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October 20, 2023
DOI:
10.3791/65525-v
糖免疫学小组的研究范围是研究聚糖免疫学在人类健康和疾病中的作用。本研究旨在解开糖基化调节的生物学机制,并发现针对癌症和先天性糖基化疾病的新型聚糖疗法。我们的重点是影响相关分子功能的唾液酸化聚糖,特别是在反应过程中。
我们开发了改变唾液酸含量的技术,以及用于高通量溶解聚糖结合蛋白的多模式平台,具有潜在的临床应用。为了推进该领域的研究,我们使用了多种技术,例如聚糖分析、选择或抗体染色、质谱和免疫组化、以细胞系为疾病模型的体外测定、通过酶和代谢工程操纵唾液酸含量。目前的实验挑战涉及理解唾液酸化聚糖和凝集素之间的复杂相互作用。
在几种免疫反应中存在机制和功能后果。唾液酸调节树突状细胞的效力和 MHC1 的更新。这一发现确定了新的生物学和病理机制,并开发了创新疗法。
它还确定了新的免疫途径和治疗调节方法。用于治疗用途的人单核细胞来源的树突状细胞的离体生产问题之一是它们无法完全成熟。该方案表明,DC成熟可以通过用唾液酸酶酶处理细胞表面来实现,同时保持细胞活力。
这种方法具有成本效益且节省时间。与唾液酸代谢抑制剂相比,唾液酸酶治疗提供了一种快速、有效的去除细胞表面唾液酸的方法,同时保持细胞活力。了解唾液酸含量在聚糖中的作用,可以先行了解这种聚糖在癌症中的重要性,并将促进新疾病机制和神经病变策略的识别。
提出了一种独特的、全面的方案,使用唾液酸酶处理从分离的外周血单核细胞 (PBMC) 中产生去唾液酸化的人单核细胞来源的树突状细胞 (mo-DC)。此外,还描述了评估mo-DCs的表型和功能表征以及评估唾液酸酶处理如何改善mo-DCs成熟水平的方法。
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Cite this Article
Luz, V. C. C., Silva, Z., Sobral, P., Tanwar, A., Paterson, R. L., Videira, P. A. Generation of Monocyte-Derived Dendritic Cells with Differing Sialylated Phenotypes. J. Vis. Exp. (200), e65525, doi:10.3791/65525 (2023).
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