullanarak, iğnenin doğrudan jelin içine ilerletilebilmesi için probu dikkatlice hizalayın. Görüntüleme probunun merkezinin altında, iğne, prob kapağını delmeyecek kadar probun altında, ancak prob odak derinliği içinde olacak kadar yakın olmalıdır.

Gerekirse, iğne hareketi boyunca doğru düzlemde kalması için elle bükülebilir. Hizalamayı koruyarak, iğneyi geri çekin ve görüntüleme platformuna bir fare yerleştirmek için görüntüleme probunu kaldırın. Fare anestezisine devam etmeden önce iğneyi değiştirin.

Zamanlanmış bir hamile anne veya yenidoğan faresi,% 1.5 Isof flor tüpünün sürekli solunmasıyla, erken bir yenidoğan faresinin küçük kafasını barındırmak için standart bir burun konisine yerleştirilebilir. Yenidoğan fareler için, fareyi, LV tepesi enjeksiyon koluna bakacak şekilde dorsal dekübit pozisyonunda ultrason sisteminin görüntüleme platformuna sabitleyin. Yenidoğan fareler için, vücut sıcaklıklarını harici bir ısı lambası ile koruyun.

Hamile fareler daha fazla hazırlık gerektirir. Bağlı EKG dedektörüne bağlantı sağlamak ve kalp atış hızını izlemek için ekstremitelere ultrason jeli uygulayın. Geri bildirim için rektal termometreyi yerleştirin.

Vücut ısısının kontrolü. Tüy dökücü krem ile karnınızdaki tüyleri alın ve suyla durulayın. Diseksiyon makası ve kavisli forseps kullanarak karnı kesin.

Bir rahim boynuzunu dışsallaştırın ve ılık tuzlu suyla nemlendirilmiş bir gazlı bez pedine yerleştirin. Bu prosedür boyunca, tüm embriyoları ve annelerinin karnını nemli tutun. Periyodik olarak ılık salin ilaveleriyle, LV'nin parasternal uzun eksen görünümünü elde etmek için bir embriyoyu dikkatlice uygun pozisyona getirin Ultrason probunu kullanarak, embriyonun oryantasyonunu korumaya yardımcı olmak için bir rulo gazlı bez kullanılabilir.

İşlemi diğer rahim boynuzu ile tekrarlamadan önce bir rahim boynuzundaki tüm embriyolardaki basıncı ölçmeye devam edin. Önceden uyarılmış Degas ultrason jelini embriyonik veya yenidoğan bir fareye yerleştirerek başlayın. Optimum bir parasternal LV uzun eksen görünümü elde etmek için görüntüleme probunu indirin ve görüntüleme platformunun açısını ayarlayın.

İğne hizalaması kaybolacağından probun açısını ayarlamayın. Ultrason ekranında LV görüntüsünü izlerken, iğneyi probun dibine yakın olana kadar yavaşça ilerletin. Hizalama kaymalarını düzeltmek için gerekirse iğne ve prob konumunu ayarlayın.

Yenidoğan faresinden alınan görüntü, bir embriyo ile elde edilmesi zor olan lv için ideal bir yönelim göstermektedir. Basınç verilerini kaydetmeye başlayın. İğneyi tuzlu suyla nazikçe yıkayın ve durdurma musluğunu 20 mililitrelik şırıngaya ve atmosfere kapatın.

Basıncı gözlemleyin. İğneye minimum basınç uygulanmasını sağlamak için programda artış. İğneyi, ultrason görüntüsünün kenarında görünene kadar yavaşça ilerletin, ancak henüz lv'de değil.

Gerekirse, LV'ye apeksten girmek için iğnenin konumunu ayarlayın. İğnenin net bir görüntüsünü korumak için gerekirse prob konumunu ayarlayın. Basınç verilerini kaydederken ve ultrason görüntüsünde iğne konumunu izlerken iğneyi LV lümenine ilerletin.

Basınç dönüştürücüsünden pulsatil kayıtların başlaması, AG lümeninin içindeki konumu doğrular. İğne AG lümeninde görünüyorsa, ancak basınç kayıtları pulsatil değilse, bir basınç artışı algılanana kadar iğneyi şırınga pistonuna hafif bir dokunuşla yıkayın. Basınç ölçümleri sırasında kalbin davranışını değiştirmemek için sıvı yıkaması minimum düzeyde olmalıdır.

Basınç okumaları hala pulsatil değilse, iğne doğru düzlemin üstünde veya altında olabilir ve LV lümenine yerleştirilmemiş olabilir. İğneyi geri çekin, tuzlu suyla yıkayın ve ilerletin. Bir daha.

Pulsatil okumalar hala elde edilmediyse, bir sonraki fareye geçin ve her yeni fare için her zaman yeni bir iğne kullanın. Deney süresi boyunca embriyolara ve yenidoğanlara verilen sıkıntıyı en aza indirmek için tüm prosedür mümkün olduğunca çabuk yapılmalıdır. C 57 Black six J farenin ventriküler basıncı bir E 18 faresinde ölçüldü.

Beklendiği gibi, iğne LV'nin dışındayken basınç sıfıra yakındı ve basınç, daha eski bir P 14 fare için LV'nin içindeyken pulsitil bir okuma gösterdi. Basınç büyüklüğü daha büyük ve kalp atış hızı daha yüksek olduğu için basınç okuması sönümlenmişti. Kalp atış hızları, E 18 ve P 14 arasındaki çeşitli yaşlar için pulsatil basınç ölçümlerinin sıklığından belirlendi.

Kalp atım hızları ölçüldü ve sistolik LV basınçları hesaplandı. Bu işlemi gerçekleştirirken, embriyoları periyodik olarak nemlendirmeyi ve annenin durumunu kontrol etmeyi unutmamak önemlidir. Bu teknik, kardiyovasküler fizyoloji araştırmacılarının gelişmekte olan farelerde kan basıncı değişikliklerini keşfetmelerinin yolunu açıyor.