外傷性脳損傷後のラットの行動の赤字を検出

ここで紹介する行動テストの全体的な目標は、外傷性脳損傷後のラットの機能障害を検出することです。神経学的または認知機能の欠損を検出する 4 つの異なるテストが提示されます。これらの方法は、損傷後に脳のどの領域が損傷を受けるか、実験的治療が効果的かどうかなど、脳損傷研究の分野における重要な質問に答えるのに役立ちます。

これらの技術の主な利点は、多くの研究室で確立されており、再現性があることが証明されているだけでなく、爆風損傷や脳卒中などのさまざまな種類の脳損傷に敏感であることです。これらの技術は、外傷性脳損傷が神経学的および認知機能にどのように影響するかについてのさらなる理解、およびラットでの実験的治療のテストに貢献します。一般に、この方法に不慣れな個人は、ラットの取り扱い経験が不十分であり、トレーニングやテストの前にラットを順応させるのに十分な時間がないため、苦労します。

これは、テスト時間をより効果的にするために、ラットを落ち着かせるために必要です。前肢屈曲テストでは、ラットの尻尾を持ち上げ、テーブルの表面から約6〜12インチ上に保持して、トレーニングを開始します。ラットが前肢を伸ばすか曲げるかを観察します。

屈曲の有無を1で、屈曲の有無をスコアシートにゼロで採点します。次に、後肢屈曲テストのために、ラットの尾を再び持ち上げ、テーブルの表面から約6〜12インチ上に保持します。ラットが後肢を伸ばすか曲げるかを観察し、屈曲の有無を1で、屈曲の不在をゼロで採点します。

次のテストでは、ラットの尻尾を持ち上げ、鼻が端から約10センチメートル離れるまで、テーブルの端に向かってゆっくりと下げます。ひげが端に触れないように、ラットをゆっくりと端に向かって動かします。ラットが前足をテーブルに向かって伸ばすかどうかを観察します。

前足が伸びているかどうかを採点します。次に、接触トリガー配置テストでは、ラットの体と手をテーブルの端と前足と平行にして保持します。片側のひげがテーブルの端に触れるまで、ラットをテーブルの端に向かってゆっくりと下げます。

ひげが触れるとすぐに、ラットがテーブルに触れているひげと同じ側の前肢をテーブルの端に向けて伸ばすかどうかを観察します。テーブルに向かって手を伸ばすかどうかを採点します。最後に、後足把持反射テストでは、親指と人差し指でラットを片手で胸の前肢の下の胸の周りに持ちます。

人差し指で各後足の手のひらにそっと触れます。ラットが人差し指を握っているかどうかを観察し、握っているかどうかを採点します。手術の24時間後、ラットをビームに乗せてタイマーを開始して、ビームバランステストを開始します。

ラットを60秒間観察し、ワークシートにスコアを記録します。ラットを実験者の腕または自宅のケージのいずれかで、試行の合間に少し休ませます。まず、ネズミをゴールボックスに1分間置きます。

1分後、ラットを取り外し、ライトとホワイトノイズをオンにしてトライアルを開始します。ゴールボックスに最も近いペグ穴の位置にネズミを梁に置き、ネズミがゴールボックスに入るのを待ちます。ラットの前足がゴールボックスのしきい値を超えたら、すぐにライトとノイズソースをオフにして、1回の試行の終了に注意してください。

各試行の間にラットをゴールボックスで30秒間休ませます。ビームウォークトレーニングを各ペグ位置と開始位置から1回繰り返します。ペグを穴に挿入し、ペグを所定の位置にして1回の完全なビームウォークを実行します。

次に、ストップウォッチを使用して、各試行の時間を計り、ラットが5秒以内に3回の試行を完了するまで繰り返します。手術の24時間後、ペグが所定の位置に設置された完全なビームを使用して、ラットをビームウォークでテストします。視覚的な手がかりは部屋のあちこちに配置されており、ネズミが隠されたプラットフォームの場所を学習して覚えるための目印を提供します。

ビデオトラッキングソフトウェアを開き、プラットフォームの位置、水泳の長さ、試行回数、動物の数、治療グループを含む水路マップを含む正しいプロトコルをロードして、最初のトライアルを開始します。プラットフォームを割り当てられた場所に置き、ソフトウェアの地図と一致することを確認します。次に、ラットを割り当てられた場所の壁に面したタンクに置き、追跡プログラムおよび/またはストップウォッチのタイマーをすぐに開始します。

ラットがプラットフォームを見つけるのに120秒待ちます。ネズミがプラットフォームを見つけたら、ストップウォッチを停止し、ワークシートに時間を記録します。ラットがプラットフォームを見つけられなかった場合は、手でプラットフォームに誘導し、120秒を記録することに注意してください。

試行の合間にラットをプラットフォームに15秒間留まらせます。試行2の後、ラットを加熱された囲いに4分間置きます。最後に、プラットフォームを2番目の場所に移動し、ソフトウェアの地図と一致することを確認します。

4つの開始位置とプラットフォームのペアリングがすべて完了するまで、試行1と2の手順を繰り返します。ニューロスコア手順の結果は、手術前のゼロ日目に偽陽性になる可能性と、このテストの感度の両方でTBIグループの小さな違いを検出すること、つまりゼロ日目が1日目、2日目、3日目と異なることを示しています。ビームバランスの結果は、損傷直後と損傷後より長い時点での欠損に対するビームバランステストの感度を示しています。

ビームウォークテストの結果は、損傷後早期に欠損を示しました。しかし、損傷後6か月までに、グループ間に有意差はなく、損傷したグループで治癒が起こったことが示唆されています。さらに、作業記憶の欠損は損傷後3か月で示され、作業記憶と参照記憶の両方が損傷後12か月で欠損を示しました。

ラットを取り扱いに順応させ、ニューロスコア、ビームウォーク、ビームバランステストの事前訓練を行うことが重要です。習得すれば、短い神経学的評価は、特別な機器なしで迅速に行うことができます。ニューロスコア、ビームバランス、ビームウォークの手順の後、さまざまなバージョンの水迷路や、新しい物体認識テストなどの他の行動パラダイムを使用して、学習と記憶に関連する追加の質問に答えることができます。

このビデオを見た後、行動測定を使用して神経学的および認知的欠陥を検出する方法について十分に理解しているはずです。行動実験を行う際のハンドリング、事前トレーニング、一貫性への順応はすべて重要です。