التصوير المقطعي التماسك البصري: التصوير الماوس العقدة الشبكية خلايا في فيفو

الهدف العام من هذه التجربة هو استخدام التصوير المقطعي للتماسك البصري أو OCT للحصول بسرعة على تقييم دقيق لسمك الشبكية. يمكن أن يساعد OCT في الإجابة على الأسئلة الرئيسية في مجال طب العيون مثل الاعتلال العصبي البصري. الميزة الرئيسية لهذه التقنية هي أنها طريقة غير جراحية للكشف عن التغيرات الهيكلية في خلايا العقدة الشبكية للفأر.

هذه التقنية مثيرة للاهتمام حقا لأنها طريقة غير جراحية وآمنة وذات سمعة طيبة لاختبار تأثير العلاج في الاعتلال العصبي البصري. للبدء ، اضبط أولا إعدادات الذراع المرجعي المناسبة للعدسة. بعد ذلك ، قم بتشغيل مصدر الطاقة والكمبيوتر.

عندما يكون الكمبيوتر جاهزا ، قم بتشغيل برنامج التصوير. إنشاء دراسة سريرية جديدة وإضافة البروتوكولات المطلوبة. انتقل إلى قسم فحص المريض وقم بتعيين الإعدادات الافتراضية للامتحان.

انقر فوق إضافة مريض في قسم فحص المريض لإضافة مريض جديد وإدخال معلومات المريض ذات الصلة. ثم انقر فوق وأضف الاختبار وابدأ الاختبار وأضف عمليات مسح مسوحة مسبقة من القائمة لتحديد البروتوكول المطلوب بدءا من العين التي سيتم قياسها أولا. قبل 15 دقيقة على الأقل من الحصول على البيانات ، قم بغرس قطرات من درجة حرارة الغرفة 10٪ فينيليفرين في كل عين من جميع الفئران التي سيتم اختبارها.

ثم قم بإزالة الكاشف الزائد وغرس قطرات من درجة حرارة الغرفة 0.5٪ تروبيكاميد. قبل حوالي خمس دقائق من الاستحواذ ، قم بتحفيز التخدير العام. بعد ذلك مباشرة ، قم بإعطاء 0.4٪ أوكسي بوبروكائين هيدروكلوريد لكل عين ، مع ترك المحلول في مكانه لمدة ثلاث ثوان لتخدير العينين وشل حركتها.

ثم قم بإزالة القطرات وكرر تركيب 10٪ فينيليفرين و 0.5٪ تروبيكاميد. عندما تكون العينان متسعات بشكل كاف للتصوير ، قم بتليين العينين بقطرات العين اللزجة القائمة على الجليكول لتوفير ترطيب القرنية ولف الفأر بورقة من الشاش الجراحي لإبقائه دافئا. باستخدام إسفنجة أو فتيل قطني ، ضعي طبقة رقيقة من جل العيون المكملة بنسبة 0.3٪ هيبروميلوز على كل عين.

أثناء القيام بذلك ، ضع الرموش والشعيرات جانبا. ضع الماوس في الكاسيت بحيث يكون الرأس مستقيما وموجها إلى الأمام وضع شريط العض في فمه بحذر. ضع لفافة قطن تحت جانب للعين التي يتم فحصها.

بعد ذلك ، مع الحفاظ على المشبك على طرف التصويب على العدسة الخاصة بالماوس ، قم بتدوير برغي المترجم z عكس اتجاه عقارب الساعة لجلب العدسة نحو العين. اضبط موضع الماوس مسبقا عن طريق تدوير الكاسيت وتدويره وتدوير شريط العض ومسامير المترجم x حتى يتم وضع العين التجريبية للنظر مباشرة إلى العدسة. عند محاذاة المحور البصري للعين والعدسة ، حدد الفحص الأول في الفحص.

انقر فوق بدء التصويب واستخدم برغي z-translator لتحريك شبكية العين عموديا في اللوحة اليسرى وأفقيا في اللوحة اليمنى. عن طريق تدوير الكاسيت، حرك رأس العصب البصري لأعلى أو لأسفل لإحضاره إلى منتصف اللوحة اليمنى. استخدم برغي قضيب العض لتصويب شبكية العين داخل اللوحة اليمنى وقم بتدوير الكاسيت لوضع رأس العصب البصري في منتصف اللوحة اليسرى.

ثم استخدم برغي x-translator لتسوية شبكية العين داخل اللوحة اليسرى مع الأخذ في الاعتبار الوظيفة الرئيسية لكل معدل ، اضبط موضع شبكية العين للحصول على مركزية مثالية على رأس العصب البصري. عندما تكون شبكية العين في موضعها، انقر فوق بدء اللقطة لبدء مسح التصوير المقطعي للتماسك البصري للمجال الطيفي. لا تنس حفظ الفحص والتقرير.

اضبط المركزية إذا لزم الأمر. عند اكتمال المسح ، اسحب العدسة وضع العين الثانية كما هو موضح للتو. بعد فحص العين الثانية ، قم بإزالة الماوس من الكاسيت ، وقم بتطبيق جل العيون مع 0.3٪ هيبروميلوز على كل عين وضع الماوس على لوحة تسخين مع المراقبة حتى الشفاء التام.

للتركيز على الخلايا العقدية الشبكية ، استخدم ماكرو أداة الشبكية بالرنين المغناطيسي التي تم إنشاؤها للصورة J.افتح أداة MRI Retina وقم بتعديل أداة تحديد المضلع وقم بتحميل الصورة التي تهمك. انقر على M لبدء القياس، ثم انقر فوق E لضبط الوضع الأفقي. حدد الدرج الأول في نافذة إدارة منطقة الاهتمام التي تم فتحها حديثا.

انقر فوق المضلع الأزرق وانقر على حدود الطبقة المقاسة في الصورة لضبط موضع الكاسيت الأول. حدد الكاسيت الثاني في نافذة مدير منطقة الاهتمام واضبط الكاسيت الثاني. ثم انقر فوق R ، لإعادة قياس شبكية العين وعرض النتائج في نافذة القياسات.

على الرغم من أن جودة فحص OCT للمجال الطيفي ليست جيدة مثل جودة صورة المقطع العرضي للشبكية ، إلا أن OCT يسمح بتصور المزيد من الطبقات. يتم قياس طبقات الشبكية بسهولة في فحص OCT وتشمل الألياف العصبية للشبكية في طبقات الخلايا العقدية ، والطبقة النووية الداخلية ، والطبقة الخارجية ، والطبقة النووية الخارجية ، والطبقة النووية الخارجية ، وطبقات الجزء الداخلي والخارجي ، وظهارة صبغة الشبكية والمشيمية ، مما يسمح بإجراء دراسة معقدة لشبكية العين بأكملها. تم توضيح قياس OCT لسمك الشبكية للتو ، مما يشير إلى أن إناث الفئران OPA1 المتحولة وراثيا ضعيفة البصر تظهر سماكة تدريجية لمركب الخلايا العقدية وطبقات الألياف العصبية المحيطة بالشبكية.

توضح مقارنة ألياف عصبية شبكية العين في سمك طبقة الخلية العقدية باستخدام الفرجار القياسي ومحلي الصنع ، أن الفرجار القياسي يقيس سمكا أقل بكثير من الفرجار محلي الصنع ، حيث أن الفرجار القياسي أكثر سمكا ويصعب وضعه على حدود طبقة رقيقة. بمجرد إتقانها ، يمكن القيام بهذه التقنية في 15 دقيقة إذا تم إجراؤها بشكل صحيح. بعد تطويره ، مهد OCT الطريق للباحثين في مجال طب العيون لتحليل التغيرات الهيكلية في شبكية الفئران.

بعد مشاهدة هذا الفيديو ، يجب أن يكون لديك فهم جيد لكيفية إجراء وتحليل التصوير المقطعي الآلي للخلايا العقدية الشبكية في الفئران.